臨床分離的銅綠假單胞菌對頭孢菌素類抗生素耐藥機制的研究
本文關(guān)鍵詞: 銅綠假單胞菌 耐藥機制 β-內(nèi)酰胺酶 主動外排作用 出處:《四川大學(xué)》2006年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的:研究臨床分離的62株銅綠假單胞菌對β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥情況,并探討其對頭孢菌素類抗生素的耐藥機制。 方法:瓊脂二倍稀釋法測定7種β-內(nèi)酰胺類抗生素對銅綠假單胞菌的MIC值;水解Nitrocefin法定性初篩β-內(nèi)酰胺酶;ESBLs的表型確證試驗初篩ESBLs;三維試驗檢測高產(chǎn)AmpC酶;提取基因組DNA和質(zhì)粒DNA,用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測β-內(nèi)酰胺酶的類型;改良三維試驗檢測酶抑制劑(克拉維酸、舒巴坦、他唑巴坦、苯唑西林、乙二胺四乙酸)對β-內(nèi)酰胺酶的抑制作用;轉(zhuǎn)化試驗檢測β-內(nèi)酰胺酶基因是否具有轉(zhuǎn)移性;測定β-內(nèi)酰胺酶的活性單位;氰氯苯腙(CCCP)抑制試驗和反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測銅綠假單胞菌對頭孢菌素類抗生素的主動外排作用。 結(jié)果:臨床分離的62株銅綠假單胞菌對亞胺培南、美洛培南、頭孢吡肟、頭孢他啶、頭孢哌酮、頭孢噻肟、頭孢曲松的耐藥率分別為45.16%、29.03%、27.42%、30.64%、58.06%、58.06%、67.64%。有24株銅綠假單胞菌產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶,表型確證試驗檢測出有3株產(chǎn)ESBLs,,三維試驗檢測出有3株高產(chǎn)AmpC酶。用PCR方法檢測出有19株產(chǎn)TEM型ESBLs,其中有1株僅合并產(chǎn)質(zhì)粒介導(dǎo)的DHA-1型AmpC酶,其中有1株合并產(chǎn)染色體介導(dǎo)的SHV型ESBLs和質(zhì)粒介導(dǎo)的DHA-1型AmpC酶,無產(chǎn)
[Abstract]:Objective: to study the resistance of 62 strains of Pseudomonas aeruginosa to 尾-lactam antibiotics and to explore the mechanism of resistance to cephalosporins. Methods: the MIC values of 7 尾-lactam antibiotics against Pseudomonas aeruginosa were determined by Agar double dilution method. 尾 -lactamases were identified by hydrolytic Nitrocefin method. The phenotypic confirmatory test of ESBLs was used to screen ESBLs. High yield AmpC enzyme was detected by three dimensional test. Genomic DNA and plasmid DNA were extracted and the type of 尾 -lactamases was detected by polymerase chain reaction (PCR). The inhibition of 尾 -lactamases by enzyme inhibitors (clavulanic acid, sulbactam, tazobactam, oxacillin, ethylenediamine tetraacetic acid) was examined by modified three-dimensional test. The transformation test was used to detect whether the 尾 -lactamase gene was transferable or not. The activity units of 尾 -lactamases were determined. The active efflux of Pseudomonas aeruginosa to cephalosporins was detected by CCCP-inhibition test and reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). Results: the resistance rates of 62 strains of Pseudomonas aeruginosa to imipenem, meropenem, cefepime, ceftazidime, cefoperazone, cefotaxime and ceftriaxone were 45.16%, respectively. 29.03 there are 24 strains of Pseudomonas aeruginosa producing 尾 -lactamases. Three strains of ESBLs were detected by phenotypic confirmatory test, 3 strains were detected by 3D test, and 19 strains produced TEM type ESBLs by PCR method. Among them, 1 strain only combined with plasmide-mediated DHA-1 type AmpC enzyme, and 1 strain combined with chromosomal mediated SHV type ESBLs and plasmide-mediated DHA-1 type AmpC enzyme.
【學(xué)位授予單位】:四川大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號】:R378
【參考文獻】
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本文編號:1457382
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