本文關(guān)鍵詞：肝細胞生長因子促進骨形態(tài)發(fā)生蛋白9誘導(dǎo)小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞C3H10成骨分化的研究　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》2014年23期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的探討肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)聯(lián)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)誘導(dǎo)小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(C3H10)成骨分化的影響,并探討其可能的分子機制。方法用重組腺病毒介導(dǎo)BMP9在C3H10細胞中過表達,同時聯(lián)用20 ng/m L肝細胞生長因子HGF誘導(dǎo)C3H10細胞,Real-time PCR檢測C3H10成骨分化相關(guān)基因骨鈣蛋白(osteocalcin,OC)及骨橋蛋白(osteopontin,OPN)基因mRNA水平的表達變化;Western blot檢測OC、OPN的蛋白表達水平;ALP染色及ALP讀數(shù)分析C3H10細胞堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的變化;茜素紅S染色檢測細胞的鈣鹽沉積;Real-time PCR檢測經(jīng)典信號通路Smad1/5/8在此誘導(dǎo)過程中的表達水平。結(jié)果 BMP9單獨作用能誘導(dǎo)C3H10細胞向成骨方向分化,并增強細胞ALP活性,單獨HGF有較弱的成骨誘導(dǎo)作用,但與BMP9聯(lián)用可顯著增強C3H10細胞成骨特異性標志物OC與OPN的mRNA及蛋白表達水平(P0.05),促進ALP活性,及晚期的鈣鹽沉積;HGF能刺激Smad1/5/8信號通路mRNA表達水平顯著增高(P0.05)。結(jié)論肝細胞生長因子可顯著增強BMP9誘導(dǎo)C3H10細胞成骨分化的作用,可能是通過激活Smad經(jīng)典信號通路來實現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective to investigate hepatocyte growth factor. HGF combined with bone morphogenetic protein 9bone morphogenetic protein 9. BMP9) induced osteogenic differentiation of mouse bone marrow mesenchymal stem cells (BMP9). Methods Recombinant adenovirus mediated BMP9 overexpression in C3H10 cells. At the same time, C3H10 cells were induced by 20 ng/m L hepatocyte growth factor HGF. Osteocalcin (OC) and osteopontin (osteopontin) were detected by Real-time PCR. The change of mRNA expression level of OPN gene; Western blot was used to detect the protein expression of OCG-OPN. The activity of alkaline phosphatase (ALP) in C3H10 cells was analyzed by ALP staining and ALP reading. Calcium deposition was detected by alizarin red S staining. Real-time PCR was used to detect the expression level of classical signal pathway Smad1/5/8 during the induction. Results. BMP9 alone could induce C3H10 cells to differentiate into osteoblasts. The activity of ALP was enhanced and the osteogenesis induced by HGF alone was weaker. However, combined with BMP9 could significantly enhance the mRNA and protein expression level of OC and OPN in C3H10 cells and promote the activity of ALP. And late calcium deposition; HGF could stimulate the expression of mRNA in Smad1/5/8 signaling pathway and increase the level of mRNA expression significantly (P0.05). Conclusion Hepatocyte growth factor can significantly enhance the osteogenic differentiation of C3H 10 cells induced by BMP9. This may be achieved by activating the classical Smad signaling pathway.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院兒科研究所干細胞實驗室 兒童發(fā)育疾病研究教育部重點實驗室 兒科學(xué)重慶市重點實驗室 重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國際科技合作基地;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金(81100309)~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 點實驗室,兒科學(xué)重慶市重點實驗室,重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國際科技合作基地)骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cell,MSCs)是一類具有自我更新能力和多向分化潛能的多能干細胞,作為骨組織工程中的種子細胞被廣泛研究[1-2],然而在治療骨科疾病中MSCs分化為成骨細胞

【共引文獻】

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