本文關(guān)鍵詞：肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)骨形態(tài)發(fā)生蛋白9誘導(dǎo)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞C3H10成骨分化的研究　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2014年23期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的探討肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(hepatocyte growth factor,HGF)聯(lián)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)誘導(dǎo)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(C3H10)成骨分化的影響,并探討其可能的分子機(jī)制。方法用重組腺病毒介導(dǎo)BMP9在C3H10細(xì)胞中過表達(dá),同時(shí)聯(lián)用20 ng/m L肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子HGF誘導(dǎo)C3H10細(xì)胞,Real-time PCR檢測(cè)C3H10成骨分化相關(guān)基因骨鈣蛋白(osteocalcin,OC)及骨橋蛋白(osteopontin,OPN)基因mRNA水平的表達(dá)變化;Western blot檢測(cè)OC、OPN的蛋白表達(dá)水平;ALP染色及ALP讀數(shù)分析C3H10細(xì)胞堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的變化;茜素紅S染色檢測(cè)細(xì)胞的鈣鹽沉積;Real-time PCR檢測(cè)經(jīng)典信號(hào)通路Smad1/5/8在此誘導(dǎo)過程中的表達(dá)水平。結(jié)果 BMP9單獨(dú)作用能誘導(dǎo)C3H10細(xì)胞向成骨方向分化,并增強(qiáng)細(xì)胞ALP活性,單獨(dú)HGF有較弱的成骨誘導(dǎo)作用,但與BMP9聯(lián)用可顯著增強(qiáng)C3H10細(xì)胞成骨特異性標(biāo)志物OC與OPN的mRNA及蛋白表達(dá)水平(P0.05),促進(jìn)ALP活性,及晚期的鈣鹽沉積;HGF能刺激Smad1/5/8信號(hào)通路mRNA表達(dá)水平顯著增高(P0.05)。結(jié)論肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子可顯著增強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)C3H10細(xì)胞成骨分化的作用,可能是通過激活Smad經(jīng)典信號(hào)通路來實(shí)現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective to investigate hepatocyte growth factor. HGF combined with bone morphogenetic protein 9bone morphogenetic protein 9. BMP9) induced osteogenic differentiation of mouse bone marrow mesenchymal stem cells (BMP9). Methods Recombinant adenovirus mediated BMP9 overexpression in C3H10 cells. At the same time, C3H10 cells were induced by 20 ng/m L hepatocyte growth factor HGF. Osteocalcin (OC) and osteopontin (osteopontin) were detected by Real-time PCR. The change of mRNA expression level of OPN gene; Western blot was used to detect the protein expression of OCG-OPN. The activity of alkaline phosphatase (ALP) in C3H10 cells was analyzed by ALP staining and ALP reading. Calcium deposition was detected by alizarin red S staining. Real-time PCR was used to detect the expression level of classical signal pathway Smad1/5/8 during the induction. Results. BMP9 alone could induce C3H10 cells to differentiate into osteoblasts. The activity of ALP was enhanced and the osteogenesis induced by HGF alone was weaker. However, combined with BMP9 could significantly enhance the mRNA and protein expression level of OC and OPN in C3H10 cells and promote the activity of ALP. And late calcium deposition; HGF could stimulate the expression of mRNA in Smad1/5/8 signaling pathway and increase the level of mRNA expression significantly (P0.05). Conclusion Hepatocyte growth factor can significantly enhance the osteogenic differentiation of C3H 10 cells induced by BMP9. This may be achieved by activating the classical Smad signaling pathway.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院兒科研究所干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室 兒童發(fā)育疾病研究教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 兒科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國(guó)際科技合作基地;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金(81100309)~~
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,兒科學(xué)重慶市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,重慶市兒童發(fā)育重大疾病診治與預(yù)防國(guó)際科技合作基地)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cell,MSCs)是一類具有自我更新能力和多向分化潛能的多能干細(xì)胞,作為骨組織工程中的種子細(xì)胞被廣泛研究[1-2],然而在治療骨科疾病中MSCs分化為成骨細(xì)胞

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1439929