本文關(guān)鍵詞：EDA-A1基因突變體對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV304增殖及細(xì)胞周期的影響　出處：《重慶醫(yī)學(xué)》2014年31期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的研究少汗型外胚層發(fā)育不良癥EDA-A1基因突變體對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(ECV)周期和增殖活性的影響。方法構(gòu)建EDA-A1基因編碼序列(CDS)突變體和野生型的真核表達(dá)載體pcDNA3.1(-)-EDA-A1-M/W,轉(zhuǎn)染人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)擴(kuò)增EDA-A1基因,蛋白免疫印跡法(Western blot)法檢測(cè)EDA-A1蛋白表達(dá),MTT法、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)EDA-A1基因突變體對(duì)ECV細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響。結(jié)果 RT-PCR、Western blot結(jié)果顯示,野生型組和突變體組ECV細(xì)胞表達(dá)EDA-A1基因及其蛋白,而空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組[pcDNA3.1(-)]和空白對(duì)照組細(xì)胞無表達(dá)。與對(duì)照組(空質(zhì)粒租)相比,突變體組ECV細(xì)胞增殖活性下降,生長(zhǎng)抑制率為45.70%(P0.01),野生型細(xì)胞增殖活性無明顯改變(P0.05)。突變體組中有更多細(xì)胞進(jìn)入G0/G1期、S期;野生型組S期細(xì)胞增多,G2/M期細(xì)胞明顯減少(P0.05)。結(jié)論突變體和野生型EDA-A1基因?qū)CV細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期有不同的生物學(xué)功能。
[Abstract]:Study of hypohidrotic ectodermal dysplasia mutant EDA-A1 gene on human umbilical vein endothelial cells (ECV) of cycle and proliferation. Methods to construct EDA-A1 gene encoding sequence (CDS) eukaryotic expression vector of pcDNA3.1 mutant and wild type (-) -EDA-A1-M/W was transfected into human umbilical vein endothelial cells, reverse transcription PCR (RT-PCR) EDA-A1 gene was amplified by Western blotting (Western blot) expression of EDA-A1 protein was detected by MTT method. The effect of the mutant EDA-A1 gene were detected by flow cytometry on proliferation and cell cycle of ECV cells. The results of RT-PCR and Western blot results showed that the wild type and mutant group group ECV cells expressing EDA-A1 gene and its protein, and empty plasmid transfection group (- [pcDNA3.1)] and control group and control group. The expression of cell (empty plasmid rent) compared to decreased ECV cell proliferation activity mutant, growth inhibition rate was 45.70% (P0.01), wild type Cell proliferation was not significantly changed (P0.05). The mutant group had more cells in G0/G1 phase, S phase; wild type group S phase cells, G2/M phase cells decreased significantly (P0.05). Conclusion the mutant and wild-type EDA-A1 gene function on ECV cell proliferation and cell cycle were different.

【作者單位】： 四川省廣元市中心醫(yī)院口腔科;四川大學(xué)口腔疾病重點(diǎn)研究實(shí)驗(yàn)室;蘭州大學(xué)生命科學(xué)院細(xì)胞生物學(xué)研究所;蘭州大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院口腔修復(fù)科;
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 臨床上先天多個(gè)或者全部牙齒缺失的病例以少汗型外胚層發(fā)育不良癥(hypohidrotic ectodermal dysplasia,HED,OMIM305100)、Axenfeld-Rieger綜合征(OMIM180500)、Hallermann-Streiff綜合征(OMIM234100)最為常見[1]。HED又稱為無汗型外胚層發(fā)育不良癥(anhidrotic ectodermal dys-

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1432882