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HB-EGF轉(zhuǎn)基因小鼠的建立和功能研究

發(fā)布時間:2018-01-16 07:04

  本文關(guān)鍵詞:HB-EGF轉(zhuǎn)基因小鼠的建立和功能研究 出處:《中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)》2006年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


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【摘要】:擴(kuò)張性心肌癥是最常見的心臟疾病之一,是導(dǎo)致心臟衰竭的第三大常見原因。選擇性ErbB2剔除的小鼠為研究ErbB2受體特異的抑制劑赫賽汀所引起的擴(kuò)張性心肌病和心力衰竭提供了動物模型,F(xiàn)已證實(shí)ErbBs信號系統(tǒng)在胚胎期心臟的發(fā)育過程中和維持成體心臟的功能方面都具有重要的作用。HB-EGF是ErbB受體的主要配體之一,,HB-EGF通過ErbB受體介導(dǎo)的信號通路在維持心臟的正常功能和心臟瓣膜的發(fā)育中起非常重要的作用。 我們建立了動物模型來進(jìn)一步闡明HB-EGF和ErbB受體在心臟功能和發(fā)育中的作用。本論文分為兩個部分,第一部分:建立HB-EGF的轉(zhuǎn)基因動物模型。第二部分:利用轉(zhuǎn)基因動物模型研究HB-EGF的功能。 首先我們構(gòu)建了α-MHC-HB-EGF表達(dá)載體。為了提高HB-EGF在小鼠體內(nèi)的表達(dá),將HB-EGF的編碼序列插入到在小鼠心臟組織中特定表達(dá)的α-MHC啟動子的下游,然后酶切成線性DNA。把構(gòu)建的線性α-MHC-HB-EGF注射到受精卵的雄原核中,使其發(fā)育成攜帶有HB-EGF的轉(zhuǎn)基因小鼠。通過PCR的方法鑒定轉(zhuǎn)基因的首建鼠。我們得到了兩只HB-EGF陽性的首建鼠。Western blotting發(fā)現(xiàn)16號小鼠中HB-EGF在心臟中的表達(dá)與同窩陰性對照小鼠相比蛋白表達(dá)明
[Abstract]:Dilated myocardium is one of the most common heart diseases. Selective ErbB2 knockout mice provide an animal model for the study of dilated cardiomyopathy and heart failure induced by Herceptin a specific inhibitor of ErbB2 receptor. It has been confirmed that ErbBs signaling system plays an important role in the development of embryonic heart and in maintaining the function of adult heart. HB-EGF is one of the main ligands of ErbB receptor. HB-EGF plays an important role in maintaining the normal function of the heart and the development of heart valve through ErbB receptor-mediated signaling pathway. We have established animal models to further elucidate the role of HB-EGF and ErbB receptors in cardiac function and development. The first part: the establishment of HB-EGF transgenic animal model. The second part: using transgenic animal model to study the function of HB-EGF. Firstly, we constructed 偽 -MHC-HB-EGF expression vector to improve the expression of HB-EGF in mice. The coding sequence of HB-EGF was inserted into the downstream of 偽 -MHC promoter specifically expressed in mouse heart. The constructed linear 偽 -MHC-HB-EGF was injected into the male pronucleus of the fertilized egg. The first transgenic mice were identified by PCR. We obtained two HB-EGF positive first constructed mice. The expression of HB-EGF in the heart of mice 16 was found by blotting as compared with that in the same litter negative control mice.
【學(xué)位授予單位】:中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號】:R-332;Q819

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本文編號:1432022

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