嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒S蛋白與眼部受體—血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2作用機(jī)制的研究
發(fā)布時(shí)間:2018-01-16 02:24
本文關(guān)鍵詞:嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒S蛋白與眼部受體—血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2作用機(jī)制的研究 出處:《第二軍醫(yī)大學(xué)》2005年碩士論文 論文類(lèi)型:學(xué)位論文
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【摘要】:[目的] 研究SARS冠狀病毒(SARS-CoV)S蛋白與眼部功能性受體—血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)作用的機(jī)制。[方法] 構(gòu)建包含SARS-CoV S蛋白融合基因pS240-EGFP和pS666-EGFP,并在哺乳細(xì)胞中表達(dá);半定量RT-PCR和免疫組化鑒定ACE2在結(jié)膜、角膜中的表達(dá);酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、冰凍切片免疫熒光法、流式細(xì)胞儀檢測(cè)法、熒光顯微鏡檢測(cè)法進(jìn)行SARS-CoV S蛋白與結(jié)膜、角膜細(xì)胞的體外結(jié)合研究。[結(jié)果] 構(gòu)建了融合基因pS240-EGFP和pS666-EGFP;證實(shí)ACE2在結(jié)膜、角膜有表達(dá);結(jié)膜、角膜細(xì)胞與SARS-CoV S蛋白能夠結(jié)合,但結(jié)合能力很弱。[結(jié)論] 結(jié)膜、角膜中存在ACE2,SARS-CoV S蛋白與結(jié)膜、角膜細(xì)胞結(jié)合較弱。本研究對(duì)了解SARS的病理機(jī)制及進(jìn)一步研究SARS的防護(hù)和治療具有一定的參考意義。
[Abstract]:[Objective] to study the mechanism of the action of SARS coronavirus SARS-CoV S protein on ocular functional receptor angiotensin converting enzyme 2 (ACE2). [Methods] pS240-EGFP and pS666-EGFP containing SARS-CoV S protein fusion genes were constructed and expressed in mammalian cells. The expression of ACE2 in conjunctiva and cornea was identified by semi-quantitative RT-PCR and immunohistochemistry. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa), frozen section immunofluorescence, flow cytometry and fluorescence microscopy were used to study the binding of SARS-CoV S protein to conjunctiva and corneal cells in vitro. [Results] the fusion genes pS240-EGFP and pS666-EGFP were constructed. It was confirmed that ACE2 was expressed in conjunctiva and cornea. Conjunctiva, corneal cells can bind to SARS-CoV S protein, but the binding ability is very weak. [Conclusion: the conjunctiva and cornea contain ACE2, SARS-CoV S protein and conjunctiva. This study is helpful to understand the pathological mechanism of SARS and to further study the protection and treatment of SARS.
【學(xué)位授予單位】:第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2005
【分類(lèi)號(hào)】:R373
【共引文獻(xiàn)】
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1 孫琰;柳林;潘欣;景明;;SARS-CoV S240蛋白與眼部ACE2受體作用機(jī)制的研究[J];國(guó)際眼科雜志;2006年04期
2 劉珠果;陳紅星;鄧?yán)^先;;血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2的功能和應(yīng)用[J];生物技術(shù)通訊;2008年01期
3 孫琰;柳林;潘欣;;SARS-CoV S666蛋白與眼部ACE2受體的結(jié)合作用[J];眼科新進(jìn)展;2007年04期
相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條
1 陳云新;ACE2基因變異與SARS冠狀病毒進(jìn)入及肺部病變嚴(yán)重程度之間的關(guān)系研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年
,本文編號(hào):1431140
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