本文關(guān)鍵詞：3種方法提取血膜瘧原蟲DNA的比較研究　出處：《中國病原生物學(xué)雜志》2014年05期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 瘧原蟲 血膜 提取DNA

【摘要】：目的對3種提取血膜瘧原蟲DNA的方法進(jìn)行比較研究,篩選出從血膜中提取瘧原蟲DNA的最佳方法。方法血膜依次經(jīng)過二甲苯脫油和乙醇脫色處理,然后分別采用Na2HPO4法、Chelex-100法和試劑盒法提取DNA。根據(jù)瘧原蟲小亞基核糖體RNA編碼基因(18SSSU rRNA)保守區(qū)設(shè)計套式PCR引物,分別以3種方法提取的瘧原蟲DNA為模板進(jìn)行套式PCR擴(kuò)增,并對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序分析。結(jié)果瘧原蟲新血膜(保存1年內(nèi))3種方法提取的DNA經(jīng)PCR擴(kuò)增后均呈陽性且測序成功,與鏡檢結(jié)果一致。Chelex-100法提取的舊血膜(保存1~5年)標(biāo)本和試劑盒法提取的舊血膜和陳舊血膜(保存6~10年)的DNA經(jīng)PCR擴(kuò)增后均呈陽性且測序成功,與鏡檢結(jié)果一致。結(jié)論 3種方法均可成功提取新血膜瘧原蟲DNA,Chelex-100法可提取舊血膜的瘧原蟲DNA,試劑盒提取法適用于舊血膜和陳舊血膜的瘧原蟲DNA的提取。
[Abstract]:Objective to compare the three methods of extracting DNA from Plasmodium falciparum, and to select the best method for extracting DNA from the blood membrane. Methods the blood membrane was decolorized by xylene and ethanol respectively. Na2HPO4 method was used respectively. Chelex-100 and kit methods were used to extract DNA.The nested PCR primers were designed according to the conserved region of plasmodium small subunit ribosomal RNA coding gene (18SSSU rRNAs). The plasmodium DNA extracted by three methods was used as template for nested PCR amplification. The amplified products were sequenced and analyzed. Results the DNA extracted from the new blood membrane of Plasmodium plasmodium (preserved within one year) was all positive after PCR amplification and sequenced successfully. The results were consistent with the results of microscopic examination. Chelex-100 method was used to extract old blood membrane (preserved for 1 ~ 5 years) and kit method to extract old blood membrane and old blood membrane (preserved for 6 ~ 10 years). All the DNA were positive after PCR amplification and sequenced successfully. Conclusion all the three methods can be used to extract DNA from Plasmodium falciparum by Chelex-100 method. The kit extraction method is suitable for the extraction of DNA from old blood membrane and old blood membrane of Plasmodium falciparum.
【作者單位】： 山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院 山東省寄生蟲病防治研究所;濟(jì)南大學(xué) 山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院;濟(jì)南大 學(xué)山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：中國全球基金瘧疾項目實施性研究專項基金(No.201201055) 山東省自然科學(xué)基金項目(No.2012ZRC03040)
【分類號】：R382.31
【正文快照】： 瘧疾是一種世界性嚴(yán)重危害人類健康的寄生蟲病[1]。我國曾是瘧疾高度流行區(qū),間日瘧(Plasmodi-um vivax,Pv)流行最為廣泛,惡性瘧(Plasmodiumfalciparum,Pf)次之。經(jīng)過多年防治,瘧疾流行范圍明顯減小,發(fā)病率已降至較低水平。山東省于1988年在全省范圍內(nèi)達(dá)到原國家衛(wèi)生部頒布的基

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 楊電;劉超;李越;陳玲;胡慧英;李紅霞;陳向紅;;Chelex-100提取生物檢材DNA實時PCR定量研究[J];中國法醫(yī)學(xué)雜志;2008年01期

2 陳榮華;宋清;徐慶文;董研;;吸附性載體上微量血痕的DNA分型[J];法醫(yī)學(xué)雜志;2007年04期

3 周月琴,朱偉,劉志萍,吳文慶;用Chelex-100快速提取微量血痕中的DNA[J];復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2003年04期

4 張山鷹;瘧疾分子流行病學(xué)研究進(jìn)展[J];中國人獸共患病雜志;2002年02期

5 張本光;趙長磊;卜秀芹;魏慶寬;孔祥禮;王用斌;陳錫欣;劉新;李長軍;;山東省瘧疾高發(fā)地區(qū)發(fā)病率與氣象因子的多元逐步回歸分析[J];中國人獸共患病學(xué)報;2013年03期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王時偉;何良軍;楊智秀;;塔里木河上游水域淡水螺種類調(diào)查[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年01期

2 夏和先;雷紅;陳晨;高義;;皖西衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院大學(xué)生蠕形螨感染調(diào)查分析[J];安徽衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報;2011年03期

3 尼宏莉;宮玉香;韓晶;張忠廣;楊永潔;;青島地區(qū)哺乳動物隱孢子蟲感染調(diào)查[J];青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2008年02期

4 宛新榮;經(jīng)宇;趙天飆;郭鵬飛;石巖生;寶祥;王廣和;;錫林郭勒地區(qū)肝毛細(xì)線蟲病自然疫源地與鼠類分布的關(guān)系[J];動物學(xué)雜志;2007年01期

5 高玉振,應(yīng)斌武,吳謹(jǐn),李英碧,張霽,侯一平,賈東濤;親子鑒定數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)軟件的開發(fā)與應(yīng)用[J];中國輸血雜志;2002年04期

6 陳建芳;閆艷;苑丹丹;郭秀瑞;楊宏東;牛兵;杜鳳霞;;大學(xué)生蠕形螨感染情況調(diào)查[J];包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2006年02期

7 楊磊;周俊;蘇慧勇;楊桂益;;35例嗜酸性粒細(xì)胞增多性腦膜炎臨床分析[J];傳染病信息;2008年05期

8 于樂成;何長倫;王長軍;汪茂榮;操敏;郭恒彬;;安徽省恙蟲病新疫源地疫情暴發(fā)特點及意義[J];傳染病信息;2011年01期

9 王永;蘭青闊;張莉;趙新;朱珠;程奕;;改良Chelex-100法和CTAB法用于轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆檢測效果的比較[J];大豆科學(xué);2008年05期

10 嵇建鋒;羅曉明;呂冠明;;1491例孕婦血清中抗弓形蟲抗體IgG、IgM的檢測結(jié)果分析[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2009年09期

相關(guān)會議論文 前4條

1 楊慶恩;楊榮芝;余純應(yīng);陳慧;;單親鑒定——附85例分析[A];中國法醫(yī)學(xué)最新科研與實踐（一）——全國第六次法醫(yī)學(xué)術(shù)交流會論文精選[C];2000年

2 楊劍;劉雅誠;霍振義;王靜;唐暉;;中國人群中D3S1358、vWA、FGA、D21S11、D18S51、D13S317、D7S820基因座稀有基因的發(fā)現(xiàn)[A];中國法醫(yī)學(xué)最新科研與實踐（一）——全國第六次法醫(yī)學(xué)術(shù)交流會論文精選[C];2000年

3 辛軍平;陳國弟;張林;;用DNA分析的方法進(jìn)行法醫(yī)學(xué)檢材的種屬鑒定的研究(綜述)[A];中國法醫(yī)學(xué)最新科研與實踐（一）——全國第六次法醫(yī)學(xué)術(shù)交流會論文精選[C];2000年

4 楊歆璇;羊玉花;楊臘英;李松偉;賈慧升;黃俊生;;Chelex-100法快速提取鐮刀菌基因組DNA[A];公共植保與綠色防控[C];2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 高葦;我國黃瓜棒孢葉斑病的病原學(xué)及診斷技術(shù)的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

2 陳振文;DNA指紋圖與微衛(wèi)星DNA技術(shù)在近交系大、小鼠遺傳監(jiān)測中的應(yīng)用研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

3 許銘炎;四川彝族、新疆維族HLA-B基因多態(tài)性分析及其應(yīng)用研究[D];汕頭大學(xué);2004年

4 張源明;慢性牙周炎和冠心病相關(guān)性的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2004年

5 叢華;弓形蟲多價和多表位核酸疫苗黏膜免疫的實驗研究[D];山東大學(xué);2006年

6 馬秀敏;新疆細(xì)粒棘球絳蟲基因多態(tài)性及實驗診斷學(xué)研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2007年

7 王曄;無電流斑電擊死的實驗研究[D];四川大學(xué);2007年

8 余莉;利用RNA干擾技術(shù)雙通道抑制弓形蟲嘌呤補救合成途徑[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2008年

9 林杰;弓形蟲雞尾酒DNA疫苗的免疫保護(hù)作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2010年

10 范希萍;豆?fàn)顜Ы{蟲不同發(fā)育階段的結(jié)構(gòu)特征及其致病機(jī)理的研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 何東元;駐剛果（金）維和人員及當(dāng)?shù)鼐用癔懺x感染狀況及與當(dāng)?shù)蒯t(yī)院報告方法差異分析[D];蘭州大學(xué);2010年

2 岳進(jìn)巧;犬糞細(xì)粒棘球絳蟲PCR診斷試劑盒的研制[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2010年

3 張旭;絨泡菌目和發(fā)網(wǎng)菌目部分黏菌DNA分子系統(tǒng)學(xué)研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

4 羅浪;云南大理6地域帶絳蟲的分類研究[D];大理學(xué)院;2010年

5 張素卿;基于核糖體18SrRNA和28SrRNA基因的常見肉食螨系統(tǒng)關(guān)系分析[D];南昌大學(xué);2011年

6 李笑竹;COLD-PCR用于混合檢材中微量等位基因富集的可行性[D];河南科技大學(xué);2011年

7 陳雨;刑事訴訟中的DNA鑒定問題研究[D];上海交通大學(xué);2011年

8 圖爾遜·尼亞孜比力蓋;新疆維吾爾族與哈薩克族人群17個Y-STR基因座遺傳多態(tài)性研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2011年

9 杜宏;中國西藏昌都地區(qū)藏族九個STR基因座的遺傳多態(tài)性及法醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究[D];四川大學(xué);2002年

10 張瓊;用PCR方法對虎DNA進(jìn)行特異性檢測的研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2002年

【二級參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 馬雅軍,瞿逢伊,徐建農(nóng),鄭哲民;中華按蚊和嗜人按蚊rDNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔2區(qū)序列差異[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1998年03期

2 馬雅軍,瞿逢伊,徐建農(nóng),鄭哲民;用核糖體DNA鑒別PCR區(qū)分中華按蚊和嗜人按蚊[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1998年03期

3 劉翠蘭,胡家偉;堿性裂解法提取法醫(yī)生物檢材DNA及其法醫(yī)學(xué)應(yīng)用[J];中國法醫(yī)學(xué)雜志;2001年02期

4 林源,闕庭志,李莉,趙珍敏;HLA-DQα和PM位點擴(kuò)增分型技術(shù)在法醫(yī)物證學(xué)上的應(yīng)用[J];法醫(yī)學(xué)雜志;1998年03期

5 楊電,劉超,彭汝標(biāo),劉長暉,潘遠(yuǎn)義;南方漢族、黎族人群15個STR基因座頻率調(diào)查[J];法醫(yī)學(xué)雜志;2002年04期

6 溫亮,徐德忠,王善青,李才旭,張治英,蘇永強(qiáng);海南省瘧疾發(fā)病情況及利用氣象因子進(jìn)行發(fā)病率擬合的研究[J];疾病控制雜志;2003年06期

7 黃天誼,王小力,黎學(xué)銘,黃亞銘,曾風(fēng)秀,車瑩,張思淼,付偉忠,張再興,張國森,蔡賢錚,王善青,王光澤;間日瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白基因型的鑒別研究[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;2000年05期

8 馬雅軍,瞿逢伊,曹毓存,楊寶金;我國雷氏按蚊和嗜人按蚊的分子鑒別和分類地位的探討[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;2000年06期

9 黃天誼,程勤,黃亞銘;不同地理株間日瘧原蟲環(huán)子孢子蛋白基因多態(tài)性的特征[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;1996年01期

10 張山鷹,陸惠民,許龍善,李莉莎,李清山,劉德發(fā),劉慶生;復(fù)式PCR用于閩南瘧疾監(jiān)測的效果評價[J];中國人獸共患病雜志;2001年02期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳建庭,李菊根,金大地;血小板衍生生長因子促進(jìn)成骨細(xì)胞DNA合成的實驗研究[J];中華外科雜志;1999年07期

2 武大林;HLA方法學(xué)進(jìn)展及其DNA分型應(yīng)用[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2001年06期

3 李彩霞,鄭秀芬;單核苷酸多態(tài)性研究進(jìn)展及其在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用[J];國外醫(yī)學(xué).分子生物學(xué)分冊;2002年04期

4 張宏;隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA在醫(yī)學(xué)真菌鑒定與分子流行病學(xué)研究中的應(yīng)用[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊;1995年04期

5 余日安,陳學(xué)敏;鎘對大鼠肝細(xì)胞DNA損傷作用的研究[J];中國公共衛(wèi)生學(xué)報;1998年02期

6 周曉慧;DNA與免疫[J];承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1998年02期

7 朱長軍,張利寧,馬春紅,曹英林,宋靜;一種新型桿狀病毒親本株的鑒定及病毒DNA的純化[J];山東醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2000年01期

8 張秀花,弓巧娟;分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移熒光探針DMAHF的介質(zhì)效應(yīng)及與DNA的作用[J];山西大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2000年01期

9 李永琦;大量提取質(zhì)粒的簡便方法[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2001年09期

10 王會艷,張祥宏,嚴(yán)霞,王俊靈,孫旭明,楊永濱,王鳳榮;黃曲霉毒素G_1對體外培養(yǎng)HPBM增殖及TNF-α分泌的影響[J];中國病理生理雜志;2001年02期

相關(guān)會議論文 前10條

1 邢永政;劉冬生;;ATP誘導(dǎo)的DNA突環(huán)結(jié)構(gòu)的打開及其對DNA鏈替換反應(yīng)的調(diào)控[A];2011年全國高分子學(xué)術(shù)論文報告會論文摘要集[C];2011年

2 陳昌可;胡建安;黃云;武越;熊敏如;;脂氧合酶介導(dǎo)的苯并(a)芘活化及所致DNA損傷[A];全國生化/工業(yè)與衛(wèi)生毒理學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2010年

3 劉偉;梁好均;;鉛離子誘導(dǎo)端粒DNA形成G-四聯(lián)體的構(gòu)象變化研究[A];2011年全國高分子學(xué)術(shù)論文報告會論文摘要集[C];2011年

4 曹黎黎;朱單;田田;王海濤;黃寧平;肖忠黨;;血清素分子對DNA作用的原子力顯微鏡研究[A];第十一次中國生物物理學(xué)術(shù)大會暨第九屆全國會員代表大會摘要集[C];2009年

5 鄭學(xué)禮;胡佳林;;應(yīng)用DNA分子標(biāo)記分析我國部分地區(qū)常見嗜尸蠅類[A];全國寄生蟲學(xué)與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

6 馬麗;徐揚;盧奎;;熒光法研究KKAKVC六肽與DNA的相互作用[A];中國化學(xué)會第十二屆全國應(yīng)用化學(xué)年會論文集[C];2011年

7 顧愛華;王心如;;DNA修復(fù)基因8-羥基鳥嘌呤DNA糖苷酶ogg1調(diào)節(jié)神經(jīng)發(fā)育的易損性研究[A];“細(xì)胞活動 生命活力”——中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會全體會員代表大會暨第十二次學(xué)術(shù)大會論文摘要集[C];2011年

8 王守宇;周建偉;;JWA在氧化應(yīng)激誘導(dǎo)DNA單鏈損傷修復(fù)中的作用[A];中國毒理學(xué)會第三屆中青年學(xué)者科技論壇暨2011年全國前列腺藥理毒理學(xué)研討會論文集[C];2011年

9 顧愛華;王心如;;DNA修復(fù)基因8-羥基鳥嘌呤DNA糖苷酶ogg1調(diào)節(jié)神經(jīng)發(fā)育的易損性研究[A];中國毒理學(xué)會第三屆中青年學(xué)者科技論壇暨2011年全國前列腺藥理毒理學(xué)研討會論文集[C];2011年

10 孫彩霞;陳慧梅;郭文文;張葵;朱大龍;王亞平;;AluYb8MUTYH基因常見變異增加DNA氧化損傷及衰老相關(guān)性疾病的發(fā)病風(fēng)險[A];中國活性氧生物學(xué)效應(yīng)學(xué)術(shù)會議論文集（第一冊）[C];2011年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 王小龍;美科學(xué)家發(fā)現(xiàn)氧基損傷DNA修復(fù)新途徑[N];科技日報;2010年

2 劉峻;南京醫(yī)學(xué)家嘗試提取漢代古尸DNA[N];江蘇科技報;2008年

3 鄭仲承;核酸中DNA復(fù)制延續(xù)生命[N];保健時報;2009年

4 李健 姜維平 陳宣洪 陳爾佳;重組DNA驅(qū)動疫苗第三次革命[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2011年

5 記者 李天舒 通訊員 徐磊;國人首個DNA甲基化全基因圖譜有望繪出[N];健康報;2009年

6 實習(xí)生 程鳳;慢性應(yīng)激引起DNA損傷機(jī)理揭開[N];科技日報;2011年

7 記者 杜華斌;加科學(xué)家破解DNA中“剪接密碼”[N];科技日報;2010年

8 記者 施嘉奇　通訊員 章米力;能否“死里逃生”,DNA說了算[N];文匯報;2010年

9 Marvin;測基因而知天命？[N];經(jīng)濟(jì)觀察報;2009年

10 第四軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室教授 李福洋;你是否愿意花4579元預(yù)測壽命[N];東方早報;2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 沈美龍;基于DNA免疫的乙型肝炎病毒表面抗原大中小蛋白的免疫原性研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

2 鐘毅;線粒體DNA常見缺失在大片段缺失突變中的作用及其發(fā)生機(jī)制[D];華中科技大學(xué);2011年

3 劉澤;口服沙門菌遞送治療性HBV-HSP70融合DNA疫苗的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2011年

4 吳繼魁;基于新型分子信標(biāo)和胸腺嘧啶—汞（Ⅱ）配位作用的DNA和Hg~（2+）檢測技術(shù)研究[D];華東師范大學(xué);2010年

5 李曼君;西咪替丁對日本血吸蟲DNA疫苗免疫保護(hù)作用的影響及其機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2011年

6 朱向瑩;減毒鼠傷寒沙門氏菌介導(dǎo)的抗原遞呈系統(tǒng)在腫瘤治療性口服DNA疫苗及蛋白質(zhì)疫苗制備中的應(yīng)用[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

7 邢泉;靶向防齲DNA疫苗增強(qiáng)粘膜免疫的分子機(jī)制研究[D];武漢大學(xué);2010年

8 曲忠花;HBV對補體殺傷作用的影響及LPS對胞內(nèi)DNA免疫的作用研究[D];山東大學(xué);2010年

9 翟永貞;乙型腦炎DNA疫苗與ICAM-1編碼基因重組子聯(lián)合免疫BALB/c鼠所致細(xì)胞免疫功能的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年

10 陳國鳳;乙型肝炎病毒DNA聚合酶功能域結(jié)合蛋白和反式調(diào)節(jié)基因的研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 蘆麗淦;柚皮素及聚乙二醇增強(qiáng)乙肝DNA疫苗免疫效果的研究[D];河南大學(xué);2010年

2 李朋昆;空氣細(xì)顆粒物暴露對人群DNA損傷的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

3 沈海英;弓形蟲速殖子DNA提取及LAMP檢測弓形蟲的初步研究[D];蘇州大學(xué);2010年

4 胡錦;結(jié)核分枝桿菌DNA修復(fù)fpg基因克隆表達(dá)及性質(zhì)研究[D];西南大學(xué);2010年

5 丁珍珍;結(jié)核分枝桿菌Ag85A基因DNA疫苗的構(gòu)建及其聯(lián)合人IL-12表達(dá)質(zhì)粒誘導(dǎo)的小鼠細(xì)胞免疫應(yīng)答觀察[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

6 王岑;環(huán)介導(dǎo)同溫擴(kuò)增檢測全血日本血吸蟲DNA的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2011年

7 張岳;人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞衰老過程中DNA損傷應(yīng)答特性研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 紀(jì)晗旭;信號放大新策略與DNA檢測新方法研究[D];南京大學(xué);2012年

9 王瑜;陽離子/非離子表面活性劑自組裝及其與DNA的相互作用[D];華南理工大學(xué);2012年

10 高莉;用于防齲DNA疫苗粘膜傳遞的有效載體的研究[D];華中科技大學(xué);2011年

，

本文編號：1414808