本文關(guān)鍵詞：CD137和CD28分子對衰老T細(xì)胞功能調(diào)控作用的研究　出處：《第一軍醫(yī)大學(xué)》2005年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： T細(xì)胞 衰老 小鼠 D-半乳糖 共刺激分子 凋亡 端粒酶

【摘要】：目的 本文比較了D-半乳糖致亞急性衰老模型小鼠與自然衰老小鼠T細(xì)胞功能的變化,研究了CD137分子及CD28分子這兩種共刺激分子對D-半乳糖致亞急性衰老模型小鼠及自然衰老小鼠T細(xì)胞活化增殖、IL-2分泌、細(xì)胞存活、bcl-2分子表達(dá)及端粒酶活化的作用,以探討衰老T細(xì)胞功能變化的主要特點(diǎn)及其功能調(diào)控的分子機(jī)制。 方法 通過給BALB/c雄性小鼠背部皮下注射D-半乳糖(D-gal)建立亞急性衰老小鼠模型。分離D-半乳糖致亞急性衰老模型組(以下簡稱衰老模型組)、自然衰老組、對照組和青齡組小鼠的脾臟T細(xì)胞,分別用conA+IgG、conA+CD137單抗、conA+CD28單抗體外活化,應(yīng)用ELISA測定各組細(xì)胞培養(yǎng)上清IL-2濃度,以MTT改良法(CCK-8法)測定各組細(xì)胞的增殖狀況,流式細(xì)胞術(shù)測定各組細(xì)胞凋亡率,流式細(xì)胞術(shù)及半定量RT-PCR測定衰老模型組及自然衰老組T細(xì)胞bcl-2分子的表達(dá);并應(yīng)用TRAP ELISA法分析各組T細(xì)胞端粒酶的活性。 結(jié)果 (1) 自然衰老組與衰老模型組T細(xì)胞活化后,細(xì)胞增殖能力、培養(yǎng)上清IL-2濃度及細(xì)胞存活率均無顯著性差異,并且這些指標(biāo)均均顯著低于青齡組和對照組T細(xì)胞;(2) 聯(lián)合應(yīng)用conA+CD137單抗或conA+CD28單抗均可顯著促進(jìn)自然衰老組及衰老模型組T細(xì)胞的活化增殖,提高IL-2的分泌水平,降低細(xì)胞凋亡率;但發(fā)現(xiàn)CD137單抗對兩組衰老T細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用比CD28單抗的作用弱;自然衰老組及衰老模型組T細(xì)胞的活化增殖、培養(yǎng)上清中IL-2的濃度以及細(xì)胞存活率均顯著低于相同活化條件下的對照組及青齡組;(3) 發(fā)現(xiàn)應(yīng)用conA+CD137單抗或conA+CD28單抗均能促進(jìn)自然衰老組及衰老模型組T細(xì)胞活化后bcl-2分子及bcl-2 mRNA的表達(dá),其中CD28單抗的作用強(qiáng)于
[Abstract]:Objective to compare the changes of T cell function between subacute aging mice induced by D-galactose and natural aging mice. The effect of CD137 and CD28 costimulatory molecules on T cell activation and proliferation and cell survival in Dgalactose induced subacute aging model mice and natural aging mice were studied. The expression of bcl-2 and the role of telomerase activation in order to explore the main characteristics of aging T cell function changes and the molecular mechanism of functional regulation. Methods Subacute aging model was established by subcutaneous injection of D-galactose-D-galactose-D-galactose-D-galactose-induced subacute aging in BALB/c male mice. The following is referred to as the aging model group. The spleen T cells of natural aging group, control group and young group were activated with conA IgGCon A CD137 McAb, cona CD28 McAb in vitro, respectively. The concentration of IL-2 in the supernatant of cell culture was measured by ELISA, the proliferation of cells in each group was measured by MTT modified CCK-8 method, and the apoptosis rate of each group was measured by flow cytometry. The expression of T cell bcl-2 in aging model group and natural aging group was detected by flow cytometry and semi-quantitative RT-PCR. The telomerase activity of T cells in each group was analyzed by TRAP ELISA assay. Results 1) there was no significant difference in cell proliferation, IL-2 concentration and cell survival rate between natural aging group and aging model group after T cell activation. These indexes were significantly lower than those of young age group and control group. (2) the combination of conA CD137 McAb and conA CD28 McAb could significantly promote the activation and proliferation of T cells and increase the secretion of IL-2 in natural aging group and senescence model group. Reduce the rate of apoptosis; However, the regulatory effect of CD137 McAb on aging T cells was weaker than that of CD28 McAb. The activation and proliferation of T cells, the concentration of IL-2 in culture supernatant and the survival rate of T cells in natural aging group and senescence model group were significantly lower than those in control group and young age group under the same activation condition. 3). It was found that the application of conA CD137 McAb or conA CD28 McAb could promote the activation of bcl-2 molecule and bcl-2 in natural aging group and senescence model group. Expression of mRNA. The effect of CD28 monoclonal antibody is stronger than that of CD28 monoclonal antibody.
【學(xué)位授予單位】：第一軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號】：R392

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10 單聯(lián)U，

本文編號：1408347