本文關(guān)鍵詞：環(huán)孢霉素A對葡萄糖氧化酶誘導(dǎo)的HepG2線粒體功能損傷和細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用　出處：《癌變.畸變.突變》2014年01期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的:探討環(huán)孢霉素A(CsA)對葡萄糖氧化酶(GOX)誘導(dǎo)的肝細(xì)胞線粒體功能損傷和細(xì)胞凋亡的影響。方法:胞分別給予不同濃度的GOX和CsA處理,MTT法檢測細(xì)胞活力,確定所要選用的劑量和時(shí)間點(diǎn)。以10μmol/L的CsA預(yù)處理2 h,并給予25 U/L GOX處理12 h作為CsA+GOX組,同時(shí)設(shè)立空白對照組、GOX陽性對照組、CsA陰性對照組。分別采用Annexin V/PI雙染色結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率;GENMED活體細(xì)胞線粒體膜通道孔熒光試劑盒檢測線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換;JC-1染色激光共聚焦檢測線粒體膜電位變化;ATP檢測試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)ATP水平;液相氧電極法檢測線粒體耗氧量。結(jié)果:MTT結(jié)果顯示GOX能誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞活力下降,且呈現(xiàn)時(shí)間和劑量效應(yīng)關(guān)系(P均0.05);與空白對照組比較,25 U/L GOX作用12 h可誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡,同時(shí)伴有線粒體膜通道開放和膜電位下降,細(xì)胞內(nèi)ATP水平和線粒體耗氧量下降(P均0.05),而10μmol/L的CsA預(yù)處理2 h有一定的保護(hù)作用,可以有效阻斷線粒體結(jié)構(gòu)功能的損傷,降低凋亡率,CsA+GOX組與GOX陽性對照組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。結(jié)論:CsA對氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的肝細(xì)胞線粒體功能損傷和凋亡具有保護(hù)作用。
[Abstract]:Objective: to study the effect of cyclosporine (CsA) on glucose oxidase (GOX). Methods: cells were treated with different concentrations of GOX and CsA respectively. The cell viability was detected by MTT, and the dosage and time point were determined. The cells were pretreated with 10 渭 mol/L CsA for 2 h. The CsA GOX group was treated with 25 U / L GOX for 12 h, and the blank control group was established as the positive control group. CsA negative control group. Annexin V / Pi double staining and flow cytometry were used to detect the apoptosis rate. Mitochondrial membrane permeability was detected by fluorescence kit of mitochondrial membrane channel in GENMED living cells. The changes of mitochondrial membrane potential were detected by confocal laser with JC-1 staining. ATP assay kit was used to detect intracellular ATP level. Results the results showed that GOX could induce the decrease of HepG2 cell viability, and the relationship between time and dose-effect was 0.05%. Compared with the control group, 25 U / L GOX could induce apoptosis of HepG2 cells for 12 h, accompanied by the opening of mitochondrial membrane channel and the decrease of membrane potential. Both intracellular ATP level and mitochondrial oxygen consumption decreased by 0.05%, while 10 渭 mol/L CsA pretreatment for 2 h had a protective effect to some extent. It can effectively block the damage of mitochondrial structure and function and reduce the apoptosis rate. The difference between CsA GOX group and GOX positive control group was statistically significant (P < 0.05). Conclusion: CSA has protective effect on oxidative stress induced mitochondrial dysfunction and apoptosis.
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)系毒理學(xué)教研室;
【分類號】：R329
【正文快照】： 研究表明,線粒體結(jié)構(gòu)功能改變與細(xì)胞凋亡密切相關(guān),大量肝細(xì)胞急性死亡是臨床急性肝損傷、肝衰[1]竭的病理基礎(chǔ)。機(jī)體氧化還原失衡引發(fā)的氧化應(yīng)激是多種肝病發(fā)病的共同病理生理基礎(chǔ),活性氧主要通過肝細(xì)胞線粒體的膜通透性和流動(dòng)性降低,細(xì)胞鈣內(nèi)流,與細(xì)胞因子(如NF-κB、TNF-α

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1405111