發(fā)布時間：2018-01-10 09:00

  本文關(guān)鍵詞：3BP2多克隆抗體的制備及其與SHP-1之間的相互關(guān)系　出處：《吉林大學(xué)》2006年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：為了研究人的適配子蛋白3BP2(又稱作SH3BP2)在細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的生物學(xué)功能,本研究以3BP2的全長cDNA為模板,克隆構(gòu)建了原核融合蛋白表達(dá)載體pGex2T-3BP2質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化大腸桿菌DE3-plysS,進(jìn)行融合蛋白質(zhì)GST-3BP2的高效表達(dá),并利用Gluthione交聯(lián)的Sephorose-4B親和層析柱純化該融合蛋白質(zhì),制備了GST-3BP2。GST-3BP2免疫兔得到這個融合蛋白抗血清,通過抗體的負(fù)選擇和正選擇親和層析柱進(jìn)行純化,制備了抗3BP2兔的多克隆抗體。利用免疫沉淀(Immunoprecipitation)和Western blot等生物學(xué)研究手段,在鼠脾中檢測到了3BP2與SHP1的相互作用。3BP2作為酪氨酸磷酸激酶(PTK)Lyn,Syk的底物參與到與酪氨酸磷酸酶(PTP)SHP-1的信號通路中,這對于闡明與3BP2相關(guān)的TCR,BCR和FcεRI介導(dǎo)的信號通路,深入研究PTP和PTK之間的關(guān)系,為3BP2相關(guān)疾病過敏性疾病和巨頜癥藥物靶點(diǎn)的研究奠定了理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to study the biological function of human aptamer protein 3BP2( also known as SH3BP2) in cell signal transduction, the full-length cDNA of 3BP2 was used as a template in this study. The prokaryotic fusion protein expression vector pGex2T-3BP2 plasmid was constructed and transformed into E. coli DE3-plysSto express the fusion protein GST-3BP2. The fusion protein was purified by Gluthione crosslinked Sephorose-4B affinity chromatography. The antiserum of the fusion protein was prepared from rabbits immunized with GST-3BP2.GST-3BP2 and purified by negative and positive selection affinity chromatography. The polyclonal antibody against 3BP2 rabbit was prepared, and immunoprecipitation and Western blot were used to study it. The interaction between 3BP2 and SHP1 was detected in mouse spleen. 3BP2 was used as tyrosine phosphokinase (PTK) Lyn. The substrates of Syk are involved in the signal pathway with tyrosine phosphatase PTPP-SHP-1, which is helpful to elucidate the signal pathway mediated by 3BP2, TCR-BCR and FC 蔚 RI. The study of the relationship between PTP and PTK lays a theoretical foundation for the study of drug targets for 3BP2 related diseases, allergic diseases and megalomaxillary diseases.
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R392

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1404626