本文關(guān)鍵詞：綠色熒光蛋白標(biāo)記的乙肝病毒全基因組真核表達(dá)載體的構(gòu)建與表達(dá)分析　出處：《第二軍醫(yī)大學(xué)》2006年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)為一種嗜肝DNA病毒,因?yàn)槠涓腥镜姆N屬特異性組織特異性,對(duì)HBV研究多利用細(xì)胞模型和小動(dòng)物模型。全基因組轉(zhuǎn)基因小鼠血清和組織(尤其是肝組織)中有HBV病毒蛋白的表達(dá)和病毒的復(fù)制,在普通實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行全基因組轉(zhuǎn)基因小鼠的培育和相關(guān)研究具有一定的危險(xiǎn)性,且常規(guī)方法檢測(cè)有代價(jià)較高、費(fèi)時(shí)費(fèi)力的限制。因此,建立一種全身組織可表達(dá)綠色熒光蛋白(GFP)的全基因組轉(zhuǎn)基因小鼠,可以簡(jiǎn)化轉(zhuǎn)基因小鼠的檢測(cè)和培育,具有一定的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。本研究采用基因重組技術(shù),成功構(gòu)建了含有雙拷貝HBV全基因組DNA和EGFP基因的真核表達(dá)載體pCX EGFP-HBV adr 2.0,載體DNA細(xì)胞轉(zhuǎn)染和尾靜脈液壓注射的體外和體內(nèi)研究證實(shí)GFP和HBV基因均能表達(dá),表明pCX EGFP-HBVadr 2.0可用于轉(zhuǎn)基因小鼠的制備,且GFP可以作為HBV存在與否的報(bào)告基因。進(jìn)一步用限制性內(nèi)切酶將該載體線性化,采用經(jīng)典顯微注射法進(jìn)行轉(zhuǎn)基因小鼠的制備。
[Abstract]:Hepatitis B virus ( HBV ) is a kind of hepatitis B virus , because of its specific tissue specificity , it can be used to study the expression of HBV proteins and the replication of HBV . In vitro and in vivo studies of the whole genome transgenic mouse serum and tissues ( especially liver tissues ) have some danger . In vitro and in vivo studies on the expression vector pCX EGFP - HBV adr 2.0 , vector DNA cell transfection and tail vein hydraulic injection show that pCX EGFP - HBV adr 2.0 can be used as a reporter gene for the presence or absence of HBV .

【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：Q78;R373

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