本文關(guān)鍵詞：維生素A對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞的調(diào)節(jié)及其在粘膜免疫中的作用　出處：《復(fù)旦大學(xué)》2006年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 目的和意義：一、通過(guò)體外培養(yǎng)研究全反式視黃酸對(duì)臍血樹(shù)突狀細(xì)胞的分化、成熟及功能的影響，并通過(guò)采用視黃酸受體α的特異性拮抗劑Ro 41-5253，探討其作用的途徑，，以期從抗原遞呈細(xì)胞這一免疫應(yīng)答的起始環(huán)節(jié)，進(jìn)一步闡明維生素A增強(qiáng)兒童抗感染免疫力的機(jī)制。二、通過(guò)建立維生素A缺乏的動(dòng)物模型，研究維生素A對(duì)粘膜樹(shù)突狀細(xì)胞的數(shù)量、分布、成熟分化、抗原識(shí)別和細(xì)胞因子產(chǎn)生等的影響，探討維生素A調(diào)節(jié)粘膜免疫的作用及其分子機(jī)制，為臨床正確使用維生素A營(yíng)養(yǎng)防治疾病提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：一、共收集臍血18份，分離單核細(xì)胞后，在體外進(jìn)行樹(shù)突狀細(xì)胞的誘導(dǎo)培養(yǎng)，分為：對(duì)照組、全反式視黃酸組(RA組)、RARα特異性拮抗劑組(RO組)、RA+RO組。采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)不成熟樹(shù)突狀細(xì)胞(CDla+HLA-DR+)和成熟樹(shù)突狀細(xì)胞(CD83+HLA-DR+)表面標(biāo)記及HLA-DR熒光強(qiáng)度，觀察RA或／和RO對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞分化、成熟的影響；通過(guò)混合淋巴反應(yīng)，觀察RA或／和RO對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞刺激T細(xì)胞增殖能力的作用；采用ELISA法和RT-熒光定量PCR法測(cè)定細(xì)胞因子，研究RA或／和RO在樹(shù)突狀細(xì)胞對(duì)Th細(xì)胞極向分化調(diào)節(jié)中的作用。二、建立維生素A缺乏的大鼠動(dòng)物模型，應(yīng)用免疫組化、RT—熒光定量PCR和ELISA的方法，觀察維生素A缺乏對(duì)粘膜樹(shù)突狀細(xì)胞數(shù)目(OX-62陽(yáng)性細(xì)胞數(shù))、成熟度(CD80、CCR7的陽(yáng)性面積)；抗原識(shí)別受體(TLR2和TLR4的陽(yáng)性面積)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(MyD88的基因轉(zhuǎn)錄水平)、以及對(duì)細(xì)胞因子蛋白和基因轉(zhuǎn)錄水平的影響；并觀察視黃酸受體的6種亞型在粘膜的表達(dá)情況。 結(jié)果：體外培養(yǎng)結(jié)果顯示，RA：1、延遲臍血單核細(xì)胞向樹(shù)突狀細(xì)胞的分化，并使其成熟明顯受抑；2、抑制樹(shù)突狀細(xì)胞對(duì)異體T細(xì)胞增殖的作用；3、下調(diào)Th1細(xì)胞因子(IL-12、IFN-γ)，上調(diào)Th2細(xì)胞因子(IL-4、IL-10)；4、當(dāng)RO與RA同時(shí)加入時(shí)則可完全逆轉(zhuǎn)RA的上述作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：維生素A缺乏，1、可增加氣管和回腸末端粘膜樹(shù)突狀細(xì)胞的數(shù)目；2、增加氣管粘膜TLR2表達(dá)，對(duì)TLR4的影響不明顯，上調(diào)MyD88的mRNA水平，促進(jìn)回腸集合淋巴小結(jié)中TLR2、TLR4的蛋白表達(dá)；3、增加回腸集合淋巴小結(jié)中CCR7的表達(dá)，但對(duì)氣管粘膜細(xì)胞CD80和CCR7無(wú)明顯影響；4、明顯增加粘膜中IL-12的表達(dá)，對(duì)IFN-γ的影響卻不明顯(氣管)或下降(腸道)，減少Th2細(xì)胞因子的產(chǎn)生，尤以氣管明顯(IL-4、IL-6均明顯下降)，下調(diào)氣管和腸道調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子JL-10的蛋白表達(dá)；5、視黃酸受體的6個(gè)亞型在氣管和腸道粘膜均有表達(dá)，維生素A缺乏主要下調(diào)RARα的蛋白和mRNA水平，而對(duì)其他5種受體亞型影響不明顯。 結(jié)論：1、視黃酸可抑制體外培養(yǎng)的臍血單核細(xì)胞向樹(shù)突狀細(xì)胞的分化和成熟，降低其刺激異體T淋巴細(xì)胞反應(yīng)的能力，使免疫應(yīng)答反應(yīng)向Th2方向偏移，有利于抗體產(chǎn)生，從而增強(qiáng)體液免疫功能。2、RARα參與了視黃酸對(duì)臍血樹(shù)突狀細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用。3、維生素A缺乏大鼠粘膜樹(shù)突狀細(xì)胞增多，成熟度增加，對(duì)病原體抗原的識(shí)別和遞呈增加；4、維生素A缺乏大鼠氣管粘膜Th2細(xì)胞因子的產(chǎn)生減少；腸道粘膜Th1細(xì)胞因子IFN-γ和調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子IL-10的表達(dá)都下降，可能是其粘膜免疫功能降低的機(jī)制。5．視黃酸受體的6個(gè)亞型在氣管和腸道粘膜均有不同水平的表達(dá)，維生素A缺乏主要下調(diào)RARα的表達(dá)。
[Abstract]:Objective : To study the effect of all - trans retinoic acid on the differentiation , maturation and function of dendritic cells in cord blood by in vitro culture , and to study the mechanism of vitamin A on the immune response of children by using the specific antagonist Ro 41 - 5253 of retinoic acid receptor 偽 . Methods : To observe the effects of RA and / or RO on the differentiation and maturation of dendritic cells , and to observe the effect of RA or / and RO on the differentiation and maturation of dendritic cells . The effects of RA or / and RO on the proliferation of dendritic cells were observed . The effects of RA or / and RO on the proliferation of dendritic cells were observed by ELISA and RT - fluorescence quantitative PCR . Results : The results showed that RA : 1 , delayed cord blood mononuclear cells differentiation into dendritic cells , and inhibited the proliferation of T cells . The results showed that the expression of IL - 12 , IL - 12 , IL - 6 , IL - 4 , IL - 10 were not significantly affected by the expression of IL - 4 and IL - 6 . Conclusion : 1 . Retinoic acid can inhibit the differentiation and maturation of dendritic cells from umbilical cord blood mononuclear cells cultured in vitro , and decrease its ability to stimulate allogeneic T lymphocyte reaction . 6 subtypes of retinoic acid receptor have different levels of expression in trachea and intestinal mucosa , and vitamin A deficiency mainly downregulates the expression of RAR偽.

【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R723;R392

【引證文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1396688