SDF-1α促進(jìn)原代培養(yǎng)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖的作用
本文關(guān)鍵詞:SDF-1α促進(jìn)原代培養(yǎng)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖的作用 出處:《中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)》2014年09期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:目的研究間質(zhì)細(xì)胞來源因子-1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)對(duì)原代培養(yǎng)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖的作用及其可能機(jī)制。方法以不同濃度的重組人SDF-1α作用于星形膠質(zhì)細(xì)胞后,用細(xì)胞計(jì)數(shù)法和溴化去氧尿苷參入法檢測(cè)細(xì)胞增殖;鈣離子熒光探針檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度;Western blot法檢測(cè)細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)1/2磷酸化水平;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期;定量RT-PCR法檢測(cè)Cyclin A2和Cyclin B1的mRNA表達(dá)。結(jié)果不同濃度的SDF-1α(10-40 nmol·L-1)作用48 h可明顯地促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞的增殖。SDF-1α(20 nmol·L-1)處理可增加細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度,提高ERK1/2磷酸化水平;而且可促使細(xì)胞由G0期進(jìn)入DNA合成期(S期)和有絲分裂期(M期),上調(diào)Cyclin A2和Cyclin B1的mRNA表達(dá)。結(jié)論 SDF-1α可明顯誘導(dǎo)離體培養(yǎng)大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖,其機(jī)制可能是促進(jìn)鈣離子內(nèi)流,磷酸化ERK1/2,上調(diào)Cyclin表達(dá)而促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)入DNA合成期和分裂期。
[Abstract]:Objective to study the mesenchymal cells derived factor -1 alpha (stromal cell-derived factor-1 SDF-1 alpha, alpha) proliferation of cultured rat astrocytes of primary and its possible mechanism. Methods the effects of different concentrations of recombinant human SDF-1 alpha in astrocytes after using cell counting and bromodeoxyuridine incorporation assay. Proliferation; calcium fluorescence probe to detect the intracellular calcium concentration of Western cells was determined by blot method; external regulated protein kinase (extracellular regulated protein kinase, ERK) 1/2 phosphorylation; flow cytometry; quantitative expression of RT-PCR A2 and Cyclin Cyclin detected by B1 mRNA. The different concentrations of SDF-1 (alpha 10-40 nmol - L-1) for 48 h can obviously promote the proliferation of astrocytes.SDF-1 alpha (20 nmol L-1) can increase the intracellular calcium concentration increased ERK1/2 phosphorylation level and can promote; The cells from G0 phase to DNA synthesis phase (S phase) and mitotic phase (M phase), Cyclin A2 and Cyclin B1 expression of mRNA. Conclusion SDF-1 alpha can induce cultured rat astrocytes proliferation and its possible mechanism is to promote calcium influx, phosphorylation of ERK1/2. Cyclin expression to induce cells into DNA synthesis and mitosis.
【作者單位】: 江蘇大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院藥理學(xué)系;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No 81300059) 江蘇大學(xué)高級(jí)人才基金項(xiàng)目(No 08JDG005,11JDG092)
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: R392.11于星形膠質(zhì)細(xì)胞后,用細(xì)胞計(jì)數(shù)法和溴化去氧尿苷參入法檢測(cè)細(xì)胞增殖;鈣離子熒光探針檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度;West-ern blot法檢測(cè)細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(extracellular regulatedprotein kinase,ERK)1/2磷酸化水平;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期;定量RT-PCR法檢測(cè)Cyclin A2和Cyclin
【共引文獻(xiàn)】
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8 馬e
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