ITF通過JAK-STAT3途徑上調(diào)自身啟動子的活性
本文關(guān)鍵詞:ITF通過JAK-STAT3途徑上調(diào)自身啟動子的活性 出處:《中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2014年11期 論文類型:期刊論文
更多相關(guān)文章: 腸三葉因子 JAK-STAT 啟動子
【摘要】:目的:研究腸三葉因子(intestinal trefoil factor,ITF)對自身啟動子活性的影響及Janus激酶/信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子(Janus kinase/signal transducers and activators of transcription,JAK/STAT)信號通路對其的調(diào)控作用。方法:以人全血基因組DNA為模板,PCR獲取ITF基因5'側(cè)翼序列,插入p GL3-Basic載體,構(gòu)建ITF啟動子重組載體;以不同濃度的ITF刺激,檢測雙熒光素酶的活性;運用JAK-STAT3通路特異性抑制劑AG490阻斷JAKSTAT3信號通路,觀察AG490對ITF啟動子活性的影響。結(jié)果:酶切和直接測序法證實包含ITF啟動子的重組質(zhì)粒構(gòu)建成功;瞬時轉(zhuǎn)染實驗顯示,ITF能顯著提高ITF啟動子的活性(P0.05);加入AG490后ITF啟動子活性顯著下降(P0.05)。結(jié)論:ITF通過JAK-STAT3途徑上調(diào)自身啟動子的活性。
[Abstract]:Objective: To study the intestinal trefoil factor (intestinal trefoil, factor, ITF) activation factors on its promoter activity and Janus kinase / signal transduction and transcription (Janus kinase/signal transducers and activators of transcription, JAK/STAT) signal pathway on its regulation. Methods: the whole blood genomic DNA as template, PCR ITF gene 5'the flanking sequence, inserted into P GL3-Basic vector to construct recombinant vector ITF promoter; with different concentrations of ITF stimulated luciferase activity; using JAK-STAT3 specific inhibitor AG490 blocked JAKSTAT3 signaling pathway, the effect of AG490 on ITF promoter activity. Results: the enzyme digestion and sequencing confirmed that the recombinant plasmid containing ITF promoter the successful construction; transient transfection experiments revealed that ITF could significantly increase the activity of the ITF promoter (P0.05); adding AG4 90 ITF promoter activity was significantly decreased ( P0.05) conclusion: ITF up-regulated the activity of the self promoter through the JAK-STAT3 pathway.
【作者單位】: 徐州醫(yī)學(xué)院附屬淮海醫(yī)院燒傷科;中國人民解放軍第九七醫(yī)院燒傷科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81100252) 南京軍區(qū)醫(yī)學(xué)科研課題重點項目(12Z10)~~
【分類號】:R3416
【正文快照】: Methods:The 5'flanking sequence of the ITF gene was cloned from human whole bloodgenomic DNA by PCR.ITF promoter fragment was cloned and inserted into the p GL3-Basicvector to construct recombinant vector.ITF promoter vector was stimulated with ITF at va
【參考文獻】
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【共引文獻】
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【二級參考文獻】
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本文編號:1366147
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