小鼠載脂蛋白M基因的克隆及表達
發(fā)布時間:2017-12-30 12:19
本文關(guān)鍵詞:小鼠載脂蛋白M基因的克隆及表達 出處:《武漢大學(xué)》2005年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:載脂蛋白M是新近發(fā)現(xiàn)的載脂蛋白。在各種脂蛋白的亞類中,載脂蛋白M主要存在于人血漿高密度脂蛋白中,但在富含甘油三脂的脂蛋白和低密度脂蛋白中也發(fā)現(xiàn)了載脂蛋白M。在所有的載脂蛋白中,與其他載脂蛋白相比,載脂蛋白M只占很少一部分。載脂蛋白M存在于所有的哺乳動物的基因組中,但它僅在肝臟和腎臟表達,在其他的組織和器官不表達。載脂蛋白M位于6號染色體主要組織相容性抗原復(fù)合體Ⅲ區(qū)。 載脂蛋白M的功能尚不清楚,除了與高密度脂蛋白的合成有關(guān)外,它可能在膽固醇的代謝和轉(zhuǎn)運中起到特殊的作用。載脂蛋白M有膜蛋白的功能,它可能與脂蛋白顆粒和來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的磷脂蛋白相結(jié)合,然后分泌到血漿中,并參與運輸疏水性的小分子復(fù)合物。 本研究通過克隆并高效表達小鼠載脂蛋白M基因,以探討其生物學(xué)功能。通過提取小鼠肝臟總RNA,采用RT-PCR技術(shù),擴增正常成年小鼠肝細胞載脂蛋白M全長cDNA,并重組于原核表達載體pGEX-KG中,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21。經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后,收集菌體蛋白,進行SDS-PAGE鑒定;獲得小鼠載脂蛋白M全長cDNA,測序結(jié)果與已發(fā)表的基因序列一致,重組蛋白以包涵體的形式進行表達,經(jīng)SDS-PAGE分析,在相對分子量54kDa處有一特異性的蛋白條帶。本研究成功克隆了正常成年小鼠的載脂蛋白M基因,并在大腸桿菌BL21中得到高效表達,為進一步制備載脂蛋白M抗體創(chuàng)造了有利條件。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:武漢大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2005
【分類號】:R346
【共引文獻】
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2 孟群;高密度脂蛋白的研究進展[J];國外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊);2001年05期
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,本文編號:1354909
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