本文關鍵詞：小鼠載脂蛋白M基因的克隆及表達　出處：《武漢大學》2005年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：載脂蛋白M是新近發(fā)現(xiàn)的載脂蛋白。在各種脂蛋白的亞類中,載脂蛋白M主要存在于人血漿高密度脂蛋白中,但在富含甘油三脂的脂蛋白和低密度脂蛋白中也發(fā)現(xiàn)了載脂蛋白M。在所有的載脂蛋白中,與其他載脂蛋白相比,載脂蛋白M只占很少一部分。載脂蛋白M存在于所有的哺乳動物的基因組中,但它僅在肝臟和腎臟表達,在其他的組織和器官不表達。載脂蛋白M位于6號染色體主要組織相容性抗原復合體Ⅲ區(qū)。 載脂蛋白M的功能尚不清楚,除了與高密度脂蛋白的合成有關外,它可能在膽固醇的代謝和轉運中起到特殊的作用。載脂蛋白M有膜蛋白的功能,它可能與脂蛋白顆粒和來自內質網膜的磷脂蛋白相結合,然后分泌到血漿中,并參與運輸疏水性的小分子復合物。 本研究通過克隆并高效表達小鼠載脂蛋白M基因,以探討其生物學功能。通過提取小鼠肝臟總RNA,采用RT-PCR技術,擴增正常成年小鼠肝細胞載脂蛋白M全長cDNA,并重組于原核表達載體pGEX-KG中,轉化大腸桿菌BL21。經IPTG誘導后,收集菌體蛋白,進行SDS-PAGE鑒定;獲得小鼠載脂蛋白M全長cDNA,測序結果與已發(fā)表的基因序列一致,重組蛋白以包涵體的形式進行表達,經SDS-PAGE分析,在相對分子量54kDa處有一特異性的蛋白條帶。本研究成功克隆了正常成年小鼠的載脂蛋白M基因,并在大腸桿菌BL21中得到高效表達,為進一步制備載脂蛋白M抗體創(chuàng)造了有利條件。
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【學位授予單位】：武漢大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R346

【共引文獻】

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1 賈建平;韓秀杰;;載脂蛋白M基因1號內含子T53→C和4號內含子C59→A突變的家系分析[J];中國腦血管病雜志;2007年04期

2 孟群;高密度脂蛋白的研究進展[J];國外醫(yī)學(生理、病理科學與臨床分冊);2001年05期

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1 于敏;血管內皮細胞乙酰膽堿靶標的藥理學特征及其相關蛋白的研究[D];南京醫(yī)科大學;2004年

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本文編號：1354909