本文關(guān)鍵詞：基于半乳糖修飾的聚乙烯二氨基三嗪共聚物轉(zhuǎn)基因載體　出處：《天津大學(xué)》2007年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 本論文主要研究了半乳糖(Lac)修飾聚2-乙烯基-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪(PVDTLac)/聚2-乙烯基-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪(PVDT)共聚物的制備,及其與DNA形成氫鍵復(fù)合物的性質(zhì)以及此復(fù)合物介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染,主要內(nèi)容包括以下三個方面: 1)對2-乙烯基-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪單體(VDT)進行半乳糖修飾,制備出PVDTLac-PVDT共聚物,所得產(chǎn)物具有較好的水溶性。經(jīng)核磁共振氫譜(1H NMR)分析,確定半乳糖基成功地接到了三嗪環(huán)上。 2)研究共聚物與DNA的相互作用情況,制備了不同比例的PVDTLac載體/DNA復(fù)合物,以復(fù)合物電泳和透射電鏡表征了PVDTLac對DNA的作用,對DNA形態(tài)、尺寸等的影響。瓊脂糖凝膠電泳實驗表明PVDTLac載體可有效復(fù)合DNA,由于PVDTLac-PVDT(1:2)結(jié)構(gòu)中有更多的氨基,故能以較小的質(zhì)量比與DNA形成了復(fù)合物。通過透射電鏡觀察了復(fù)合物以及裸DNA的形態(tài)。復(fù)合物形態(tài)依賴于載體的比例,呈現(xiàn)球狀、環(huán)狀或大尺寸聚集物。在載體質(zhì)量相對較小時,載體不能對DNA形成緊密的包裹,DNA保持松散的結(jié)構(gòu)。隨著質(zhì)量比的增大,DNA逐漸被縮合,接近最佳復(fù)合比時,復(fù)合物的形態(tài)開始傾向于呈環(huán)狀;再繼續(xù)增大質(zhì)量比,復(fù)合物呈分散的環(huán)狀或球形。由透射電鏡觀測復(fù)合物的粒徑分布得知,當(dāng)載體達(dá)到一定質(zhì)量后,隨著載體質(zhì)量的繼續(xù)增加,復(fù)合物粒徑有減小的趨勢。 3)以非洲綠猴腎細(xì)胞(COS-1)為宿主細(xì)胞,嘗試了兩種比例共聚物載體介導(dǎo)含Luciferase報告基因質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染,通過測定luciferase的活性確定轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果表明,PVDTLac載體可將pGL3質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)入COS-1細(xì)胞內(nèi),總體上的轉(zhuǎn)染率比裸DNA高52～178倍,接近PEI轉(zhuǎn)染效率的50%～74%。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：天津大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R346

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本文編號：1351191