腸道外致病性大腸埃希菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的耐藥性及基因分型
本文關(guān)鍵詞:腸道外致病性大腸埃希菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的耐藥性及基因分型 出處:《福建醫(yī)科大學(xué)》2006年碩士論文 論文類(lèi)型:學(xué)位論文
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【摘要】: 目的:了解福建地區(qū)腸道外致病性大腸埃希菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥現(xiàn)狀;調(diào)查本地區(qū)該菌的產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶情況,建立簡(jiǎn)便實(shí)用的快速檢測(cè)方法;明確本地區(qū)ESBLs相關(guān)編碼基因的基因型別及特征,為建立產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶ExPEC的分子流行病學(xué)篩查和臨床診斷方法奠定基礎(chǔ)。 方法:對(duì)2003年~2005年間從福建地區(qū)7家醫(yī)院收集的腸道外致病性大腸埃希菌用瓊脂稀釋法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。分別用終濃度為1μg/ml頭孢他定和頭孢噻肟對(duì)這些菌株進(jìn)行ESBLs初篩,任一底物檢測(cè)出現(xiàn)結(jié)果陽(yáng)性,就采用臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所(CLSI)推薦的表型確證試驗(yàn)確證之。同時(shí)設(shè)計(jì)肉湯微量稀釋法,先對(duì)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸埃希菌ATCC 25922 (非產(chǎn)ESBLs菌株)和肺炎克雷伯菌ATCC 700603(產(chǎn)ESBLs菌株)重復(fù)試驗(yàn)40次,驗(yàn)證其可靠性,再用該法檢測(cè)59株產(chǎn)ESBLs菌株和33株非ESBLs菌株,以CLSI推薦的表型確證試驗(yàn)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn),確定本研究建立的方法的真實(shí)性。用脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)檢測(cè)產(chǎn)ESBLs菌株的質(zhì)粒譜帶。設(shè)計(jì)通用引物,用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)檢測(cè)產(chǎn)酶株ESBLs相關(guān)編碼基因bla,對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物分別用限制性?xún)?nèi)切酶Pst I和Pvu II酶切,運(yùn)用限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)分析各菌株ESBLs的基因型別。 結(jié)果:本研究分離得到176株ExPEC,其中158株表現(xiàn)為多重耐藥,占全部菌株數(shù)的89.77%。85株對(duì)第三代頭孢類(lèi)抗生素耐藥,占全部菌株數(shù)的48.30%。這些菌株對(duì)喹諾酮類(lèi)和氨基糖苷類(lèi)的耐藥率也分別達(dá)76%和35%以上。腸道外致病性大腸埃希菌對(duì)第三代頭孢類(lèi)抗生素和對(duì)氨基糖苷類(lèi)及喹諾酮類(lèi)抗菌藥物的耐藥存在一定的相關(guān)性。對(duì)ESBLs進(jìn)行初篩,得到74株ESBLs可疑陽(yáng)性菌,對(duì)其進(jìn)行表型確證試驗(yàn),可以確證得到59株產(chǎn)ESBLs菌,故本地ESBLs菌的檢出率為33.52%。肉湯微量稀釋法重復(fù)檢測(cè)結(jié)果顯示,大腸埃希菌ATCC 25922為非ESBLs菌的符合率為100%,肺炎克雷伯菌ATCC 700603為產(chǎn)ESBLs菌的符合率也為100%,可見(jiàn)該方法相當(dāng)可靠;真實(shí)性檢驗(yàn)結(jié)果顯示,該方法的敏感度、特異度分別高達(dá)96.61%,100%,
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類(lèi)號(hào)】:R378.2
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1350463
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