百日咳桿菌免疫學和分子生物學檢測方法的建立及疫苗株基因序列分析
本文關鍵詞:百日咳桿菌免疫學和分子生物學檢測方法的建立及疫苗株基因序列分析 出處:《中國藥品生物制品檢定所》2005年碩士論文 論文類型:學位論文
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【摘要】:盡管現(xiàn)在世界上絕大多數(shù)國家實施百日咳疫苗的免疫接種,使百日咳感染率和病死率大大下降,但據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)統(tǒng)計報道,現(xiàn)在全世界每年百日咳患者達數(shù)四千萬之多,且絕大多數(shù)病例來自不發(fā)達國家和發(fā)展中國家,因此百日咳越來越引起人們重視。百日咳疫苗是預防和控制百日咳的最有效方法。百日咳疫苗包括全細胞疫苗和無細胞百日咳疫苗,由于全細胞疫苗所引起的接種副反應較為嚴重,將逐漸被接種副反應小而免疫效果好,以百日咳桿菌的兩種主要抗原即百日咳毒素(pertussis toxin,PT)和絲狀血凝素(filamentous hemagglutinin,F(xiàn)HA)為主要成分的無細胞百日咳疫苗所代替。然而在無細胞疫苗各組分的制備和質(zhì)量控制等方面,目前還存在一些問題有待于研究和解決,其中之一即尚無一種很好的有效抗原定量檢測方法。 本課題采用雜交瘤單克隆技術,運用已建立的間接ELISA法篩選,獲得七株分泌抗百日咳毒素(PT)單克隆抗體(monoclonal antibody,McAb)的雜交瘤細胞株和六株抗百日咳絲狀血凝素(FHA)McAbs的雜交瘤細胞株,兩種雜交瘤細胞株分泌單克隆抗體的Ig類別均為IgG_1(κ),效價達1:10~5—1:10~7,各株抗PT McAbs能特異性識別PT,與FHA及C型腸毒素無交叉反應,其中McAb1D4和3E4有中和抑制PT簇集CHO細胞的活性,Western blot結果表明2D7、5F9、5F8、1D4和2C25株McAbs均能識別PT抗原的S1亞單位蛋白,,McAb 1B8可識別S2亞單位蛋白,McAb 3E4可識別S3亞單位蛋白。6株抗FHA-McAbs均能特異性識別FHA,與流感病毒血凝素及PT無交叉反應,其中McAb 2C2、2G6、1EA和1C7能特異性抑制FHA血凝活性,血凝抑制效價分別為1:64,1:128,1:256
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【學位授予單位】:中國藥品生物制品檢定所
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2005
【分類號】:R392
【參考文獻】
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