百日咳桿菌免疫學(xué)和分子生物學(xué)檢測(cè)方法的建立及疫苗株基因序列分析
本文關(guān)鍵詞:百日咳桿菌免疫學(xué)和分子生物學(xué)檢測(cè)方法的建立及疫苗株基因序列分析 出處:《中國(guó)藥品生物制品檢定所》2005年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:盡管現(xiàn)在世界上絕大多數(shù)國(guó)家實(shí)施百日咳疫苗的免疫接種,使百日咳感染率和病死率大大下降,但據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)統(tǒng)計(jì)報(bào)道,現(xiàn)在全世界每年百日咳患者達(dá)數(shù)四千萬(wàn)之多,且絕大多數(shù)病例來自不發(fā)達(dá)國(guó)家和發(fā)展中國(guó)家,因此百日咳越來越引起人們重視。百日咳疫苗是預(yù)防和控制百日咳的最有效方法。百日咳疫苗包括全細(xì)胞疫苗和無細(xì)胞百日咳疫苗,由于全細(xì)胞疫苗所引起的接種副反應(yīng)較為嚴(yán)重,將逐漸被接種副反應(yīng)小而免疫效果好,以百日咳桿菌的兩種主要抗原即百日咳毒素(pertussis toxin,PT)和絲狀血凝素(filamentous hemagglutinin,F(xiàn)HA)為主要成分的無細(xì)胞百日咳疫苗所代替。然而在無細(xì)胞疫苗各組分的制備和質(zhì)量控制等方面,目前還存在一些問題有待于研究和解決,其中之一即尚無一種很好的有效抗原定量檢測(cè)方法。 本課題采用雜交瘤單克隆技術(shù),運(yùn)用已建立的間接ELISA法篩選,獲得七株分泌抗百日咳毒素(PT)單克隆抗體(monoclonal antibody,McAb)的雜交瘤細(xì)胞株和六株抗百日咳絲狀血凝素(FHA)McAbs的雜交瘤細(xì)胞株,兩種雜交瘤細(xì)胞株分泌單克隆抗體的Ig類別均為IgG_1(κ),效價(jià)達(dá)1:10~5—1:10~7,各株抗PT McAbs能特異性識(shí)別PT,與FHA及C型腸毒素?zé)o交叉反應(yīng),其中McAb1D4和3E4有中和抑制PT簇集CHO細(xì)胞的活性,Western blot結(jié)果表明2D7、5F9、5F8、1D4和2C25株McAbs均能識(shí)別PT抗原的S1亞單位蛋白,,McAb 1B8可識(shí)別S2亞單位蛋白,McAb 3E4可識(shí)別S3亞單位蛋白。6株抗FHA-McAbs均能特異性識(shí)別FHA,與流感病毒血凝素及PT無交叉反應(yīng),其中McAb 2C2、2G6、1EA和1C7能特異性抑制FHA血凝活性,血凝抑制效價(jià)分別為1:64,1:128,1:256
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)藥品生物制品檢定所
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2005
【分類號(hào)】:R392
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1348249
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