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一種新的來源于人的穿膜肽的功能和對生物節(jié)律影響的研究

發(fā)布時間:2017-12-28 21:31

  本文關鍵詞:一種新的來源于人的穿膜肽的功能和對生物節(jié)律影響的研究 出處:《四川大學》2005年博士論文 論文類型:學位論文


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【摘要】:目的 研究一種新的人體蛋白結構域(Circadian locomoter output cycles kaput protein's DNA-binding peptide,hCLOCK's DNA_BIND,hClock-(35-47))對多種細胞細胞膜的穿膜作用及其通過大鼠血腦屏障的作用。在此基礎上,進一步探討了hClock-(35-47)通過細胞膜的一些相關機理,及其內化入細胞后對細胞近日節(jié)律基因轉錄的影響。 方法 化學合成hClock-(35-47),N端標記FITC綠色熒光素,與培養(yǎng)的血管內皮細胞(ECV-304)和原代培養(yǎng)的神經膠質細胞孵化一定時間后,熒光顯微鏡下觀察其對多種細胞細胞膜的穿膜作用,并采用Image-Pro Plus(Version 4.5 for Windows~(TM))來分析細胞熒光強度。采用MTT比色實驗測定hClock-(35-47)的細胞毒性。在此基礎上,經大鼠頸總動脈注射hClock-(35-47)后,做大鼠大腦冰凍切片,熒光顯微鏡下觀察其通過大鼠血腦屏障進入腦細胞的情況。在培養(yǎng)基中加入肝素,通過在熒光顯微鏡下觀察標記FITC的hClock-(35-47)內化入細胞的情況,來了解肝素對hClock-(35-47)內化入細胞的抑制
[Abstract]:Objective to study the effect of Circadian Locomoter output cycles kaput protein's DNA-binding peptide (hCLOCK's DNA_BIND, hClock- (35-47)) on the membrane permeability of various cell membranes and its role in blood-brain barrier in rats. On this basis, we further discussed the mechanism of hClock- (35-47) through cell membrane and its influence on the transcription of cell circadian genes after internalization.
【學位授予單位】:四川大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2005
【分類號】:R341

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