沙眼衣原體E型DNA疫苗的構(gòu)建及其免疫效果的研究
發(fā)布時(shí)間:2017-12-28 08:07
本文關(guān)鍵詞:沙眼衣原體E型DNA疫苗的構(gòu)建及其免疫效果的研究 出處:《天津醫(yī)科大學(xué)》2006年博士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis, C. t)所致的泌尿生殖道感染近幾年迅速增多,無癥狀和慢性C.t感染所致的前列腺炎、不孕不育、異位妊娠、慢性盆腔炎等嚴(yán)重危害著患者的身心健康。目前,C.t泌尿生殖道感染的遷延難治、易于復(fù)發(fā)和耗資巨大已成為共識(shí),對(duì)C.t感染的研究已成為當(dāng)今國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)之一,C.t的預(yù)防和控制方法亟待改進(jìn)。沙眼衣原體疫苗的研究便是預(yù)防措施中的重點(diǎn)之一。在眾多研究的C.t疫苗中,DNA疫苗憑借其不可比擬的優(yōu)勢(shì)成為發(fā)展的方向。遺憾的是到目前為止仍然沒有成功的疫苗問世。 目的:構(gòu)建感染泌尿生殖道的C.t優(yōu)勢(shì)型—E型的DNA疫苗,并選擇小鼠白細(xì)胞介素2(mouse interleukin-2,mIL-2)真核表達(dá)質(zhì)粒作為免疫佐劑,研究DNA疫苗單獨(dú)免疫及聯(lián)合佐劑共同免疫在小鼠體內(nèi)誘發(fā)的免疫應(yīng)答和免疫保護(hù)作用。 方法:C.t E型經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)后提取染色體DNA作為模板,設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增出完整的ompl基因,并將該基因定向克隆到真核表達(dá)載體pcDNA3.1(+)中構(gòu)建重組質(zhì)粒(即DNA疫苗),鑒定后脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒至HeLa細(xì)胞中表達(dá)。以BALB/c小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,采用肌肉接種免疫的方式,將小鼠分為接種空質(zhì)粒的陰性對(duì)照組、DNA疫苗單獨(dú)免疫組、DNA疫苗聯(lián)合mIL-2基因佐劑免疫組和接種滅活C.t E型原體的陽性對(duì)照組。通過血清和生殖道局部抗體檢測(cè)、細(xì)胞因子檢測(cè)、抗體中和試驗(yàn)、遲發(fā)型超敏反應(yīng)、脾淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物經(jīng)生殖道途徑進(jìn)行C.t E型攻擊后的C.t清除情況以及局部組織病理形態(tài)學(xué)變化的觀察來研究所構(gòu)建的C.t E型DNA疫苗的免疫效應(yīng)和mIL-2基因佐劑的免疫增效作用。
[Abstract]:Urogenital infections caused by Chlamydia trachomatis (C. T) have increased rapidly in recent years. Prostatitis, infertility, ectopic pregnancy and chronic pelvic inflammatory disease caused by asymptomatic and chronic C.t infection are seriously endangering the physical and mental health of patients. At present, it is a common understanding that C.t infection and urogenital tract infection are delayed, difficult to recur, and costly. The research on C.t infection has become one of the hot topics at home and abroad. The prevention and control of C.t need to be improved. The study of Chlamydia trachomatis vaccine is one of the key points in the preventive measures. In many studies of C.t vaccine, DNA vaccine has become the direction of development with its incomparable advantages. Unfortunately, the vaccine that still has not been successful so far has come out.
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2006
【分類號(hào)】:R392
【引證文獻(xiàn)】
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1 呂慧;E型沙眼衣原體MOMP基因重組腺病毒及其轉(zhuǎn)染樹突狀細(xì)胞的免疫效果研究[D];山東大學(xué);2007年
,本文編號(hào):1345232
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