發(fā)布時(shí)間：2017-12-28 05:21

  本文關(guān)鍵詞：體外誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元樣細(xì)胞　出處：《山西醫(yī)科大學(xué)》2005年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 骨髓基質(zhì)細(xì)胞 神經(jīng)元樣細(xì)胞 分化 rt-PCR

【摘要】：目的:體外培養(yǎng)骨髓基質(zhì)細(xì)胞,探索大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞體外誘導(dǎo)及向神經(jīng)細(xì)胞方向分化的條件,為細(xì)胞移植和進(jìn)一步研究奠定基礎(chǔ)。 方法:分離大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞(BMSC)并在體外進(jìn)行培養(yǎng)、擴(kuò)增、傳代,相差顯微鏡觀測(cè)細(xì)胞形態(tài),用 MTT 法檢查不同傳代細(xì)胞活力,并用免疫細(xì)胞化學(xué)的方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定,選擇活力最強(qiáng)的一代細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)。應(yīng)用腦神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)、2-巰基乙醇(2-ME)對(duì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化,30 分鐘后行大體觀察,6 小時(shí)后免疫組織化鑒定神經(jīng)絲蛋白(NF-200)、神經(jīng)烯醇化酶(NSE)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP),并用 rt-PCR 鑒定 NF-200、NSE、和 GFAP 的 mRNA 表達(dá)情況。 結(jié)果:免疫組化分析表明,BMSC 為 CD44 和 CD54 陽(yáng)性,CD34 和 CD45陰性。用 BDNF、2-ME 單獨(dú)或者共同誘導(dǎo) 3h BMSC 能分化為神經(jīng)樣細(xì)胞,伸出較長(zhǎng)軸突和樹(shù)突樣突起且有分支,BMSC 形態(tài)類似神經(jīng)細(xì)胞。6 小時(shí)后神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)記蛋白 NSE 和 NF-200 免疫組化染色陽(yáng)性而 GFAP 呈陰性,其中BDNF+2-ME 誘導(dǎo)組神經(jīng)元樣細(xì)胞分化率為 76.5%;BDNF 誘導(dǎo)組為 40.5%;2-ME 誘導(dǎo)組為 46.0%。用 rt-PCR 分析 mRNA 得到相同的結(jié)果,與對(duì)照組和其它兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組比較 BDNF+2-ME 組誘導(dǎo)率最高,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 結(jié)論:通過(guò)體外培養(yǎng)可以獲得大量高度均一的 BMSC。BDNF 和β-ME能協(xié)同刺激大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化為神經(jīng)細(xì)胞。
[Abstract]:Objective: to culture bone marrow stromal cells in vitro, explore the conditions for inducing bone marrow stromal cells to differentiate into neurons in vitro, and lay a foundation for cell transplantation and further research.
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R329.2

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