發(fā)布時(shí)間：2017-12-28 04:16

  本文關(guān)鍵詞：Orexin對(duì)呼吸活動(dòng)調(diào)節(jié)的中樞機(jī)制的探索　出處：《復(fù)旦大學(xué)》2007年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】： 目的延髓是基本呼吸中樞的所在部位,在呼吸節(jié)律的產(chǎn)生過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。增食因子(orexins)被認(rèn)為是下丘腦產(chǎn)生的具有重要作用的神經(jīng)肽,在機(jī)體內(nèi)對(duì)攝食、能量代謝、內(nèi)分泌、心血管、呼吸、睡眠-覺(jué)醒和覺(jué)醒維持等多種生理活動(dòng)發(fā)揮調(diào)控作用。本研究旨在觀察增食因子A(orexinA,OXA)和增食因子1型受體(orexin type 1 receptor,OX_1R)在大鼠延髓的分布,探索OXA對(duì)呼吸活動(dòng)的影響及其中樞作用機(jī)制,并初步分析OXA與影響呼吸活動(dòng)的ATP之間的關(guān)系。 方法(1)實(shí)驗(yàn)用新生(1～5d)和成年(6～8w)SD大鼠,雌雄不計(jì),取延髓部位,用免疫組織化學(xué)方法和圖像分析技術(shù),觀察和比較OXA、OX_1R在大鼠延髓的分布。(2)取成年SD大鼠(250～350g),烏拉坦(700mg/kg)和α-氯醛糖(35mg/kg)混合腹腔麻醉,行氣管插管、頸外靜脈插管、股動(dòng)脈插管,游離一側(cè)膈神經(jīng)并穿線(xiàn)標(biāo)記,縫合切口。將動(dòng)物俯臥位固定在立體定位儀上。暴露側(cè)腦室對(duì)應(yīng)的顱骨表面及延髓背側(cè)表面。將膈神經(jīng)置于雙極鉑金電極上記錄膈神經(jīng)放電活動(dòng)。分別在側(cè)腦室微量注射OXA或ATP,觀察膈神經(jīng)放電活動(dòng)、血壓和心率的變化;在前包欽格復(fù)合體分別微量注射OXA、SB408124(OX_1R阻斷劑)、SB408124+OXA,觀察膈神經(jīng)放電活動(dòng)、血壓和心率的變化;在前包欽格復(fù)合體分別微量注射ATP、NF279(ATP的受體阻斷劑)+ATP、NF279+OXA,觀察膈神經(jīng)放電活動(dòng)、血壓、心率的變化。 結(jié)果(1) OXA免疫反應(yīng)陽(yáng)性纖維和OX_1R免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞在新生和成年SD大鼠延髓有廣泛分布。OXA免疫反應(yīng)陽(yáng)性纖維在孤束核(nucleus tractussolitarius,NTS)、舌下神經(jīng)核(hypoglossal nucleus,Ⅻ)和延髓腹外側(cè)區(qū)(ventrolateral medulla,VLM)分布比較明顯。OX_1R免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞在Ⅻ和VLM兩個(gè)區(qū)域染色更明顯。在這兩個(gè)區(qū)域,新生鼠組的OX_1R免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞的相對(duì)光密度值均低于成年鼠組(P＜0.001)。(2)大鼠側(cè)腦室微量注射OXA(10μg/ml,5μl),膈神經(jīng)放電活動(dòng)增強(qiáng)、動(dòng)脈血壓升高、心率加快。隨著OXA濃度的增加,膈神經(jīng)放電活動(dòng)逐漸增強(qiáng)。10、100、1000μg/ml三個(gè)濃度組的膈神經(jīng)放電強(qiáng)度分別與生理鹽水對(duì)照組相比都有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001)。三個(gè)濃度組的呼吸頻率增加,但與生理鹽水對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三個(gè)濃度組的心率都有加快,兩個(gè)高濃度組的心率與生理鹽水對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0.01)。三個(gè)濃度組平均動(dòng)脈壓都有增加,兩個(gè)高濃度組的平均動(dòng)脈壓與生理鹽水對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0.05,P＜0.01)。(3)大鼠側(cè)腦室注射ATP(1mM,5μl),膈神經(jīng)放電活動(dòng)增強(qiáng),動(dòng)脈血壓升高、心率加快。隨著ATP濃度的加大,膈神經(jīng)放電活動(dòng)逐漸增強(qiáng),1、10、100mM三個(gè)濃度組的膈神經(jīng)放電活動(dòng)的強(qiáng)度分別與生理鹽水對(duì)照組相比,100mM濃度組的有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0.05)。三個(gè)濃度組的呼吸頻率沒(méi)有發(fā)生明顯的變化,平均動(dòng)脈壓雖有增加,但無(wú)統(tǒng)計(jì)意義。三個(gè)濃度組的心率都有增加,兩個(gè)高濃度組的心率與生理鹽水對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0.05)。(4)微量注射OXA(100μg/ml,0.1μl)到前包欽格復(fù)合體,膈神經(jīng)放電活動(dòng)增強(qiáng),血壓、心率變化不明顯。膈神經(jīng)放電活動(dòng)的強(qiáng)度與生理鹽水對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0.01)。而平均動(dòng)脈壓、心率和呼吸頻率與生理鹽水對(duì)照組相比都無(wú)統(tǒng)計(jì)意義。微量注射SB408124(10μg/ml,0.1μl)到前包欽格復(fù)合體,膈神經(jīng)放電活動(dòng)減弱,血壓、心率變化不明顯。膈神經(jīng)放電活動(dòng)的強(qiáng)度與生理鹽水對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0.05)。平均動(dòng)脈壓、心率和呼吸頻率與生理鹽水對(duì)照組相比都無(wú)統(tǒng)計(jì)意義。先后微量注射SB408124(10μg/ml,0.1μl)和OXA(100μg/ml,0.1μl)到前包欽格復(fù)合體,膈神經(jīng)放電活動(dòng)、動(dòng)脈血壓和心率都沒(méi)有明顯的變化,膈神經(jīng)放電活動(dòng)的強(qiáng)度與生理鹽水對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)差異,與單獨(dú)注射OXA(100μg/ml,0.1μl)組相比有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0.001)。平均動(dòng)脈壓、心率和呼吸頻率與生理鹽水對(duì)照組及單獨(dú)注射OXA(100μg/ml,0.1μl)組相比都無(wú)統(tǒng)計(jì)意義。先后微量注射N(xiāo)F279(10mM,0.1μl)和OXA(100μg/ml,0.1μl)到前包欽格復(fù)合體,膈神經(jīng)放電活動(dòng),動(dòng)脈血壓和心率變化不明顯,膈神經(jīng)放電活動(dòng)的強(qiáng)度與生理鹽水對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)差異,與單獨(dú)注射OXA(100μg/ml,0.1μl)組相比有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0.01)。平均動(dòng)脈壓、心率和呼吸頻率與生理鹽水對(duì)照組及單獨(dú)注射OXA(100μg/ml,0.1μl)組相比都無(wú)統(tǒng)計(jì)意義。前包欽格復(fù)合體微量注射ATP(10mM,0.1μl),膈神經(jīng)放電活動(dòng)明顯減弱,動(dòng)脈血壓、心率無(wú)明顯變化。膈神經(jīng)放電活動(dòng)的強(qiáng)度與生理鹽水對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)差異(P＜0.05),平均動(dòng)脈壓、心率和呼吸頻率的變化無(wú)統(tǒng)計(jì)意義。先后微量注射N(xiāo)F279(10mM,0.1μl)和ATP(10mM,0.1μl)到前包欽格復(fù)合體,膈神經(jīng)放電活動(dòng)減弱,但減弱的幅度較單獨(dú)注射ATP組小,血壓和心率的變化不明顯。膈神經(jīng)放電活動(dòng)的強(qiáng)度與生理鹽水對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)意義(P＜0.05),與單獨(dú)注射ATP組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)意義。 結(jié)論 (1) OXA免疫反應(yīng)纖維在新生和成年SD大鼠的延髓廣泛分布,在NTS、Ⅻ和VLM分布比較明顯。OX_1R免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞在新生和成年SD大鼠的延髓廣泛分布,在Ⅻ、VLM染色更明顯;隨著大鼠發(fā)育成熟,OX_1R表達(dá)水平增加。 (2) OXA和ATP在成年SD大鼠腦內(nèi)對(duì)呼吸活動(dòng)都有興奮作用,但前者的效應(yīng)呈劑量依賴(lài)性,后者卻沒(méi)有劑量依賴(lài)。 (3) OXA在前包欽格復(fù)合體對(duì)呼吸活動(dòng)起興奮作用,OX_1R介導(dǎo)OXA(內(nèi)源性和外源性)興奮呼吸活動(dòng)的作用。ATP在前包欽格復(fù)合體對(duì)呼吸活動(dòng)起抑制作用,其受體(P2X)介導(dǎo)ATP的中樞作用,也參與OXA興奮呼吸活動(dòng)的作用。
[Abstract]:Objective the medulla oblongata is the basic part of the respiratory center and plays an important role in the production of respiratory rhythm. Orexins is considered as an important neuropeptide produced by the hypothalamus, which plays a regulatory role in many physiological activities, including ingestion, energy metabolism, endocrine, cardiovascular, respiratory, sleep wakefulness, wakefulness and wakefulness. The purpose of this study is to observe the distribution of A (orexinA, OXA) and growth factor 1 receptor (orexin type 1 receptor, OX_1R) in rat medulla oblongata, explore the effect of OXA on respiratory activity and its central mechanism, and preliminarily analyze the relationship between OXA and ATP of respiratory activity.
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類(lèi)號(hào)】：R33

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本文編號(hào)：1344537