本文關(guān)鍵詞：皮膚癬菌體外藥物敏感試驗(yàn)及RAPD分型研究　出處：《青島大學(xué)》2007年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 目的：皮膚癬菌病是皮膚科的常見病、多發(fā)病，其病原真菌—皮膚癬菌的分類鑒定以及療效不佳、復(fù)發(fā)率高一直是流行病學(xué)研究和防治工作中的難題。本課題對皮膚癬菌從臨床標(biāo)本的真菌學(xué)分析、抗真菌藥物敏感性方法以及分子生物學(xué)分類鑒定等方面進(jìn)行研究，以期為皮膚癬菌的分離、培養(yǎng)、鑒定提供指導(dǎo)，為皮膚癬菌病的診斷、治療提供依據(jù)并為新藥評價提供可靠的手段。 方法：1、臨床標(biāo)本的真菌學(xué)分析：本試驗(yàn)包括18-70歲，病甲面積＞25％腳趾甲癬病例120例，分別來源于青島醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院等青島各醫(yī)院皮膚科，應(yīng)用KOH法鏡檢結(jié)合Mycosel和PDA鑒別選擇性培養(yǎng)基對病甲標(biāo)本進(jìn)行分離，然后應(yīng)用普通平板分離培養(yǎng)法和小培養(yǎng)法對分離出的皮膚癬菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。2、皮膚癬菌抗真菌藥物敏感性研究：按美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(NCCLS)2003年版產(chǎn)孢豐富絲狀真菌的液基稀釋抗真菌藥敏試驗(yàn)參考方案(M38-A)測定藥物對所分離的三種皮膚癬菌的最低抑菌濃度(MIC)。3、皮膚癬菌的分子生物學(xué)分類鑒定：運(yùn)用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA分析的方法，以單個引物(GACA)_4對我室分離培養(yǎng)得到的四種常見皮膚癬菌(紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌和石膏樣小孢子菌)的基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增。檢測聚合酶鏈反應(yīng)產(chǎn)物，并根據(jù)電泳后指紋圖譜的差異進(jìn)行種屬間鑒別。 結(jié)果：1、臨床標(biāo)本的真菌學(xué)分析：從120例甲癬患者的病甲上獲得的標(biāo)本共培養(yǎng)和檢測到4種皮膚癬菌，分別是紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌、石膏樣小孢子菌，這4種皮膚癬菌所占的比例分別為68.3％、22.5％、7.5％、1.7％。2、皮膚癬菌抗真菌藥物敏感性研究：藥敏試驗(yàn)檢測出三種甲真菌的MIC值，結(jié)果顯示特比萘酚對三種皮膚癬菌都具有非常好的抑制作用；M38-A方案有較好的重復(fù)性和穩(wěn)定性，可作為一種較好的檢驗(yàn)方法在實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用。3、皮膚癬菌的分子生物學(xué)分類鑒定：運(yùn)用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA分析的方法可對四種常見的皮膚癬菌(紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌和石膏樣小孢子菌)的基因型進(jìn)行快速鑒別。 結(jié)論：1、臨床標(biāo)本的真菌學(xué)分析：應(yīng)用KOH法鏡檢結(jié)合Mycosel和PDA鑒別選擇性培養(yǎng)基對標(biāo)本進(jìn)行分離，然后應(yīng)用普通平板分離培養(yǎng)法和小培養(yǎng)法可以完成對皮膚癬菌的分離培養(yǎng)、種屬鑒定。2、皮膚癬菌抗真菌藥物敏感性研究：應(yīng)用NCCLS的M38-A方案檢測特比萘芬對常見四種皮膚癬菌的抗真菌活性，結(jié)果理想，，拓寬了該方案的應(yīng)用范圍，有望建立皮膚癬菌抗真菌藥敏試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化方案，更好地為臨床治療提供依據(jù)并為新藥評價提供可靠的手段。3、皮膚癬菌的分子生物學(xué)分類鑒定：運(yùn)用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA分析的方法，以(GACA)_4為單個引物可以快速鑒定和區(qū)分常見皮膚癬菌，這種PCR分型技術(shù)為皮膚癬菌病病原菌的鑒別及流行病學(xué)研究提供了一種簡捷、特異的方法，對皮膚癬菌病的防治研究具有實(shí)際意義。
[Abstract]:Objective: dermatitis is a common and frequently occurring disease in Department of dermatology. Its classification and identification of pathogenic fungi and dermatitis, and its poor curative effect and high recurrence rate have been a difficult problem in epidemiological research and prevention. The subject of dermatophytes from clinical specimens, mycological analysis of antifungal susceptibility and molecular identification and other aspects of research, with a view to the isolation, culture and identification of dermatophytes to provide guidance, provide the basis for new drug evaluation and provide a reliable method for the diagnosis and treatment of dermatophytosis.
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R379.2

【參考文獻(xiàn)】

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1 張宏;深部真菌病快速診斷的新實(shí)驗(yàn)方法[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊;1995年01期

2 張宏;真菌分類學(xué)中的分子生物學(xué)技術(shù)點(diǎn)評[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊;1997年04期

3 姚志榮，廖萬清，徐紅，趙謹(jǐn);甲真菌病病原菌流行病學(xué)變遷趨勢[J];臨床皮膚科雜志;1995年03期

4 王愛平,王端禮,李若瑜,王曉紅,周祖德,萬U

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