本文關(guān)鍵詞：電磁脈沖輻射對小鼠睪丸Smads表達(dá)及生精細(xì)胞的影響　出處：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2007年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】： 轉(zhuǎn)化生長因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)超家族是一類重要的睪丸功能局部調(diào)節(jié)因子,骨形成蛋白(BMP)是TGF-β超家族的一個(gè)大的組成部分。Smad(Sekclsky mothers against dpp)蛋白是TGF-β超家族下游一類細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子,可將信號直接從細(xì)胞膜轉(zhuǎn)導(dǎo)入細(xì)胞核內(nèi),具有轉(zhuǎn)錄活化的作用。Smads在睪丸中表達(dá)具有細(xì)胞類型及時(shí)空特異性,可介導(dǎo)上游分子參與生精過程的不同時(shí)相。電磁脈沖(Electromagnetic pulses,EMPs)是幾乎包含電磁波譜的所有頻段的電磁波,已知一定強(qiáng)度的電磁脈沖輻射會導(dǎo)致小鼠睪丸生精細(xì)胞的凋亡與壞死,并伴隨著小鼠睪丸TGF-β及其受體表達(dá)的變化。但小鼠睪丸受到電磁輻射時(shí),Smads蛋白及其介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在睪丸輻射損傷及修復(fù)中的作用仍有待研究。 本課題為了探討Smads蛋白及其介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在小鼠睪丸受到輻射損傷及損傷修復(fù)中的作用,應(yīng)用免疫組織化學(xué)SABC法,并結(jié)合小鼠睪丸生精上皮周期的時(shí)相特點(diǎn),對Smads蛋白在正常小鼠睪丸以及輻射后小鼠睪丸生精上皮周期的分布和表達(dá)進(jìn)行了研究;通過原位末端標(biāo)記術(shù),HE染色法以及免疫組織化學(xué)法比較了正常小鼠以及受輻射小鼠睪丸生精細(xì)胞的凋亡情況和Smad4表達(dá)情況,試圖分析Smad4蛋白及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑與生精細(xì)胞凋亡的關(guān)系。 結(jié)果表明: ⒈輻射組小鼠Smad4、Smad1和Smad5在睪丸中的表達(dá)部位發(fā)生了細(xì)胞和時(shí)期特異性的變化。 Smad4在正常成年小鼠睪丸中的免疫反應(yīng)主要集中在間質(zhì)細(xì)胞胞質(zhì),在Sertoli細(xì)胞中也有少量表達(dá),而各級生精細(xì)胞未見陽性表達(dá)。EMP照射后Smad4在間質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)較對照組顯著降低(p0.05),在生精小管中粗線期精母細(xì)胞胞質(zhì)以及近管腔的精子細(xì)胞呈強(qiáng)陽性表達(dá),并且在少量初級精母細(xì)胞中也有較弱表達(dá)。 Smad1在正常成年小鼠睪丸中主要表達(dá)于第V至第X期粗線期精母細(xì)胞胞質(zhì),隨后弱表達(dá)于晚期精母細(xì)胞和早期圓形精子細(xì)胞,間質(zhì)細(xì)胞胞質(zhì)中也可見少量陽性產(chǎn)物,而在除早期圓形精子細(xì)胞、變形精子細(xì)胞和Sertoli細(xì)胞均未見陽性表達(dá)。EMP照射后,Smad1在圓形精子細(xì)胞和釋放期變形精子細(xì)胞中出現(xiàn)明顯陽性反應(yīng),而在精母細(xì)胞中的表達(dá)卻明顯減弱(p0.05)。Smad5在正常成年小鼠睪丸中強(qiáng)陽性表達(dá)于早期精母細(xì)胞和圓形精子細(xì)胞胞核,弱陽性表達(dá)于精原細(xì)胞胞核。EMP照射后,Smad5僅在釋放期精子細(xì)胞及變形精子細(xì)胞中有陽性表達(dá)。 2. HE染色顯示輻射后1d即可見大量凋亡與壞死生精細(xì)胞向管腔排放,至輻射后28d生精小管結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常。 3. TUNEL結(jié)果顯示照射后各時(shí)間組生精細(xì)胞凋亡數(shù)量較對照組明顯增加(p0.01)。 輻射組小鼠Smads在睪丸中的表達(dá)變化結(jié)果提示Smad4、Smad1和Smad5及其介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在小鼠睪丸輻射損傷及其修復(fù)過程中可能發(fā)揮了重要作用。 原位末端標(biāo)記術(shù)檢測結(jié)果提示Smad4及其介導(dǎo)的信號通路可能在EMP輻射后睪丸生精細(xì)胞凋亡過程中發(fā)揮重要作用。
[Abstract]:Transforming growth factor- TGF- (TGF- beta) superfamily is an important local regulator of testicular function. Bone morphogenetic protein (BMP) is a major part of TGF- beta superfamily. Smad (Sekclsky mothers against DPP) is a downstream intracellular signal transduction molecule of TGF- beta superfamily. It can transfer signals directly from cell membrane to nucleus, and has the function of transcriptional activation. The expression of Smads in the testis has cell type and space-time specificity, which can mediate upstream molecules to participate in the different phases of spermatogenesis. Electromagnetic pulses (EMPs) is the electromagnetic wave which contains almost all the electromagnetic waves. Electromagnetic radiation induced by a certain intensity can induce apoptosis and necrosis of testicular spermatogenic cells in mice, and is accompanied by the expression of TGF- beta and its receptor in mice. However, the role of Smads protein and its mediated signal transduction pathway in the radiation damage and repair of testis remains to be studied when the mouse testis is exposed to electromagnetic radiation.
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R363

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1341550