毛囊細胞高效分離培養(yǎng)方法的建立
本文關鍵詞:毛囊細胞高效分離培養(yǎng)方法的建立 出處:《廣州中醫(yī)藥大學學報》2014年05期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:【目的】建立一種簡單易行、高效穩(wěn)定、細胞活性好的毛囊細胞分離培養(yǎng)方法!痉椒ā繜o菌條件下剪下SD乳鼠觸須部皮膚,拔出單個毛囊。采用Ⅰ型膠原酶、胰酶兩步法消化毛囊,細胞懸液接種于細胞外基質包被的培養(yǎng)板中,以體積分數1%胎牛血清的K-SFM培養(yǎng)液培養(yǎng),次日換無血清培養(yǎng)液。剩余組織塊剪碎鋪展于培養(yǎng)瓶中,添加含血清的HG-DMEM培養(yǎng)基常規(guī)培養(yǎng)。取以上2種細胞進行免疫熒光鑒定。毛囊上皮細胞進行流式細胞儀檢測!窘Y果】兩步酶法分離得到的毛囊上皮細胞貼壁迅速,圓形或多角形,呈典型鋪路石狀。培養(yǎng)的組織塊周圍有長梭形細胞爬出,細胞有突起,并連接成網狀。毛囊上皮細胞CK15、CK19、β1整合素表達陽性,以G1期細胞為主,占75.6%。毛囊結締組織鞘細胞的層粘連蛋白、纖維連接蛋白、波形蛋白表達陽性!窘Y論】分離培養(yǎng)的細胞為毛囊干細胞和成纖維細胞,該方法得到的細胞貼壁快、均一性好、增殖能力強。
【作者單位】: 廣州中醫(yī)藥大學基礎醫(yī)學院;廣州中醫(yī)藥大學組織學與胚胎學教研室;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(編號:81102675)
【分類號】:R329
【正文快照】: 理想的組織工程皮膚(tissue engineering skin)是同時含有表皮和真皮2種組織結構的全層人工皮膚,對臨床治療大面積燒傷或深度潰瘍等皮膚缺損患者具有重要意義[1]。毛囊是皮膚中重要的附屬器官,毛囊上皮根鞘中的毛囊干細胞(hair folliclestem cells,FSC)和結締組織鞘中的成纖維
【參考文獻】
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【共引文獻】
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【二級參考文獻】
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【相似文獻】
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1 賈慧敏,張祖s,
本文編號:1332880
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