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毛囊細胞高效分離培養(yǎng)方法的建立

發(fā)布時間:2017-12-25 12:38

  本文關鍵詞:毛囊細胞高效分離培養(yǎng)方法的建立 出處:《廣州中醫(yī)藥大學學報》2014年05期  論文類型:期刊論文


  更多相關文章: 毛囊干細胞/病理學 成纖維細胞/病理學 分離 細胞培養(yǎng)


【摘要】:【目的】建立一種簡單易行、高效穩(wěn)定、細胞活性好的毛囊細胞分離培養(yǎng)方法!痉椒ā繜o菌條件下剪下SD乳鼠觸須部皮膚,拔出單個毛囊。采用Ⅰ型膠原酶、胰酶兩步法消化毛囊,細胞懸液接種于細胞外基質包被的培養(yǎng)板中,以體積分數1%胎牛血清的K-SFM培養(yǎng)液培養(yǎng),次日換無血清培養(yǎng)液。剩余組織塊剪碎鋪展于培養(yǎng)瓶中,添加含血清的HG-DMEM培養(yǎng)基常規(guī)培養(yǎng)。取以上2種細胞進行免疫熒光鑒定。毛囊上皮細胞進行流式細胞儀檢測!窘Y果】兩步酶法分離得到的毛囊上皮細胞貼壁迅速,圓形或多角形,呈典型鋪路石狀。培養(yǎng)的組織塊周圍有長梭形細胞爬出,細胞有突起,并連接成網狀。毛囊上皮細胞CK15、CK19、β1整合素表達陽性,以G1期細胞為主,占75.6%。毛囊結締組織鞘細胞的層粘連蛋白、纖維連接蛋白、波形蛋白表達陽性!窘Y論】分離培養(yǎng)的細胞為毛囊干細胞和成纖維細胞,該方法得到的細胞貼壁快、均一性好、增殖能力強。
【作者單位】: 廣州中醫(yī)藥大學基礎醫(yī)學院;廣州中醫(yī)藥大學組織學與胚胎學教研室;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(編號:81102675)
【分類號】:R329
【正文快照】: 理想的組織工程皮膚(tissue engineering skin)是同時含有表皮和真皮2種組織結構的全層人工皮膚,對臨床治療大面積燒傷或深度潰瘍等皮膚缺損患者具有重要意義[1]。毛囊是皮膚中重要的附屬器官,毛囊上皮根鞘中的毛囊干細胞(hair folliclestem cells,FSC)和結締組織鞘中的成纖維

【參考文獻】

相關期刊論文 前4條

1 黃恩毅;楊恬;陳偉;楊力;;大鼠毛囊干細胞的純化培養(yǎng)鑒定及其生物學特性[J];第三軍醫(yī)大學學報;2008年01期

2 唐建兵,李勤,陳璧,楊光成,廖元興,苑凱華;兩種人毛囊外根鞘細胞培養(yǎng)方法的比較[J];廣東醫(yī)學;2005年01期

3 史明艷;楊學義;竇忠英;;山羊毛囊干細胞分離培養(yǎng)方法研究[J];畜牧獸醫(yī)學報;2006年05期

4 盧葳;陳瑾;李惠;;兩種純化大鼠毛囊干細胞方法的比較[J];重慶醫(yī)科大學學報;2010年01期

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 姜自玲;楊力;連小華;楊恬;楊柯;;角膜緣基質誘導毛囊干細胞角膜上皮樣轉分化的研究[J];第三軍醫(yī)大學學報;2008年13期

2 趙奎;賈宗菲;弓慧敏;王振華;王恩峰;龐全海;;毛囊干細胞的分離方法及其應用[J];中國畜牧獸醫(yī);2010年12期

3 蘇小虎;高峰;劉迎春;王宏;張焱如;周歡敏;;絨山羊皮膚干細胞的初步分離及堿性磷酸酶鑒定[J];中國畜牧獸醫(yī);2012年10期

4 王宏;高峰;劉迎春;周歡敏;;絨山羊毛囊干細胞的分離培養(yǎng)及誘導分化鑒定[J];中國畜牧獸醫(yī);2014年10期

5 呂春榮;權國波;歐陽依娜;沈偉;洪瓊花;;云南半細毛羊毛囊干細胞無血清培養(yǎng)體系的建立[J];中國草食動物科學;2014年05期

6 金海蘭;張海明;曹誼林;;毛囊干細胞及其分離與識別方法的研究進展[J];中國美容醫(yī)學;2008年08期

7 倪振洪;邵勇;李玉紅;;毛囊干細胞標記物的研究進展[J];中國細胞生物學學報;2010年01期

8 盧濤;金巖;劉源;雷娟;劉曉亮;;從人外毛根鞘細胞分離獲取黑素母細胞[J];中國組織工程研究與臨床康復;2007年37期

9 王慧君;柏樹令;田偉;佟浩;;bulge區(qū)毛囊組織塊培養(yǎng)結合酶消化法分離大鼠毛囊隆突部細胞的生物學特征[J];中國組織工程研究與臨床康復;2008年20期

10 王祝遷;木拉提·熱夏提;李佳;王玉杰;;大鼠觸須毛囊干細胞的分離培養(yǎng)和鑒定[J];中國組織工程研究與臨床康復;2011年27期

相關會議論文 前1條

1 弓慧敏;龐全海;;羊駝毛囊干細胞分離培養(yǎng)的初步研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會獸醫(yī)產科學分會第五屆全體會議第十次學術研討會論文集[C];2009年

相關博士學位論文 前1條

1 高云鶴;以脫細胞臍動脈為支架構建組織工程血管的研究[D];吉林大學;2014年

相關碩士學位論文 前3條

1 王祝遷;大鼠毛囊干細胞的分離培養(yǎng)和鑒定方法研究[D];新疆醫(yī)科大學;2011年

2 孫錫金;毛囊組織工程的前期實驗研究[D];南方醫(yī)科大學;2007年

3 王宏;內蒙古白絨山羊毛囊來源干細胞的分離鑒定及其褪黑素受體基因cDNA的克隆[D];內蒙古農業(yè)大學;2014年

【二級參考文獻】

相關期刊論文 前6條

1 陳偉;楊恬;連小華;楊珂;黃恩毅;;大鼠表皮干細胞的分布與體外分離培養(yǎng)[J];第三軍醫(yī)大學學報;2007年05期

2 沈丹蓓,夏隆慶;角質形成細胞體外培養(yǎng)技術及應用的進展[J];國外醫(yī)學.皮膚性病學分冊;2000年02期

3 仇文穎,許增祿;毛囊干細胞的研究進展[J];基礎醫(yī)學與臨床;2002年04期

4 仇文穎;許增祿;徐園園;;成人毛囊干細胞分選及β-連環(huán)蛋白表達的研究[J];解剖學報;2006年02期

5 史明艷;楊學義;竇忠英;;山羊毛囊干細胞分離培養(yǎng)方法研究[J];畜牧獸醫(yī)學報;2006年05期

6 張群;楊光輝;叢笑倩;崔磊;張文杰;劉偉;曹誼林;;差速貼壁法分選人毛囊干細胞的研究[J];中華實驗外科雜志;2006年06期

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 賈慧敏,張祖s,

本文編號:1332880


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