發(fā)布時(shí)間：2017-12-19 01:28

  本文關(guān)鍵詞：Wnt3a對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞心肌細(xì)胞分化的影響

  更多相關(guān)文章： 胚胎干細(xì)胞 心肌細(xì)胞 分化 Wnta

【摘要】：目的:觀察Wnt3a信號(hào)對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cell,ESC)心肌細(xì)胞分化的影響。方法:用懸滴培養(yǎng)法促進(jìn)ESCs形成擬胚體(embryoid bodies,EBs)。用免疫熒光染色法檢測心肌特異性蛋白cTnT的表達(dá)。在不同分化時(shí)間加入Wnt3a及Wnt信號(hào)通路抑制劑Dkk-1觀察對(duì)搏動(dòng)EBs百分率的影響。用RT-PCR檢測Nk同源異型盒5(Nkx2.5)、鋅指轉(zhuǎn)錄因子-4(GATA-4)、β-肌球蛋白重鏈(β-MHC)及心房鈉尿肽(ANP)基因表達(dá)水平的變化。用Western blot檢測cTnT表達(dá)水平的變化。將不加入Wnt3a,分化第0~5天及5~10天加入Wnt3a的組分別命名為對(duì)照組,D0-5組及D5-10組。加入Dkk-1的組命名為Dkk-1組。結(jié)果:通過懸滴培養(yǎng)法形成的EBs能夠出現(xiàn)自發(fā)性搏動(dòng)并且有TnT表達(dá)。EBs形成過程中即分化第0~5天加入Wnt3a與對(duì)照組相比具有更高的搏動(dòng)EBs百分率,Nkx2.5、GATA4、β-MHC和ANP基因表達(dá)的水平,以及cTnT蛋白表達(dá)水平,而EBs形成后即分化第5~10天加入Wnt3a的結(jié)果相反。分化第5~10天加入Dkk-1與對(duì)照組相比具有更高的搏動(dòng)EBs百分率及cTnT蛋白表達(dá)水平,并且在分化第0~5天分別加入Wnt3a及Dkk-1與單獨(dú)加入Wnt3a及Dkk-1相比,搏動(dòng)EBs百分率及cTnT蛋白表達(dá)水平更高。結(jié)論:Wnt3a對(duì)ESCs向心肌細(xì)胞分化的調(diào)控呈時(shí)間依耐性,EBs形成過程中激活Wnt3a信號(hào)及EBs形成后阻斷Wnt3a信號(hào)能夠獲得更多的心肌細(xì)胞。
【作者單位】： 武漢大學(xué)中南醫(yī)院心內(nèi)科;南方醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)生物學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目資助(81200119) 中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金資助(121007)
【分類號(hào)】：R329.1
【正文快照】： 胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cells,ESCs)通過形成擬胚體(embryoid bodies,EBs)可分化成3個(gè)胚層的多種細(xì)胞,其中包括中胚層的心肌細(xì)胞[1]。ESCs源性心肌細(xì)胞可用于心臟發(fā)育或作為移植細(xì)胞用于治療心臟疾病方面的研究,但因其分化程度有限限制了其應(yīng)用[2]。通過一些因子調(diào)控ESCs

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1306393