本文關鍵詞：大鼠骨髓間充質干細胞的分離與培養(yǎng)方法優(yōu)化

  更多相關文章： 骨髓 間充質干細胞 分離與培養(yǎng) 肝細胞 膽管上皮細胞 大鼠

【摘要】：目的建立一個分離、培養(yǎng)、純化大鼠的骨髓間充質干細胞的方法。方法使用貼壁法分離大鼠的骨髓間充質干細胞,通過培養(yǎng)初期的頻繁換液和傳代過程中減少胰蛋白酶的暴露時間,達到骨髓間充質干細胞的純化。流式細胞儀檢測細胞表面標志物,MTT法檢測細胞生長狀況,暴露于不同的誘導培養(yǎng)基使細胞成骨、成脂,并向肝膽系分化。結果分離所得的細胞陽性表達CD29、CD44、CD90,而對于造血細胞標志物CD45呈陰性。在成骨、成脂培養(yǎng)基的誘導下,細胞ALP、茜素紅、油紅O染色均呈陽性,并發(fā)現傳至10代的細胞仍保持分化功能。將骨髓間充質干細胞貫續(xù)暴露于不同的細胞因子和激素,得到了表達肝細胞、膽管上皮細胞特異標志的子代細胞。結論通過改良后的方法可以高效、簡潔地分離出形態(tài)均一的大鼠骨髓間充質干細胞,并能夠向多胚層的細胞分化。
【作者單位】： 陜西省人民醫(yī)院;西安交通大學第三附屬醫(yī)院腫瘤外科;延安大學醫(yī)學院;西安交通大學第一附屬醫(yī)院肝膽外科;
【基金】：國家自然科學基金(81170455) 陜西省科技統籌創(chuàng)新工程項目(2011KJCL03-13)~~
【分類號】：R329
【正文快照】： 20世紀60年代,Friedenstein等[1]首先在骨髓基質間發(fā)現了間充質干細胞(MSCs)。MSCs作為一種成體干細胞,具有自我更新和多向分化的潛能。近年來研究表明,MSCs具有廣泛地可塑性,暴露于不同的微環(huán)境,可使其基因重組并向全部3個胚層的細胞分化,包括肺泡上皮細胞、視網膜色素、皮膚

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