本文關(guān)鍵詞：LAMP快速檢測(cè)日本血吸蟲(chóng)感染性釘螺的研究

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【摘要】：目的建立一種快速檢測(cè)日本血吸蟲(chóng)感染性釘螺的方法。方法采用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)以日本血吸蟲(chóng)的特異基因?yàn)榘行蛄?利用Primer Explorer V3軟件設(shè)計(jì)擴(kuò)增靶基因的4條LAMP引物,酚氯仿法提取感染性釘螺中的日本血吸蟲(chóng)DNA,取適量模板DNA加入LAMP反應(yīng)體系進(jìn)行對(duì)日本血吸蟲(chóng)靶基因擴(kuò)增,經(jīng)肉眼觀察、SYBR Green I染色電泳及測(cè)DNA序列來(lái)判定擴(kuò)增產(chǎn)物。在99個(gè)陰性釘螺中各加入1個(gè)陽(yáng)性釘螺,其中每個(gè)陽(yáng)性釘螺分別感染日本血吸蟲(chóng)毛蚴數(shù)量分別為10、8、6、4、2、1條。結(jié)果感染性釘螺檢測(cè)管經(jīng)顯色呈綠色為陽(yáng)性,陰性釘螺呈棕色;日本血吸蟲(chóng)的特異基因經(jīng)LAMP擴(kuò)增后電泳呈現(xiàn)LAMP特征性梯狀條帶,陰性釘螺及感染肝吸蟲(chóng)不出現(xiàn)LAMP特征性梯狀條帶;擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)酶切及序列分析顯示為目的基因;在100個(gè)釘螺中只要有2條日本血吸蟲(chóng)毛蚴感染便可檢出。結(jié)論環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(LAMP)可快速有效檢測(cè)日本血吸蟲(chóng)感染性釘螺,有望為疫區(qū)日本血吸蟲(chóng)感染性釘螺高效快速檢測(cè)提供一種新方法 。
【作者單位】： 湘南學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部解剖學(xué)教研室;
【基金】：湖南省高等學(xué)�？茖W(xué)研究項(xiàng)目(10C1240)
【分類號(hào)】：R383.24
【正文快照】： detecting日本血吸蟲(chóng)(Sctotoso?yaporaicwn)中間宿主湖北 日本血吸蟲(chóng)陽(yáng)性及陰性釘螺由南華大學(xué)醫(yī)學(xué)院釘螺(Oncomelania )在血吸蟲(chóng)病傳播中起著非常重要的作用,其感染情況可反映血吸蟲(chóng)病流行區(qū)的流行態(tài)勢(shì)[1]。近年來(lái),~?些檢測(cè)螺體內(nèi)曼氏血吸蟲(chóng)DNA的PCR技術(shù)巳建立,并且具有很好

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 孫菲;魯少平;成英;宋艷輝;;環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)研究進(jìn)展[J];中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志;2013年06期

2 黃火清;郁昂;;環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的研究進(jìn)展[J];生物技術(shù);2012年03期

3 陳軍虎;聞禮永;張旭照;張劍鋒;俞麗玲;洪林娣;;檢測(cè)日本血吸蟲(chóng)感染性釘螺PCR方法的建立[J];中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志;2006年03期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉蕓;唐金明;陶虹;孫潔;盧體康;廖立珊;劉建利;曾少靈;曹琛福;張彩虹;阮周曦;呂建強(qiáng);楊俊興;花群義;陳正禮;秦智鋒;;H5亞型禽流感病毒現(xiàn)場(chǎng)實(shí)時(shí)熒光RT-LAMP檢測(cè)方法點(diǎn)的建立與優(yōu)化[J];病毒學(xué)報(bào);2013年05期

2 陳兵;胡運(yùn)發(fā);孫潔;陳書琨;劉建利;曾少靈;曹琛福;張彩虹;阮周曦;林慶燕;呂建強(qiáng);楊俊興;花群義;盧體康;秦智鋒;;新城疫病毒實(shí)時(shí)熒光RT-LAMP檢測(cè)方法的建立[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年07期

3 肖婧凡;王s，

本文編號(hào)：1297725