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結(jié)核分枝桿菌PZase-GST融合蛋白表達(dá)與鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-12-03 00:26

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【摘要】:目的構(gòu)建及鑒定含有GST標(biāo)簽的結(jié)核分枝桿菌pncA基因的原核表達(dá)載體,并在大腸桿菌中高效表達(dá)融合蛋白。方法 PCR擴(kuò)增結(jié)核桿菌pncA基因,并構(gòu)建到pGEX4T-1上。重組質(zhì)粒經(jīng)測(cè)序鑒定后進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。采用聚丙烯酰胺凝膠電泳和免疫印跡分析重組蛋白。結(jié)果與預(yù)期大小相似,PCR擴(kuò)增出大約600 bp的pncA基因,并且吡嗪酰胺酶(PZase)在誘導(dǎo)后得以高效表達(dá)。結(jié)論構(gòu)建了質(zhì)粒載體pGEX4T-1-pncA,并經(jīng)誘導(dǎo)后高效表達(dá)了PZase融合蛋白,為進(jìn)一步研究吡嗪酰胺(PZA)耐藥性奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 河南省疾病預(yù)防控制中心;
【分類號(hào)】:R378.911
【正文快照】: 據(jù)WHO統(tǒng)計(jì)[1],全世界每年因結(jié)核病死亡人數(shù)超過(guò)200萬(wàn),新發(fā)病例超過(guò)880萬(wàn),中國(guó)現(xiàn)有結(jié)核病人約600萬(wàn),新發(fā)病例113萬(wàn)/年,死亡人數(shù)25萬(wàn)/年,成為結(jié)核病高負(fù)擔(dān)地區(qū)。作為空氣傳播的傳染病,結(jié)核病人的治療成為控制結(jié)核病的關(guān)鍵,異煙肼、利福平、吡嗪酰胺和乙胺丁醇是WHO推薦治療結(jié)核

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本文編號(hào):1246831

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