本文關(guān)鍵詞：產(chǎn)腸毒素大腸桿菌不耐熱腸毒素B亞單位可有效誘導(dǎo)和增強(qiáng)對(duì)腸道病毒71型的黏膜免疫應(yīng)答

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【摘要】：目的研究產(chǎn)腸毒素大腸桿菌不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)的免疫原性。評(píng)價(jià)腸道病毒71型(EV71)衣殼蛋白VP1聯(lián)合LTB的鼻腔免疫效果。方法構(gòu)建重組質(zhì)粒pET32a-LTB,表達(dá)的6×His-LTB融合蛋白用Ni2+-NTA樹脂純化后免疫新西蘭大白兔制備抗血清,ELISA檢測(cè)抗血清效價(jià)。用純化的EV71 VP1、LTB聯(lián)合EV71 VP1、生理鹽水分別經(jīng)鼻腔免疫BALB/c小鼠,收集血清、肺和小腸黏膜沖洗液,采用間接ELISA檢測(cè)IgG和分泌性IgA(sIgA)。結(jié)果已成功構(gòu)建重組質(zhì)粒pET32a-LTB。表達(dá)的6×His-LTB融合蛋白主要以包涵體形式表達(dá),相對(duì)分子質(zhì)量(Mr)約為30 000,免疫兔所制備的抗血清效價(jià)為1∶125 000。EV71 VP1聯(lián)合LTB組的小鼠特異性IgG和sIgA水平較EV71 VP1單獨(dú)免疫組和對(duì)照組有明顯增高。結(jié)論在E.coli BL21(DE3)中成功表達(dá)了6×His-LTB融合蛋白,純化的融合蛋白具有良好的免疫活性和佐劑活性。通過(guò)滴鼻免疫,LTB可有效增強(qiáng)特異性血清抗體反應(yīng),誘導(dǎo)黏膜免疫應(yīng)答。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;重慶醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)腫瘤研究中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30972585)
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 在發(fā)展中國(guó)家,引起嬰幼兒和旅行者腹瀉的主要病原菌為人源性產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(enterotoxigenicEscherichia coli,ETEC),每年因ETEC腹瀉而夭折的兒童多達(dá)數(shù)十萬(wàn)[1-3]。ETEC分泌的毒性蛋白有2種:耐熱腸毒素(heat-stable entemtoxin,ST)和不耐熱腸毒素(heat-labile enterotoxin,L

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 姜柯安;賀志良;宋方洲;馬永平;;產(chǎn)腸毒素大腸桿菌K88菌毛蛋白與大腸桿菌不耐熱腸毒素b亞單位的原核表達(dá)及其鼻腔免疫效果[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2012年09期

2 賀志良;姜柯安;宋方洲;馬永平;;產(chǎn)腸毒素大腸桿菌987P菌毛蛋白FasA亞單位的原核表達(dá)及其免疫原性[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2012年09期

3 周建嫦,張建中,何利華,徐采樸,張茂俊,盛濤,郭浩巖,肖文平;幽門螺桿菌cagA克隆表達(dá)[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2002年04期

4 鄭繼平;腸毒素大腸桿菌疫苗研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2003年01期

5 李國(guó)平,楊恬;粘膜免疫系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2001年06期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 胡建軍;陳創(chuàng)夫;祝建波;;K88菌毛基因的克隆及ST表位序列在菌毛基因上的融合[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年21期

2 王新;劉金玲;索占偉;穆祥;韋旭斌;譚建華;;大腸桿菌病與微血管之間的密切關(guān)系[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2006年06期

3 王R，

本文編號(hào)：1245976