本文關(guān)鍵詞：攜帶tPA信號(hào)肽序列HuZP3核心抗原核酸疫苗質(zhì)粒的構(gòu)建與體外瞬時(shí)表達(dá)

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【摘要】：目的:構(gòu)建含有組織型纖溶酶原激活劑(tPA)信號(hào)肽的人卵透明帶3(HuZP3)蛋白核心抗原核酸疫苗質(zhì)粒并進(jìn)行體外瞬時(shí)表達(dá)。方法:將HuZP3基因用PCR方法擴(kuò)增并分別引入限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn),然后克隆入pIRESIneo載體中獲得核酸疫苗質(zhì)粒,經(jīng)篩選鑒定后,將上述核酸疫苗質(zhì)粒及空載體質(zhì)粒pIRESIneo分別用脂質(zhì)體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞,應(yīng)用免疫印跡法檢測(cè)核心抗原在體外CHO細(xì)胞中的表達(dá),并將其免疫實(shí)驗(yàn)小鼠,以酶聯(lián)免疫吸附法驗(yàn)證其免疫原性。結(jié)果:成功構(gòu)建以pIRESIneo為載體的含tPA信號(hào)肽的HuZP3核心抗原核酸疫苗質(zhì)粒,體外瞬時(shí)表達(dá)證實(shí)含tPA信號(hào)肽的HuZP3核心抗原在CHO細(xì)胞胞內(nèi)和胞外均能表達(dá),含tPA信號(hào)肽的HuZP3核心抗原核酸疫苗質(zhì)粒的核心抗原表達(dá)水平較高,核酸疫苗質(zhì)粒具有很好的免疫原性。結(jié)論:以pIRESIneo為載體的含tPA信號(hào)肽的HuZP3核心抗原核酸疫苗能夠?qū)⒓?xì)胞內(nèi)的HuZP3核心抗原分泌到細(xì)胞外,構(gòu)建的核酸疫苗質(zhì)粒pIRES1-ZP3/tPA具有很好的免疫原性,為進(jìn)一步研究其免疫原性奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;吉林大學(xué)第四醫(yī)院;吉林省人民醫(yī)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所;
【基金】：吉林省科技廳計(jì)劃發(fā)展項(xiàng)目(20140204001YY)
【分類號(hào)】：R392.1
【正文快照】： 理想的透明帶疫苗應(yīng)該能誘發(fā)足夠的抗體反應(yīng)而不激活病理性的T細(xì)胞反應(yīng),即能夠誘發(fā)足夠滴度的抗透明帶抗體并產(chǎn)生明顯的避孕效果而又不至于引起卵巢自身免疫疾病,因此制備只含有ZP3 B細(xì)胞表位而不帶人T細(xì)胞表位的肽段,對(duì)制備透明帶疫苗至關(guān)重要。本實(shí)驗(yàn)按編碼23~360肽段的人ZP

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 ;Regulating Effects of Novel CpG Chitosan-nanoparticles on Immune Responses of Mice to Porcine Paratyphoid Vaccines[J];Biomedical and Environmental Sciences;2006年04期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 師瑞;吳開(kāi)春;吳道澄;樊代明;;新型胃癌靶向納米疫苗的制備及其生物學(xué)活性的研究[J];中華消化雜志;2007年08期

2 李斌;蘇乾蓮;趙武;秦毅斌;梁家幸;肖愛(ài)歡;盧冰霞;李瑩瑩;何穎;段群棚;姜佳佳;梁保忠;;三個(gè)豬戊型肝炎病毒ORF2基因連續(xù)片段核酸疫苗的構(gòu)建[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2013年10期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王鳳娟;JEV多表位基因重組痘苗病毒安卡拉株（rMVA-mep）及其免疫效果評(píng)價(jià)[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王陸寶;冉多良;王紅霞;孟慶文;徐佳;吳東來(lái);;SARS-Co V S基因重組質(zhì)粒的構(gòu)建與瞬時(shí)表達(dá)[J];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年04期

2 陶俊;李丹;鄧寧;王宏;龔義平;向軍儉;;抗bFGF人源性抗體的瞬時(shí)表達(dá)、純化及鑒定[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2010年10期

3 孫夢(mèng)梅;靳彥文;李平;曹誠(chéng);張部昌;;新型抗uPAR人源化抗體的表達(dá)和活性檢測(cè)[J];軍事醫(yī)學(xué);2011年04期

4 李云華;王公金;;Ser-125突變型人白細(xì)胞介素-2在家兔乳腺中的瞬時(shí)表達(dá)[J];江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2005年04期

5 張夢(mèng)寒,諸葛洪祥,陳明中,許菊;漢灘病毒76-118株核蛋白部分基因片段的克隆、表達(dá)和抗原活性測(cè)定[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2005年04期

6 趙群力;閔娟;周懷瑜;古欽民;叢華;李瑛;;新型基因佐劑SPreS2真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其瞬時(shí)表達(dá)[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年09期

7 楊晶;郭詠昕;任素平;周婷婷;李海燕;李校X;;利用紅花瞬時(shí)表達(dá)aFGF-GFP融合基因的研究[J];中國(guó)中藥雜志;2011年03期

8 胡玲玲;徐耀瑜;陳永井;馬泓冰;程鋼;劉玉華;王艷茹;孫杰;陳明心;邱玉華;;抗人CD86人-鼠嵌合抗體的構(gòu)建及在CHO細(xì)胞的表達(dá)[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2008年02期

9 陶俊;向軍儉;王宏;龔義平;鄧寧;;人源性抗體在HEK293T細(xì)胞中瞬時(shí)表達(dá)條件的優(yōu)化[J];生物技術(shù)通報(bào);2010年11期

10 郭焱,金寧一,郭巍,王爾孚,張蕾;人類免疫缺陷病毒B亞型代表株候選疫苗的研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2002年05期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙陽(yáng);柳子星;王穎;張惠珍;王樹(shù)軍;葛海良;;大鼠IL—10真核表達(dá)載體在軟骨細(xì)胞中的瞬時(shí)表達(dá)[A];中國(guó)免疫學(xué)會(huì)第四屆學(xué)術(shù)大會(huì)會(huì)議議程及論文摘要集[C];2002年

2 嚴(yán)杰;;醫(yī)學(xué)細(xì)菌學(xué)研究熱點(diǎn)與發(fā)展趨勢(shì)[A];浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)微生物與免疫學(xué)及醫(yī)學(xué)病毒學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

3 王海紅;曲忠森;張迎春;王建枝;;DVL-1 cDNA重組質(zhì)粒在N2a細(xì)胞中的瞬時(shí)表達(dá)[A];湖北省暨武漢市病理生理學(xué)會(huì)第十二屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2004年

4 張秉強(qiáng);黃英;何茂銳;唐霓;吳瑩;張君;陳維賢;黃愛(ài)龍;Tong-Chuan He;;不同靶區(qū)RNA干擾抑制HBV復(fù)制與表達(dá)[A];第五屆全國(guó)肝臟疾病臨床暨中華肝臟病雜志成立十周年學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

5 馬正海;周璨林;王艷萍;熱西旦;余勐;張富春;;優(yōu)化HPV16L1基因密碼子以增強(qiáng)DNA疫苗免疫效果[A];2005全國(guó)第二屆核酸疫苗研討會(huì)論文集[C];2005年

6 王艷萍;馬正海;熱西旦;周璨林;余勐;張富春;;蛋白分泌溶解片段與HPV16 L1融合增強(qiáng)DNA疫苗免疫效果[A];2005全國(guó)第二屆核酸疫苗研討會(huì)論文集[C];2005年

7 吳麗娟;陳偉;康格非;蔣建新;朱佩芳;;鋅指蛋白A20基因沉默載體研究與初步應(yīng)用[A];第五次全國(guó)中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

8 吳曉娟;冷梅;趙大鵬;崔穎杰;張巖;汪春義;戚鳳春;郭新;付學(xué)奇;;帶有IL-2基因佐劑的乙肝病毒DNA疫苗構(gòu)建及其免疫效果的觀察[A];2006年全國(guó)生化與生物技術(shù)藥物學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

9 張小榮;焦新安;潘志明;張曉明;劉秀梵;;以減毒沙門氏菌運(yùn)送的H5亞型禽流感病毒DNA疫苗的構(gòu)建及其對(duì)小鼠的免疫原性[A];2005全國(guó)第二屆核酸疫苗研討會(huì)論文集[C];2005年

10 吳金明;黃智銘;吳建勝;林向飛;陳向榮;黃慶科;;乙型肝炎病毒L02細(xì)胞轉(zhuǎn)染模型的建立與鑒定[A];2005年浙江省消化系疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 丁一;tPA乳腺特異性表達(dá)載體的構(gòu)建及其瞬時(shí)表達(dá)[D];鄭州大學(xué);2003年

2 唐麗;新細(xì)胞粘附分子LSECtin識(shí)別活化T細(xì)胞的功能及其分子機(jī)制[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2006年

3 劉定燮;SV40載體/COS7細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)系統(tǒng)的建立與改進(jìn)[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2002年

4 廖國(guó)陽(yáng);HBV囊膜蛋白與HCV核心蛋白基因聯(lián)合免疫研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2000年

5 陳濤涌;來(lái)源于人樹(shù)突狀細(xì)胞的新型癌基因樣小G蛋白R(shí)abJ的生物學(xué)功能研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳宇;在煙草中瞬時(shí)表達(dá)人角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子-1（KGF1）[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

2 宋向鳳;人生長(zhǎng)激素基因在小鼠體內(nèi)的表達(dá)及對(duì)免疫功能的影響[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2003年

3 袁云;CEA乳腺特異性表達(dá)載體的構(gòu)建及其瞬時(shí)表達(dá)[D];鄭州大學(xué);2006年

4 宋曉妍;人生長(zhǎng)激素真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其瞬時(shí)表達(dá)[D];鄭州大學(xué);2006年

5 葉建新;人OSM基因的克隆、表達(dá)及功能研究[D];蘇州大學(xué);2005年

6 袁小松;增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（EGFP）基因在日本血吸蟲(chóng)體內(nèi)及原代培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)的異源表達(dá)[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2006年

7 陳琳;GFP-HCMV IE1融合蛋白對(duì)巨噬細(xì)胞分泌功能與凋亡的影響[D];南華大學(xué);2008年

8 徐耀瑜;CD80鼠—人嵌合抗體的構(gòu)建、表達(dá)及生物學(xué)功能的初步研究[D];蘇州大學(xué);2008年

9 石連;煙草表達(dá)粉塵螨1類變應(yīng)原及其免疫治療研究[D];安徽理工大學(xué);2012年

10 王春梅;新型人鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶Ⅱ抑制蛋白hCaMKIINα的克隆及其生物學(xué)功能研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

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