本文關(guān)鍵詞：基于兔BMSCs預(yù)血管化細(xì)胞膜片的體外構(gòu)建

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【摘要】：目的探討構(gòu)建預(yù)血管化細(xì)胞膜片新方法的可行性。方法取3周齡日本大耳白兔分離培養(yǎng)BMSCs,并在VEGF和bFGF作用下誘導(dǎo)其向血管內(nèi)皮樣細(xì)胞(endothelial like cells,ECs)分化(實(shí)驗(yàn)組),以未誘導(dǎo)細(xì)胞作為對(duì)照組,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形貌,并行血管性假血友病因子(von Willebrand factor,vWF)及CD31免疫熒光染色觀察。將第2代BMSCs以9×104個(gè)/cm2密度體外培養(yǎng)14 d形成未分化細(xì)胞膜片,將BMSCs誘導(dǎo)14 d獲得的ECs以5×104個(gè)/cm2密度接種在細(xì)胞膜片上(A組)培養(yǎng)3、7、14 d,以單純未分化的兔BMSCs膜片為B組,BMSCs誘導(dǎo)14 d獲得的ECs單獨(dú)培養(yǎng)為C組。倒置顯微鏡下觀察血管網(wǎng)絡(luò)形成,并行CD31免疫熒光染色及組織學(xué)觀察。結(jié)果原代BMSCs呈長(zhǎng)梭形;誘導(dǎo)分化后細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,呈"鋪路石"樣。實(shí)驗(yàn)組vWF及CD31免疫熒光染色均呈陽(yáng)性,而對(duì)照組均呈陰性。A組BMSCs誘導(dǎo)14 d后的ECs接種至未分化的BMSCs膜片上3、7、14 d后,細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,鏡下可見空泡樣、網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)形成;CD31免疫熒光檢測(cè)顯示了進(jìn)行性管腔形成過程;HE染色顯示了微血管管腔的形成。B、C組未觀察到類似改變。結(jié)論 BMSCs在合適條件下可誘導(dǎo)形成ECs;將由BMSCs誘導(dǎo)分化形成的ECs接種至未分化BMSCs膜片上,可在體外形成具有血管網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的預(yù)血管化膜片,為工程化血管組織構(gòu)建提供了新方法。
【作者單位】： 蘭州大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院口腔醫(yī)院正畸科;蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院口腔頜面外科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81170938、81300860) 蘭州大學(xué)中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(lzujbky-2013-173、lzujbky-2014-157) 全軍醫(yī)學(xué)科研“十二五”計(jì)劃課題面上項(xiàng)目(CWS12J066)~~
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展,如何使工程化組織獲得充足血供(即血管化)的問題已受到學(xué)者們的廣泛關(guān)注[1-3]。大量研究通過復(fù)合內(nèi)皮細(xì)胞與支架材料或支架材料負(fù)載促血管生長(zhǎng)因子來構(gòu)建血管(毛細(xì)血管),但由于支架材料潛在的免疫原性、不匹配的降解速率及較低的細(xì)胞利用率等缺點(diǎn)[4],

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 徐紅珍;蘇儉生;;組織工程骨的血管化研究進(jìn)展[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2010年04期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 馬東洋;基于骨髓基質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)建無外支架組織工程骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 何益群;董有海;;組織工程骨構(gòu)建的研究進(jìn)展[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年06期

2 李富航;靳宇飛;畢龍;裴國(guó)獻(xiàn);;P物質(zhì)在BMSCs來源的成骨細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞體外聯(lián)合培養(yǎng)中的作用[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年19期

3 陳亞莉;周諾;黃旋平;;細(xì)胞膜片技術(shù)及其在骨組織領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)展[J];中國(guó)修復(fù)重建外科雜志;2012年09期

4 曹鑫;金格勒;楊毅;陳慧錦;殷劍;;重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白2調(diào)節(jié)人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子[J];中國(guó)組織工程研究;2013年14期

5 曹鑫;陳慧錦;崔正禮;金格勒;楊毅;王亞楠;肖偉;;重組人BMP-2調(diào)節(jié)VEGF表達(dá)的濃度和時(shí)間依賴性研究[J];中國(guó)修復(fù)重建外科雜志;2013年08期

6 趙基棟;苗宗寧;錢寒光;彭瑋;司志平;;人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞促進(jìn)血管生成[J];中國(guó)組織工程研究;2013年23期

7 王紀(jì)文;李向東;魏國(guó)峰;;細(xì)胞共培養(yǎng)技術(shù)促進(jìn)類前微血管結(jié)構(gòu)發(fā)生[J];中國(guó)組織工程研究;2013年38期

8 趙天源;孫紅;;骨組織工程支架材料及其血管化的研究進(jìn)程[J];中國(guó)組織工程研究;2013年38期

9 冷冰;張鵬;任雨笙;梁春;曹智勇;吳宗貴;;脂聯(lián)素對(duì)高糖刺激下內(nèi)皮祖細(xì)胞的作用及其可能的作用機(jī)制[J];心臟雜志;2013年01期

10 王明海;洪洋;甘少磊;馮慶玲;吳俊國(guó);錢光;耿雷;董有海;;血管化可注射性納米組織工程骨對(duì)骨再生血管形成的影響[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年13期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 鄭玉蓉;膠原/殼聚糖—明膠微球支架緩釋三七皂甙Rg1促血管化研究[D];浙江大學(xué);2014年

2 金晗;聚乙烯亞胺—藻酸鹽/BMP-2基因復(fù)合物修飾的BMSCs細(xì)胞膜片促骨再生作用的研究[D];吉林大學(xué);2014年

3 丁祥龍;經(jīng)TiO_2納米管修飾表面為微納混合形貌的種植體其生物活性的體內(nèi)外研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

4 孫大煒;檸檬酸來源的成骨誘導(dǎo)支架促進(jìn)大鼠顱骨骨缺損再生的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙俊華;網(wǎng)孔n-HA/PA66/成骨細(xì)胞/VEGF165組織工程骨修復(fù)骨缺損再血管化與成骨活性的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

2 孫瑞;人工骨膜修復(fù)兔橈骨大段骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘭州大學(xué);2013年

3 郝曉娟;缺氧高糖預(yù)處理hUC-MSCs誘導(dǎo)分化為內(nèi)皮樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

4 王巍巍;維爾邁2號(hào)治療熱毒型下肢動(dòng)脈硬化閉塞癥的療效觀察[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2013年

5 李繪楠;圖案化纖維膜支架上血管相關(guān)細(xì)胞共培養(yǎng)的研究[D];西南交通大學(xué);2013年

6 李受益;雙因子誘導(dǎo)骨組織工程支架快速血管化的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

7 曹鑫;rhBMP-2調(diào)節(jié)人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞VEGF表達(dá)的生物學(xué)規(guī)律及其機(jī)制的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2013年

8 李萬(wàn)里;去細(xì)胞犬喉支架的體內(nèi)埋植實(shí)驗(yàn)[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

9 王耀一;帶蒂筋膜瓣促非細(xì)胞型組織工程化骨血管化及其成骨的組織學(xué)變化[D];河北北方學(xué)院;2012年

10 麻彩麗;柞蠶絲素作為VEGF165-Ang-1雙基因共表達(dá)質(zhì)粒傳遞載體的研究[D];蘇州大學(xué);2014年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 張全彬;王黎明;徐燕;;重組腺病毒介導(dǎo)增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年23期

2 金丹,陳濱,裴國(guó)獻(xiàn),王珂,唐光輝,魏寬海;筋膜瓣促組織工程骨再血管化及山羊長(zhǎng)段骨缺損的修復(fù)[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2005年03期

3 楊志明,樊征夫,解慧琪,秦廷武,彭文珍;組織工程化人工骨血管化研究[J];中華顯微外科雜志;2002年02期

4 李建軍;韓冬;孫鴻斌;王歡;徐莘香;;基因修飾的生物可降解人工骨修復(fù)骨缺損的血管化研究[J];中國(guó)修復(fù)重建外科雜志;2006年09期

5 梁峰;王韞芳;南雪;岳慧敏;徐迎新;施雙雙;李榮;裴雪濤;;體外誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào);2005年06期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 孫兆黎,孫秀蘭,馮畹蘭,張海玉,董春鈺,趙福譚;UV-B照射的皮膚異種、同種、自體移植后存活及血管化研究[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;1997年03期

2 王健華,王玉蘭;髂骨血管化帶“窗口”移植修復(fù)下頜骨缺損的護(hù)理[J];護(hù)理學(xué)雜志;1999年01期

3 楊志明,樊征夫,解慧琪,秦廷武,彭文珍;組織工程化人工骨血管化研究[J];中華顯微外科雜志;2002年02期

4 潘瑾,張益,毛馳,俞光巖;下頜骨缺損血管化腓骨瓣移植術(shù)后骨高度變化規(guī)律[J];中華口腔醫(yī)學(xué)雜志;2004年06期

5 連青萍,歸慶園;舌癌切除后血管化前臂皮瓣移植的手術(shù)配合[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2005年04期

6 張健;胡敏;韓志偉;張文怡;;成骨細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)復(fù)合肌瓣預(yù)構(gòu)血管化骨的初步研究[J];口腔醫(yī)學(xué)研究;2006年06期

7 汪道新;張靈;范錕旣;楊維琦;李偉萍;張力勇;王峰;;人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞移植對(duì)脫細(xì)胞豬真皮早期血管化的影響[J];臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2007年04期

8 樊建中;孔祥泉;史河水;徐海波;劉定西;;羥基磷灰石眼眶植入物纖維血管化進(jìn)程的MRI研究[J];臨床放射學(xué)雜志;2007年06期

9 簡(jiǎn)月奎;田曉濱;李波;周焯家;趙偉峰;張一;楊震;王遠(yuǎn)政;;異種脫蛋白骨復(fù)合物修復(fù)大段骨缺損的血管化觀察(英文)[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2008年23期

10 胡祥;余國(guó)榮;劉興邦;陶圣祥;曾中華;劉春;;封閉負(fù)壓引流技術(shù)對(duì)創(chuàng)面血管化的影響[J];醫(yī)學(xué)新知雜志;2008年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 樊建中;孔祥泉;史河水;徐海波;劉定西;;兔眼眶植入羥基磷灰石義眼臺(tái)血管化的MRI研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三屆全國(guó)放射學(xué)大會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2006年

2 喬亮;陸樹良;王志勇;韋俊;原博;金曙雯;花蘭女;廖鎮(zhèn)江;史濟(jì)湘;;糖尿病大鼠深二度燙傷創(chuàng)面血管化研究[A];第八屆全國(guó)燒傷外科學(xué)年會(huì)論文匯編[C];2007年

3 鄭杰;吳燁;黃文秀;牛剛;;血管化骨肌皮瓣修復(fù)上下頜骨缺損的臨床研究[A];第五次全國(guó)口腔頜面—頭頸腫瘤學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2006年

4 任天斌;宋瑩;曹春紅;王安;馮s，

本文編號(hào)：1230909