本文關鍵詞：基于兔BMSCs預血管化細胞膜片的體外構建

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【摘要】：目的探討構建預血管化細胞膜片新方法的可行性。方法取3周齡日本大耳白兔分離培養(yǎng)BMSCs,并在VEGF和bFGF作用下誘導其向血管內皮樣細胞(endothelial like cells,ECs)分化(實驗組),以未誘導細胞作為對照組,倒置顯微鏡下觀察細胞形貌,并行血管性假血友病因子(von Willebrand factor,vWF)及CD31免疫熒光染色觀察。將第2代BMSCs以9×104個/cm2密度體外培養(yǎng)14 d形成未分化細胞膜片,將BMSCs誘導14 d獲得的ECs以5×104個/cm2密度接種在細胞膜片上(A組)培養(yǎng)3、7、14 d,以單純未分化的兔BMSCs膜片為B組,BMSCs誘導14 d獲得的ECs單獨培養(yǎng)為C組。倒置顯微鏡下觀察血管網絡形成,并行CD31免疫熒光染色及組織學觀察。結果原代BMSCs呈長梭形;誘導分化后細胞形態(tài)發(fā)生改變,呈"鋪路石"樣。實驗組vWF及CD31免疫熒光染色均呈陽性,而對照組均呈陰性。A組BMSCs誘導14 d后的ECs接種至未分化的BMSCs膜片上3、7、14 d后,細胞形態(tài)發(fā)生改變,鏡下可見空泡樣、網狀結構形成;CD31免疫熒光檢測顯示了進行性管腔形成過程;HE染色顯示了微血管管腔的形成。B、C組未觀察到類似改變。結論 BMSCs在合適條件下可誘導形成ECs;將由BMSCs誘導分化形成的ECs接種至未分化BMSCs膜片上,可在體外形成具有血管網絡結構的預血管化膜片,為工程化血管組織構建提供了新方法。
【作者單位】： 蘭州大學口腔醫(yī)學院口腔醫(yī)院正畸科;蘭州軍區(qū)蘭州總醫(yī)院口腔頜面外科;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81170938、81300860) 蘭州大學中央高�；究蒲袠I(yè)務費專項資金(lzujbky-2013-173、lzujbky-2014-157) 全軍醫(yī)學科研“十二五”計劃課題面上項目(CWS12J066)~~
【分類號】：R363
【正文快照】： 隨著組織工程技術的發(fā)展,如何使工程化組織獲得充足血供(即血管化)的問題已受到學者們的廣泛關注[1-3]。大量研究通過復合內皮細胞與支架材料或支架材料負載促血管生長因子來構建血管(毛細血管),但由于支架材料潛在的免疫原性、不匹配的降解速率及較低的細胞利用率等缺點[4],

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本文編號：1230909