本文關鍵詞：ILK siRNA對高糖刺激的人腎小管上皮細胞GSK-3β及β-catenin表達的影響

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【摘要】：目的:探討高糖誘導腎小管上皮細胞轉分化中整合素連接激酶小干擾RNA(ILK siRNA)對糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)磷酸化和β-連環(huán)蛋白(β-catenin)核內表達的影響及意義。方法:體外培養(yǎng)人近端腎小管上皮細胞系HKC,分為正常對照組(NG)、高糖組(HG)、高糖+陰性轉染對照組(HG+HK)和高糖+ILK siRNA組(HG+ILK siRNA)。倒置熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白表達。RT-PCR及Western blotting檢測ILK mRNA及蛋白表達水平;免疫細胞化學檢測磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)和β-catenin表達。Western blotting檢測總GSK-3β、pGSK-3β、核β-catenin、總β-catenin、E-鈣黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的表達水平。結果:(1)倒置熒光顯微鏡下可見綠色熒光蛋白表達,證實構建的siRNA重組質粒成功轉染HKC細胞;(2)與HG和HG+HK組相比,HG+ILK siRNA組ILK mRNA及蛋白水平下降,但較NG組表達仍高;(3)HG+ILK siRNA組ILK基因沉默后,p-GSK-3β與核β-catenin蛋白表達較HG及HG+HK組均下降,但較NG組表達仍高。而總GSK-3β與總β-catenin在各組表達無明顯差異。結論:ILK、GSK-3β和β-catenin可能參與了高糖介導的腎小管上皮細胞轉分化過程。ILK可能通過調節(jié)Wnt/β-catenin途徑下游效應蛋白GSK-3β和β-catenin的表達而促使腎小管上皮細胞轉分化。
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院腎內科;河北醫(yī)科大學病理教研室;
【基金】：河北省衛(wèi)生廳課題(No.08282)
【分類號】：R363
【正文快照】： 近年研究發(fā)現(xiàn)腎小管間質纖維化程度與糖尿病腎病腎功能下降密切相關[1]。腎小管上皮細胞轉分化是腎小管間質纖維化的重要因素。整合素連接激酶(integrin-linked kinase,ILK)是腎小管間質損傷及纖維化最強誘導因子之一[2]。有關腫瘤研究表明ILK可通過抑制糖原合成酶激酶3β(gly

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本文編號：1203247