本文關(guān)鍵詞：人支氣管上皮細(xì)胞中苯并芘誘導(dǎo)TNF-α表達(dá)的分子機(jī)制

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【摘要】：目的:構(gòu)建腫瘤壞死因子-α(TNF-α)啟動(dòng)子雙熒光素酶報(bào)告基因載體,研究苯并芘(B[a]P)暴露對(duì)TNF-αm RNA表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。方法:采用Real time-PCR技術(shù)檢測(cè)B[a]P暴露下,人支氣管上皮細(xì)胞(Beas-2B)中TNF-αm RNA隨時(shí)間的變化趨勢(shì)。通過(guò)分子克隆技術(shù)構(gòu)建TNF-α啟動(dòng)子雙熒光素酶報(bào)告基因載體并檢測(cè)其活性。進(jìn)一步檢測(cè)Beas-2B細(xì)胞和人腎上皮細(xì)胞293T細(xì)胞暴露于B[a]P環(huán)境下,TNF-α啟動(dòng)子活性的變化趨勢(shì)。結(jié)果:Real time-PCR檢測(cè)B[a]P暴露下,24 h內(nèi),Beas-2B細(xì)胞中TNF-αm RNA表達(dá)量隨時(shí)間延長(zhǎng)升高。且B[a]P刺激Beas-2B細(xì)胞24 h內(nèi),TNF-α啟動(dòng)子活性也呈升高趨勢(shì)。B[a]P刺激293T細(xì)胞,TNF-α啟動(dòng)子活性也會(huì)升高。結(jié)論:成功構(gòu)建了TNF-α啟動(dòng)子雙熒光素酶報(bào)告基因載體。而且,B[a]P能夠促進(jìn)TNF-αm RNA的轉(zhuǎn)錄從而促進(jìn)TNF-αm RNA的表達(dá),且promoter1要比promoter2活性強(qiáng),沒有細(xì)胞特異性。
【作者單位】： 浙江省模式生物技術(shù)與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 溫州醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金重大研究計(jì)劃培育項(xiàng)目(91029 706) 浙江省自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(LY12C070001) 溫州醫(yī)科大學(xué)校人才啟動(dòng)經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目(89211004)
【分類號(hào)】：R346
【正文快照】： 2014-07-15基金項(xiàng)目:作者簡(jiǎn)介:腫瘤壞死因子-α(TNF-α)是TNF超家族中的一員,主要是由單核巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。同時(shí),多種腫瘤細(xì)胞(肺癌細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞瘤、乳腺癌和結(jié)腸癌等)[1]也均可檢測(cè)到其表達(dá)。TNF-α是炎癥反應(yīng)中出現(xiàn)最早、最重要的炎性遞質(zhì)之一,與其受

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本文編號(hào)：1203238