本文關(guān)鍵詞：衰老導(dǎo)致女性面部皮下脂肪萎縮分子機理初探

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【摘要】：皮下脂肪組織位于真皮層和筋膜層之間,與內(nèi)臟脂肪組織和骨髓黃色脂肪組織共同構(gòu)成人體脂肪組織,其中皮下脂肪所占比例高達2/3。當(dāng)人體從青年階段進入老年階段后,皮下脂肪貯存逐漸減少,同時彈力纖維與膠原纖維結(jié)構(gòu)改變使得皮膚彈性和張力都變?nèi)?最終導(dǎo)致中老年人皮膚產(chǎn)生下垂和凹陷皺紋。中老年人面部衰老主要是由于面部皮下脂肪組織層嚴重萎縮而導(dǎo)致面部組織坍陷的表觀現(xiàn)象。前人對于面部研究主要集中于表觀現(xiàn)象及組織結(jié)構(gòu)變化的研究,但對于面部主要組成皮下脂肪層減少的機理研究甚少。本研究主要通過揭示女性衰老過程中面部皮下脂肪組織萎縮的調(diào)控機理以及該部位脂肪源干細胞的增殖分化能力的變化,從而為進一步了解衰老對女性面部影響并對開發(fā)研究相應(yīng)抗衰老藥物奠定基礎(chǔ)。本研究獲得的主要結(jié)果如下:1、通過對女性面部皮下脂肪組織石蠟切片和HE染色,觀察細胞形態(tài)并統(tǒng)計相同視野面積中包含的脂肪細胞數(shù)目發(fā)現(xiàn),年輕組脂肪細胞顯著大于年老組脂肪細胞;且年輕組含細胞數(shù)顯著比年老組少(P0.01)。實驗結(jié)果表明:衰老導(dǎo)致女性面部皮下脂肪細胞變小。2、檢測不同個體(年輕組和年老組)脂肪細胞內(nèi)調(diào)控脂滴分解的相關(guān)因子(PERILIPIN、ATGL、HSL)的表達差異。通過qRT-PCR實驗結(jié)果表明,年輕組PERILIPIN、ATGL的m RNA表達量極其顯著高于年老組(P0.001);雖然年老組面部皮下脂肪組織中HSL mRNA表達量有下降趨勢,但差異并不顯著(P=0.4238);Western Blot結(jié)果也表明,PERILIPIN、ATGL蛋白表達量在年輕組中都顯著高于年老組(P0.05)。qRT-PCR和Western Blot實驗結(jié)果表明:衰老導(dǎo)致皮下脂肪細胞內(nèi)脂滴的降解速率下降。3、檢測不同個體(年輕組和老年組)脂肪細胞內(nèi)調(diào)控線粒體生成及代謝相關(guān)因子(PGC-1α、COXIV)的表達差異。qRT-PCR結(jié)果顯示,在年老組內(nèi),PGC-1α和COXIV的mRNA表達都顯著下降(P0.05)。Western Blot實驗發(fā)現(xiàn)年老組PGC-1α蛋白表達量顯著低于年輕組(P0.05)。qRT-PCR和Western Blot實驗結(jié)果表明:衰老導(dǎo)致皮下脂肪細胞內(nèi)線粒體生成及代謝速率下降。4、通過EdU染色檢測衰老對女性面部皮下脂肪組織來源的脂肪源干細胞增殖的影響。結(jié)果顯示,相年老組比年輕組原代脂肪細胞EdU陽性率顯著下降(P0.05),實驗結(jié)果表明:衰老導(dǎo)致女性皮下脂肪源干細胞克隆增殖能力下降。5、通過對分化后的不同個體(年輕組和年老組)脂肪源干細胞進行油紅O染色,確定衰老對脂肪源干細胞成脂能力的影響。成脂誘導(dǎo)分化2d后,脂滴的沉積很微量,幾乎無法觀察得到;成脂誘導(dǎo)分化5d后,年老組與年輕組已經(jīng)可以觀察得到脂滴沉積差異,年輕組要顯著高于年老組(P0.05);當(dāng)成脂誘導(dǎo)分化8d、10d后,年輕組仍然顯著高于年老組(P0.05);油紅O染色結(jié)果表明:衰老導(dǎo)致人脂肪源干細胞的誘導(dǎo)分化后脂滴沉積能力下降。6、qRT-PCR檢測不同個體(年輕組和年老組)脂肪源干細胞成脂誘導(dǎo)分化0d、2d、5d、8d、10d后脂肪細胞分化相關(guān)調(diào)節(jié)基因PPARG、LPL、AP2、ADIPOQ的m RNA表達量。試驗結(jié)果顯示,同一個體脂肪源干細胞在成脂分化過程中,PPARG、LPL、AP2、ADIPOQ的mRNA表達量在前期都極顯著升高(P0.01),但PPARG和LPL的mRNA到分化后期表達量有所下降;而不同個體(年輕組和老年組)脂肪源干細胞成脂分化相同天數(shù)時,在誘導(dǎo)分化前期,年輕組脂肪源干細胞的PPARG、LPL、AP2、ADIPOQ mRNA的表達量顯著或極顯著高于年老組(P0.05或P0.01);但在分化后期,年輕組與年老組的成脂分化相關(guān)調(diào)節(jié)基因PPARG、LPL、AP2、ADIPOQ的mRNA表達量之間的差異在逐漸縮短,甚至LPL、ADIPOQ的mRNA表達量在兩組間無差異。試驗結(jié)果表明:衰老導(dǎo)致脂肪源干細胞內(nèi)調(diào)控成脂分化因子的表達下降,從而降低成脂分化能力。
【學(xué)位授予單位】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R339.38

【參考文獻】

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本文編號：1195913