本文關(guān)鍵詞：硫代磷酸酯類殺蟲劑ScFv抗體庫(kù)的構(gòu)建與初步篩選

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【摘要】：旨在構(gòu)建硫代磷酸酯類殺蟲劑單鏈抗體(ScFv)庫(kù),并對(duì)其進(jìn)行初步篩選。采用RT-PCR法從牛血清蛋白(BSA)人工抗原免疫的Balb/C小鼠脾細(xì)胞中克隆出VH和VL基因,通過重疊延伸PCR方法將VH和VL基因拼接在一起,構(gòu)建ScFv基因,與表達(dá)載體pCANTAB 5E連接后,在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá)。采用親和富集法,經(jīng)6輪淘篩后用酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)測(cè)定其活性。得到滴度為2.2×106 pfu/mL噬菌體庫(kù),ELISA檢測(cè)呈陽性。說明成功表達(dá)并篩選得到鼠源抗硫代磷酸酯類殺蟲劑ScFv抗體庫(kù)。
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學(xué)農(nóng)藥研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30900995) 陜西省科技研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2011K02-07)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 硫代磷酸酯類殺蟲劑作為一類有機(jī)磷類殺蟲劑(Ops),是一種重要的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料,在防治害蟲和增加糧食產(chǎn)量方面發(fā)揮了極大的作用,但由于其大量使用造成的環(huán)境問題也越來越受到人們的關(guān)注[1]。傳統(tǒng)的儀器檢測(cè)樣品前處理耗時(shí)長(zhǎng)、操作水平要求高、操作儀器價(jià)格昂貴,難以實(shí)現(xiàn)大批量樣

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本文編號(hào)：1190637