本文關(guān)鍵詞：人腫瘤壞死因子受體-Fc融合蛋白的表達及生物活性分析

  更多相關(guān)文章： hTNFR-Fc 重組腺相關(guān)病毒載體 表達 活性

【摘要】：目的構(gòu)建攜帶人腫瘤壞死因子受體(TNFR)胞外區(qū)融合人IgG Fc片段的重組腺相關(guān)病毒載體(pAAV/hTNFR-Fc),并對融合蛋白hTNFR-Fc的表達和生物學(xué)活性進行鑒定。方法構(gòu)建hTNFR-Fc融合基因重組腺相關(guān)病毒(AAV)載體,體外轉(zhuǎn)染人胚腎HEK293T細胞,收集轉(zhuǎn)染上清,以Western blot法檢測目的蛋白的表達,應(yīng)用L929細胞測定重組表達產(chǎn)物對人和大鼠TNF-α細胞毒中和活性,采用ELISA比較重組表達產(chǎn)物對人和大鼠TNF-α的結(jié)合活性。結(jié)果成功構(gòu)建重組表達載體pAAV/hTNFR-Fc,在轉(zhuǎn)染細胞上清中檢測到目的蛋白hTNFR-Fc的表達,重組表達產(chǎn)物可有效結(jié)合人TNF-α并中和其L929細胞毒活性,并對大鼠TNF-α具有一定程度的結(jié)合和中和活性。結(jié)論成功構(gòu)建了hTNFR-Fc融合基因,驗證了其在AAV載體上的分泌性表達,并對其生物活性進行了鑒定,為進一步病毒包裝和大鼠關(guān)節(jié)炎動物實驗研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究室;
【基金】：北京市自然科學(xué)基金資助項目(7132145)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： 類風濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎為主要病理特征的慢性自身免疫病,多種促炎因素導(dǎo)致關(guān)節(jié)滑膜組織異常增生,并可造成關(guān)節(jié)軟骨和骨的破壞[1-2]。在RA發(fā)病機制中,腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)被認為是最重要的促炎細胞因子之一,可

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 張巍;王芳;王博;張瑾;張曉郡;閻瑾琦;徐元基;王啟宇;于繼云;;佐劑誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎大鼠模型的建立及成纖維樣滑膜細胞的分離[J];中國實驗動物學(xué)報;2012年06期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王芳;杜芝燕;王琳;姜云波;于繼云;閻瑾琦;徐元基;張巍;;大鼠TNFR-Fc重組腺相關(guān)病毒載體的構(gòu)建、表達及中和活性鑒定[J];免疫學(xué)雜志;2013年11期

2 王芳;杜芝燕;于繼云;朱靜瀠;張巍;;共表達2個獨立的抗關(guān)節(jié)炎分子TNFR-Fc和CTLA4-FasL重組表達系統(tǒng)的建立與鑒定[J];免疫學(xué)雜志;2014年01期

3 李萍;趙華昆;馬燕紅;;腫瘤壞死因子α拮抗劑對應(yīng)力屏蔽導(dǎo)致的跟腱攣縮形態(tài)學(xué)影響[J];中國組織工程研究;2013年50期

4 王敏智;荊生龍;何小鵑;呂誠;李靜;羅丹;呂愛平;;CIA大鼠足跖大小與關(guān)節(jié)積分關(guān)聯(lián)研究[J];中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志;2013年12期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王小軍;去細胞化的肝臟支架在細胞移植中的應(yīng)用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉元剛;劉樹滔;饒平凡;;類風濕性關(guān)節(jié)炎嚙齒動物模型的研究進展[J];中國實驗動物學(xué)報;2007年06期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張梅珍;袁洪;黃志軍;胡帆;;重組腺相關(guān)病毒載體在心血管疾病基因治療中的應(yīng)用(英文)[J];中南大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年02期

2 張平，，鮑依稀，康格非;癌基因及其表達產(chǎn)物──新一代腫瘤標志物[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1994年02期

3 丁建中;;乙型肝炎病毒基因及表達產(chǎn)物研究進展[J];湖北省衛(wèi)生職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1992年02期

4 方政,余新炳,劉彥文,羅樹紅;惡性瘧原蟲FCC1/HN株CSP抗原基因表達產(chǎn)物在小鼠體內(nèi)的免疫應(yīng)答研究[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;1999年06期

5 周琦;紀宗正;;重組腺相關(guān)病毒-NT4p53(C22)Ant對肝癌荷瘤小鼠的治療作用[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2007年09期

6 任松濤;姚維成;栗世方;郭磊;;抑制Notch-1基因表達的siRNA重組腺相關(guān)病毒載體的構(gòu)建及滴度測定[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展;2010年20期

7 王桂芳,施柯,楊丹榕,陳吉泉,修清玉,黎懷星,孫樹漢;表達ROG的重組腺相關(guān)病毒載體的構(gòu)建及高滴度病毒的制備[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2005年04期

8 廖濤;陳建平;王濤;劉明杰;張建國;;嗜肺軍團菌熱休克蛋白60基因在大腸桿菌中的表達[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2006年06期

9 李旭光;王家寧;楊仕林;肖斌;許三鵬;汪道文;;重組腺相關(guān)病毒介導(dǎo)血管緊張素Ⅱ受體1反義基因?qū)Ω啕}飲食誘導(dǎo)的高血壓大鼠血壓的影響[J];中國分子心臟病學(xué)雜志;2006年04期

10 蔡亮;楊秋林;伍和平;劉傳愛;王可耕;張愉快;;弓形蟲RH株膜蛋白P30的原核表達與鑒定[J];中國血吸蟲病防治雜志;2006年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 余子全;孫明;喻子牛;;蘇云金芽胞桿菌中殺線蟲晶體蛋白基因cry6A的負表達調(diào)控[A];第二屆中國青年學(xué)者微生物遺傳學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2006年

2 陳玉飛;祁克宗;彭開松;涂健;;雞β-防御素-8 cDNA的克隆及在畢赤酵母中的表達[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)病理學(xué)分會第十六次學(xué)術(shù)研討會、中國病理生理學(xué)會動物病理生理專業(yè)委員會第十五次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

3 張錦秀;晁生玉;史利軍;候紹華;李剛;;豬圓環(huán)病毒Ⅱ型修飾Cap蛋白基因的原核表達及純化[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜傳染病學(xué)分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學(xué)術(shù)研討會論文集（上冊）[C];2009年

4 廖富

本文編號：1186173