RNA恒溫擴增聯合熔解曲線分析鑒定胞內分枝桿菌的應用研究
發(fā)布時間:2017-11-13 10:13
本文關鍵詞:RNA恒溫擴增聯合熔解曲線分析鑒定胞內分枝桿菌的應用研究
【摘要】:目的建立RNA恒溫擴增聯合熔解曲線分析技術(RIARD-MCA)鑒定胞內分枝桿菌的方法,評估其應用效果。方法以胞內分枝桿菌的16SrRNA的特異序列為檢測靶標設計RNA探針和帶有T7啟動子的逆轉錄擴增引物,42℃恒溫擴增實時檢測后進行熔解曲線分析,對21種分枝桿菌標準株、5種非分枝桿菌和229株分枝桿菌臨床分離株進行鑒別檢測;同時以16SrRNA及hsp65基因PCR測序結果為金標準對照。結果 RIARD-MCA在21種分枝桿菌標準株及5種非分枝桿菌檢測中只有胞內分枝桿菌陽性,其他陰性,與測序結果一致;在分枝桿菌臨床分離株檢測中,鑒定胞內分枝桿菌63株,其余為非胞內分枝桿菌,PCR測序為胞內分枝桿菌63株,其余166株為非胞內分枝桿菌,其靈敏度為100%(63/63),特異度為100%(166/166)。結論 RIARD-MCA鑒定胞內分枝桿菌具有較高的靈敏度、特異度和準確性,且檢測快速,有望作為一種新的胞內分枝桿菌臨床分離株鑒定方法。
【作者單位】: 蘇州大學醫(yī)學部基礎醫(yī)學與生物科學學院;同濟大學附屬上海市肺科醫(yī)院/上海市結核病(肺)重點實驗室;
【基金】:國家十二五傳染病重大專項課題(No.2013ZX10003001-003)~~
【分類號】:R378
【正文快照】: 胞內分枝桿菌(Mycobacterium intracellulare)是鳥-胞內分枝桿菌復合群(Mycobacterium avium-intracellulare complex,MAC)中一類重要的病原菌亞種,可以導致人肺部、淋巴結、皮膚等多器官的感染,也可導致動物的感染和傳播[1-3],是一類重要的人獸共患病傳染源。胞內分枝桿菌與M,
本文編號:1180226
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