本文關(guān)鍵詞：RNA恒溫?cái)U(kuò)增聯(lián)合熔解曲線分析鑒定胞內(nèi)分枝桿菌的應(yīng)用研究

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【摘要】：目的建立RNA恒溫?cái)U(kuò)增聯(lián)合熔解曲線分析技術(shù)(RIARD-MCA)鑒定胞內(nèi)分枝桿菌的方法,評估其應(yīng)用效果。方法以胞內(nèi)分枝桿菌的16SrRNA的特異序列為檢測靶標(biāo)設(shè)計(jì)RNA探針和帶有T7啟動(dòng)子的逆轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增引物,42℃恒溫?cái)U(kuò)增實(shí)時(shí)檢測后進(jìn)行熔解曲線分析,對21種分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株、5種非分枝桿菌和229株分枝桿菌臨床分離株進(jìn)行鑒別檢測;同時(shí)以16SrRNA及hsp65基因PCR測序結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)對照。結(jié)果 RIARD-MCA在21種分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株及5種非分枝桿菌檢測中只有胞內(nèi)分枝桿菌陽性,其他陰性,與測序結(jié)果一致;在分枝桿菌臨床分離株檢測中,鑒定胞內(nèi)分枝桿菌63株,其余為非胞內(nèi)分枝桿菌,PCR測序?yàn)榘麅?nèi)分枝桿菌63株,其余166株為非胞內(nèi)分枝桿菌,其靈敏度為100%(63/63),特異度為100%(166/166)。結(jié)論 RIARD-MCA鑒定胞內(nèi)分枝桿菌具有較高的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確性,且檢測快速,有望作為一種新的胞內(nèi)分枝桿菌臨床分離株鑒定方法。
【作者單位】： 蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院;同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院/上海市結(jié)核病(肺)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家十二五傳染病重大專項(xiàng)課題(No.2013ZX10003001-003)~~
【分類號】：R378
【正文快照】： 胞內(nèi)分枝桿菌(Mycobacterium intracellulare)是鳥-胞內(nèi)分枝桿菌復(fù)合群(Mycobacterium avium-intracellulare complex,MAC)中一類重要的病原菌亞種,可以導(dǎo)致人肺部、淋巴結(jié)、皮膚等多器官的感染,也可導(dǎo)致動(dòng)物的感染和傳播[1-3],是一類重要的人獸共患病傳染源。胞內(nèi)分枝桿菌與M，

本文編號：1180226