發(fā)布時(shí)間：2017-11-11 09:34

  本文關(guān)鍵詞：VEGF經(jīng)PI3K-Akt-Bad通路降低凍存后EOCs凋亡率

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【摘要】：目的:探討血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)對(duì)低溫凍存內(nèi)皮生長暈細(xì)胞(EOCs)凋亡率的影響及其與PI3K-Akt-Bad信號(hào)通路的關(guān)系,研究VEGF降低低溫凍存EOCs凋亡率的可能機(jī)制。方法:采用密度梯度離心法分離人臍帶血中的單個(gè)核細(xì)胞,經(jīng)體外擴(kuò)增培養(yǎng)EOCs,用免疫細(xì)胞化學(xué)染色及熒光染色法鑒定細(xì)胞的內(nèi)皮特性。以擴(kuò)增后的第二代細(xì)胞為生物材料,將其分為W組(wortmannin干預(yù)24 h后凍存)、W+V組(wortmannin干預(yù)24 h后+50μg/L VEGF凍存)、BC組(空白對(duì)照組)、V組(50μg/L VEGF凍存),于-80℃凍存24 h后復(fù)蘇。用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)EOCs凋亡率,Western blot法檢測(cè)p-Akt、Bad、Caspase 3的表達(dá)量。結(jié)果:采用體外擴(kuò)增培養(yǎng)的EOCs具有多種內(nèi)皮細(xì)胞特性。低溫凍存會(huì)增加EOCs的凋亡率(為5.36%±0.27%),但50μg/L VEGF能夠降低低溫凍存和復(fù)蘇過程EOCs的凋亡率(為3.36%±0.27%,P0.05);經(jīng)wortmannin對(duì)PI3K特異性抑制后,VEGF對(duì)EOCs的保護(hù)作用減弱,細(xì)胞的凋亡率增加(為8.34%±0.57%,P0.05);加50μg/L VEGF的EOCs凍存細(xì)胞p-Akt表達(dá)升高而Bad和Caspase 3表達(dá)降低(均P0.05),經(jīng)wortmannin干預(yù)24 h后的EOCs凍存細(xì)胞p-Akt表達(dá)降低而Bad和Caspase 3表達(dá)升高(均P0.05)。結(jié)論:50μg/L VEGF能夠降低低溫凍存EOCs的凋亡率,其作用可能通過PI3K-Akt-Bad信號(hào)通路來實(shí)現(xiàn)。
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】：溫州市科技局科研基金資助項(xiàng)目(Y20110032)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 2014-07-10基金項(xiàng)目:作者簡介:內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是能夠分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞。目前研究證明人體內(nèi)至少存在兩種類型的內(nèi)皮前體細(xì)胞,分別為早期EPCs及晚期EPCs,后者又稱為內(nèi)皮生長暈細(xì)胞(endothelial outgrowth cells,EOCs)。它們不僅參

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1170836