大鼠心臟kir2.2、kir2.3通道重組質(zhì)粒構(gòu)建及真核表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2017-11-10 04:27
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【摘要】:目的構(gòu)建大鼠心臟kir2.2、kir2.3通道真核表達(dá)質(zhì)粒,并鑒定其在人胚胎腎細(xì)胞(HEK293)中的表達(dá)。方法提取大鼠心臟組織細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增kir2.2、kir2.3通道編碼基因,克隆至真核表達(dá)質(zhì)粒pEGFP-N1中,構(gòu)建重組質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞,應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗法定kir2.2、kir2.3通道電流。結(jié)果重組質(zhì)粒pEGFPN1-kir2.2及pEGFP-N1-kir2.3經(jīng)雙酶切和測(cè)序證實(shí)構(gòu)建正確,并在HEK293細(xì)胞中成功表達(dá),且記錄到相應(yīng)通道電流。結(jié)論成功構(gòu)建了大鼠心臟kir2.2、kir2.3通道真核表達(dá)質(zhì)粒,并在HEK293細(xì)胞中成功表達(dá)。
【作者單位】: 山西省兒童醫(yī)院;山西醫(yī)科大學(xué);北京體育大學(xué)社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31200864) 山西省衛(wèi)生廳科技攻關(guān)項(xiàng)目(2011055) 山西醫(yī)科大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新基金
【分類(lèi)號(hào)】:R346
【正文快照】: 內(nèi)向整流鉀電流(inward rectifier potassiumchannel,IKl)是心肌最主要的背景外向電流,參與靜息電位的維持和心肌動(dòng)作電位3期終末的復(fù)極,進(jìn)而調(diào)控心肌的興奮性和傳導(dǎo)性[1-2]。為此,國(guó)內(nèi)外眾多學(xué)者在抗心律失常藥物研究過(guò)程中將目光投向了IK1通道[1-3],IK1通道克隆細(xì)胞模型成為
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條
1 吳博威;劉清華;張莉;;心肌內(nèi)向整流鉀通道和心律失常[J];生理學(xué)報(bào);2012年06期
2 戴德哉;;抗心律失常藥物作用的新靶點(diǎn)[J];中國(guó)新藥雜志;2009年07期
3 周鳳云;潘楊濱;何志娟;毛偉平;李文秀;劉宣宣;徐,
本文編號(hào):1165088
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