低氧條件下誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞向血管內(nèi)皮前體細(xì)胞的分化
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【摘要】:背景:種子細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量是制約血管組織工程研究的重要瓶頸,而如何獲取干細(xì)胞源內(nèi)皮細(xì)胞是解決該瓶頸問題的關(guān)鍵。目的:探討添加血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子聯(lián)合低氧環(huán)境是否能夠協(xié)同高效誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞定向分化。方法:采用無血清培養(yǎng)基m Te SR汶1維持培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞H9。通過添加血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(50μg/L)聯(lián)合低氧條件(體積分?jǐn)?shù)為5%O2)誘導(dǎo)H9細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞分化。采用免疫熒光染色技術(shù)、定量RT-PCR以及低密度脂蛋白攝取實(shí)驗(yàn)對(duì)人胚胎干細(xì)胞源內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行表型和功能評(píng)價(jià)。結(jié)果與結(jié)論:添加血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子聯(lián)合低氧培養(yǎng)條件可促進(jìn)H9細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞方向分化。該胚胎干細(xì)胞源內(nèi)皮細(xì)胞不但高水平表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)志基因(kdr,pecam)和標(biāo)記蛋白D31,而且還能夠攝取低密度脂蛋白,形成類似微血管結(jié)構(gòu)。提示血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與低氧在誘導(dǎo)干細(xì)胞向內(nèi)皮細(xì)胞分化過程中存在協(xié)同效應(yīng),可高效獲得具有理想表型和功能活性的干細(xì)胞源內(nèi)皮細(xì)胞。
【作者單位】: 大連市中心醫(yī)院心血管內(nèi)科;大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院心血管內(nèi)科;
【基金】:遼寧省自然科學(xué)基金計(jì)劃資助(2013023005,2014023018)~~
【分類號(hào)】:R363
【正文快照】: 遼寧省大連市人,漢族,1997年錦州醫(yī)學(xué)院畢業(yè),碩士,副主任醫(yī)師,主要從事心律失常、冠心病及高血壓方面的研究。通訊作者:魏國峰,碩士,主任醫(yī)師,大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院心血管內(nèi)科,遼寧省大連市1160232014.45.008[http://www.crter.org](2014)45-07255-05稿件接受:2014-10-03X
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本文編號(hào):1161006
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