本文關(guān)鍵詞：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對K562細(xì)胞增殖影響的研究

  更多相關(guān)文章： 間充質(zhì)干細(xì)胞 外泌體 K562細(xì)胞 增殖 凋亡

【摘要】：目的:1、研究正常人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體對體外培養(yǎng)K562細(xì)胞增殖、凋亡的影響。2、研究正常人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體對K562細(xì)胞株經(jīng)典Wnt/β-catenin信號途徑活性的影響。方法:1、采用組織貼壁法從正常人臍帶中分離間充質(zhì)干細(xì)胞,傳代培養(yǎng)純化;2、收集P3-P6代培養(yǎng)上清,提取外泌體,透射電鏡觀察形態(tài),流式細(xì)胞術(shù)檢測其表面標(biāo)志,BCA法測定外泌體的蛋白量;3、外泌體與體外培養(yǎng)的K562細(xì)胞作用72h后,采用MTT比色法檢測K562細(xì)胞增殖變化,采用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測Annexin V-FITC/PI雙染的對照組及實驗組K562細(xì)胞的凋亡率;4、外泌體與體外培養(yǎng)的K562細(xì)胞作用72h后,Western blot檢測β-catenin蛋白在實驗組和對照組K562細(xì)胞中的表達情況;使用RT-PCR法檢測β-catenin m RNA表達情況。結(jié)果:1、成功分離培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞。2、分離獲得臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體,電鏡觀察外泌體呈碟狀。3、MTT結(jié)果顯示,人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體對K562細(xì)胞的增殖有抑制作用;流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示,實驗組K562細(xì)胞凋亡率為(12.03±1.2)%,與對照組(1.207±0.09)%相比,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。4、RT-PCR結(jié)果顯示,實驗組β-catenin m RNA的相對表達量為(18.33±0.6566)%,與對照組(24.33±0.4910)%相比明顯降低差異有統(tǒng)計學(xué)意義;Western blot結(jié)果顯示,實驗組β-catenin蛋白的相對表達量為(34.23±1.841)%,與對照組(64.00±2.676)%相比明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:1、人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體能抑制K562細(xì)胞的增殖能力,并促進其凋亡;2、人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體可下調(diào)K562細(xì)胞Wnt/β-catenin經(jīng)典途徑的活性。
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R329.2

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本文編號：1154112