本文關(guān)鍵詞：過(guò)表達(dá)Claudin-5增強(qiáng)體外培養(yǎng)的人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞屏障功能

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【摘要】：【目的】探討過(guò)表達(dá)Claudin-5后對(duì)視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞屏障功能的影響�！痉椒ā矿w外原代培養(yǎng)人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞(hRVEC)。當(dāng)接種至transwell膜的P2~P5代hRVEC近60%融合時(shí)進(jìn)行慢病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。hRVEC分為對(duì)照組,慢病毒空載體組,慢病毒介導(dǎo)的Claudin-5高表達(dá)轉(zhuǎn)染組。熒光活細(xì)胞動(dòng)態(tài)顯微鏡觀察慢病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染效率。Western Blot檢測(cè)各組細(xì)胞中Claudin-5表達(dá)水平。CCK8法檢測(cè)病毒轉(zhuǎn)染對(duì)細(xì)胞的毒性。待接種至transwell膜的hRVEC培養(yǎng)2周后建立穩(wěn)定的單層人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞屏障模型后,電阻儀檢測(cè)hRVEC屏障的跨內(nèi)皮電阻(TER),異硫氰酸熒光素右旋糖酐檢測(cè)hRVEC屏障的通透性。【結(jié)果】慢病毒可以介導(dǎo)Claudin-5在hRVEC高表達(dá),其轉(zhuǎn)染率達(dá)60%,Western Blot檢測(cè)證實(shí)Claudin-5蛋白表達(dá)顯著增加。CCK8檢測(cè)表明慢病毒轉(zhuǎn)染不影響細(xì)胞的活性,對(duì)細(xì)胞毒性小;過(guò)表達(dá)Claudin-5后也不影響hRVEC的增殖;過(guò)表達(dá)Claudin-5后能降低體外單層人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞屏障模型的通透性,并提高其TER。【結(jié)論】過(guò)表達(dá)Claudin-5后可以顯著提高體外人視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞屏障的功能,這為視網(wǎng)膜血管性疾病的治療提供新思路。
【作者單位】： 中山大學(xué)中山眼科中心//眼科學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(30872819,81170864) 教育部新世紀(jì)優(yōu)秀人才支持計(jì)劃(NCET-09-0809) 中山大學(xué)青年教師培育項(xiàng)目(10ykpy27)
【分類(lèi)號(hào)】：R346
【正文快照】： 隨著對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變、黃斑水腫、早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變、視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞等世界范圍內(nèi)主要的致盲眼病發(fā)病機(jī)制的深入研究,各種因素如氧化應(yīng)激、缺氧、炎癥導(dǎo)致的血-視網(wǎng)膜內(nèi)屏障(inner blood-retinal barrier,iBRB)的緊密連接(tight junction,TJ)的破壞被認(rèn)為是引起這類(lèi)視

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 周媛;崔浩;劉洪濤;張麗瓊;;糖尿病對(duì)血-視網(wǎng)膜屏障超微結(jié)構(gòu)影響的研究進(jìn)展[J];國(guó)際眼科雜志;2014年07期

2 梁海恬;何士剛;;小鼠視網(wǎng)膜膽堿能無(wú)長(zhǎng)突細(xì)胞出生后的密度分析[J];南開(kāi)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2009年01期

3 馬毅;桂巖;王有虎;席克虎;陳小婉;張福宏;馬春霞;洪浩;劉翔毅;江英;董明;楊貴軍;張小兵;;18β-甘草次酸對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞緊密連接的影響[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2014年20期

4 ;The Notch signaling pathway in retinal dysplasia and retina vascular homeostasis[J];遺傳學(xué)報(bào);2010年09期

5 解瑩明;許慶彪;吳躍明;劉建新;;反芻動(dòng)物胃腸道對(duì)小肽吸收的研究進(jìn)展[J];中國(guó)畜牧雜志;2013年21期

6 王行富;張聲;鄭珂;陳虹;陳林鶯;陳余朋;;CLDN18表達(dá)在胃癌進(jìn)展中的意義[J];中國(guó)腫瘤臨床;2011年11期

7 周曼;楊萬(wàn)超;劉翔;于淼;李文志;;血腦屏障結(jié)構(gòu)功能及體外模型的研究進(jìn)展[J];疑難病雜志;2014年06期

8 鄧雯麗;向萍;金子兵;;多能干細(xì)胞分化來(lái)源視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞移植治療視網(wǎng)膜變性研究進(jìn)展[J];中華細(xì)胞與干細(xì)胞雜志(電子版);2014年02期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 秦秀虹;Notch信號(hào)途徑對(duì)高糖條件下NF-κB和PARP介導(dǎo)的視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用[D];吉林大學(xué);2011年

2 謝涵;Netrin-1基因?qū)μケP(pán)血管生成作用的體內(nèi)、外研究[D];華中科技大學(xué);2011年

3 楊寶林;NO/NOS在側(cè)支血管生長(zhǎng)中對(duì)血管VE-cadherin表達(dá)及通透性的影響[D];中南大學(xué);2013年

4 魏蓉;針對(duì)MEKK3在血管生成中所起到的調(diào)控作用的相關(guān)機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2013年

5 黃萍;PI3K/Akt信號(hào)通路參與鉛損傷血—視網(wǎng)膜屏障的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 饒淵;日糧棉粕水平對(duì)雞腸道屏障功能體系的影響[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

2 王敏;緊密連接蛋白CLDN6對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞SW1116惡性表型的抑制作用[D];吉林大學(xué);2014年

3 馬毅;18β-甘草次酸對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜上皮細(xì)胞緊密連接及正常大鼠血糖、血脂的影響[D];蘭州大學(xué);2014年

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 林芳珊;;人體八大屏障功能趣談[J];健康生活;2007年06期

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本文編號(hào)：1150994