本文關(guān)鍵詞：活細(xì)胞成像技術(shù)實(shí)時(shí)追蹤熒光蛋白標(biāo)記的分枝桿菌的胞內(nèi)增殖

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【摘要】：目的利用綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)標(biāo)記和活細(xì)胞顯微成像的方法,實(shí)時(shí)追蹤分枝桿菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)的增殖過(guò)程。方法用經(jīng)GFP標(biāo)記的野生型海分枝桿菌(Mycobacterium marlrlum,Mm)分別侵染未激活和γ-干擾素激活的巨噬細(xì)胞,使用活細(xì)胞顯微成像系統(tǒng)連續(xù)記錄胞內(nèi)分枝桿菌的增殖動(dòng)態(tài),同時(shí)優(yōu)化不同細(xì)胞接種濃度和感染復(fù)數(shù)(multiplicity of infection,MOI)對(duì)胞內(nèi)菌增殖動(dòng)態(tài)的追蹤效果。結(jié)果使用GFP標(biāo)記和活細(xì)胞成像的方法可以實(shí)時(shí)追蹤胞內(nèi)分枝桿菌的增殖過(guò)程和形態(tài)學(xué)變化。γ-干擾素對(duì)Mm在巨噬細(xì)胞中的增殖有抑制作用。當(dāng)接種巨噬細(xì)胞濃度為1×10~5/孔,MOI為1時(shí),可直觀清晰地分析實(shí)時(shí)追蹤圖像中胞內(nèi)菌的增殖過(guò)程。結(jié)論通過(guò)活細(xì)胞成像技術(shù)分析熒光蛋白標(biāo)記的分枝桿菌.可實(shí)時(shí)追蹤巨噬細(xì)胞內(nèi)分枝桿菌增殖過(guò)程和形態(tài)學(xué)變化,是一種體外分析胞內(nèi)分枝桿菌增殖的理想方法,可應(yīng)用于其他相關(guān)病原菌和宿主相互作用及影響因素的研究。
【作者單位】： 復(fù)旦大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院教育部/衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)分子病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;北京東勝創(chuàng)新生物科技有限公司分子影像部;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目(81201256) supported by the Youth Program of National Natural Science Foundation of China(81201256)
【分類(lèi)號(hào)】：R378.91
【正文快照】： 分枝桿菌屬是一類(lèi)細(xì)長(zhǎng)略彎的桿菌,其分裂方 殖動(dòng)態(tài)追蹤效果的影響。式為分枝狀二分裂,由于分枝桿菌復(fù)雜的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和基因功能研究方法的匱乏,對(duì)其致病機(jī)制的研 材料和方法究進(jìn)展相對(duì)緩慢1“1—2]。海分枝桿菌(Mycobacteriummarinum,Mm)與結(jié)核分枝桿菌遺傳背景極為相 菌株與

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 俞索靜;肖魯偉;吳承亮;童培建;;破骨細(xì)胞血系起源的活細(xì)胞成像觀察[J];中國(guó)骨傷;2012年04期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 于翔;陸佳嘉;王秦;于曉Y，

本文編號(hào)：1144812