本文關(guān)鍵詞：人IL-37在大腸桿菌表達(dá)及多克隆抗體的制備與鑒定

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【摘要】：目的原核表達(dá)白細(xì)胞介素37(IL-37)及制備其多克隆抗體。方法 PCR擴(kuò)增IL-37b成熟肽編碼區(qū)基因,克隆至表達(dá)載體pET28a,轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞,IPTG誘導(dǎo)表達(dá),Ni2+-NTA瓊脂糖凝膠柱親和層析純化重組蛋白,以純化的重組蛋白IL-37為免疫原免疫BALB/c小鼠制備其特異性抗體,用ELISA、Western blot法和免疫組織化學(xué)染色檢測抗體的效價和特異性。結(jié)果原核表達(dá)了重組蛋白IL-37b成熟肽,并獲得高效價的小鼠抗IL-37抗體,能特異性識別天然的IL-37抗原。結(jié)論成功制備效價高、特異性好的小鼠抗IL-37抗體。
【作者單位】： 廣東醫(yī)學(xué)院廣東省醫(yī)學(xué)分子診斷重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;廣東醫(yī)學(xué)院臨床免疫學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 白細(xì)胞介素 表達(dá) 抗體 制備 小鼠
【基金】：廣東省自然科學(xué)基金(S2012040006383) 廣東省大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練計劃(1057113038)
【分類號】：R392.1
【正文快照】： 2000年Kumar等[1]經(jīng)序列分析鑒定出白細(xì)胞介素1(interleukin-1,IL-1)家族存在一個新成員,其后認(rèn)定為IL-1家族第7個成員[2],但對其具有的生物學(xué)功能則不知曉。直到2010年Nold等[3]研究發(fā)現(xiàn)它對炎癥反應(yīng)和固有免疫具有明顯的抑制作用,并命名為IL-37。IL-37是一個新型的抗炎細(xì)胞

【參考文獻(xiàn)】

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1 何玲鴿;趙付前;林妙芬;�；輾J;王森;陳章權(quán);;IL-37b基因克隆及其真核的表達(dá)載體構(gòu)建[J];山東醫(yī)藥;2013年39期

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【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李寧;徐黎明;李天鶴;任桂萍;陳睿;張宇;闞方明;葉賢龍;谷學(xué)佳;丁良君;李德山;;具有中和活性的抗人IL-1β單鏈抗體的構(gòu)建[J];免疫學(xué)雜志;2011年07期

2 劉生偉;任桂萍;傅俊華;劉銘瑤;李寧;郝建權(quán);李德山;;利用SUMO系統(tǒng)高效可溶性表達(dá)重組人TNF-α[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年05期

3 李天鶴;任桂萍;徐黎明;周兵;郭茉;齊劍英;張宇;趙景壯;于引航;尹杰超;李德山;;抗人IL-1β單鏈抗體的構(gòu)建及其中和活性的檢測[J];中國免疫學(xué)雜志;2013年03期

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1 石穎;噴鼻流感三價裂解疫苗的制備和免疫效果的初步研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2012年

2 賀生芳;Intein介導(dǎo)的納米抗體在大腸桿菌中的可溶性表達(dá)與純化[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2013年

【二級參考文獻(xiàn)】

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1 柯慶喜;張志偉;趙付前;何玲鴿;陳章權(quán);;腫瘤壞死因子-α對人滑膜成纖維細(xì)胞白細(xì)胞介素-37表達(dá)的影響[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2013年05期

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3 鄧存良;黃捷;陳文;王明勇;陳楓;;IL-1受體拮抗劑對大鼠肝星狀細(xì)胞Ⅰ、Ⅲ型膠原及TIMP-1 mRNA表達(dá)的影響[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2008年06期

【相似文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 任澤鵬;IL-37對THP-1源巨噬細(xì)胞泡沫化的影響[D];華中科技大學(xué);2013年

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本文編號：1123590