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5型腺病毒載體對人T淋巴細胞的轉染及細胞毒性分析

發(fā)布時間:2017-10-29 18:24

  本文關鍵詞:5型腺病毒載體對人T淋巴細胞的轉染及細胞毒性分析


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【摘要】:目的:利用5型腺病毒載體轉染人T淋巴細胞,對其轉染T淋巴細胞的效率以及細胞毒性進行分析。方法:選取T淋巴瘤Jurkat細胞及原代T細胞,腺病毒按感染復數(multiplicity of infection,MOI)為20、50、100、200和400對其轉染,轉染48 h后利用流式細胞術檢測轉染效率;選取腺病毒轉染后的不同時點,利用碘化丙啶染色法分析轉染對于細胞周期的影響;利用Annexin V/7-AAD染色法分析轉染誘導細胞凋亡情況;利用臺盼藍染色計數法分析轉染對活細胞數目的影響。結果:5型腺病毒載體轉染T淋巴瘤的效率最高,轉染效率隨著MOI值的增大而增加;CD8+T細胞和CD4+T細胞的轉染效率大致相同,T細胞經刺激活化后,CD8+T細胞的轉染效率下降;病毒轉染未導致明顯細胞凋亡;病毒轉染對細胞周期與活細胞數目沒有顯著影響。結論:5型腺病毒載體轉染T細胞呈現較低細胞毒性。
【作者單位】: 廣東藥學院生命科學與生物制藥學院;廣東藥學院廣東省生物技術候選藥物研究重點實驗室;永州職業(yè)技術學院基礎醫(yī)學部;
【關鍵詞】腺病毒載體 T淋巴細胞 細胞毒性
【基金】:科技部“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項“十一五”計劃項目(No.2009ZX09103-708) 國家自然科學基金資助項目(No.31100664;No.31300737;No.81303292) 東莞市科技計劃項目(No.2011105102027)
【分類號】:R393
【正文快照】: T細胞通過膜表面的T細胞受體(T-cell recep-tor,TCR)發(fā)揮抗原識別作用[1-2]。利用抗原特異性TCR基因修飾T細胞進行過繼性移植/回輸,在抑制腫瘤生長、控制病毒感染等方面具有良好的前景[3-4]。腺病毒載體因具有能感染增殖和非增殖細胞、無插入致突變性、能同時表達多個外源基

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