本文關(guān)鍵詞：抗人CA15-3單克隆抗體的制備、鑒定及化學(xué)發(fā)光檢測(cè)體系的建立

  更多相關(guān)文章： 腫瘤標(biāo)志物 糖抗原CA- 單克隆抗體 化學(xué)發(fā)光免疫分析

【摘要】：目的獲得抗人CA15-3單克隆抗體(mAb),建立CA15-3雙抗體夾心化學(xué)發(fā)光檢測(cè)體系。方法人CA15-3糖抗原免疫小鼠后,通過細(xì)胞融合,篩選到陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)后,純化獲得抗CA15-3的mAb。對(duì)抗體進(jìn)行純度、效價(jià)、表位和亞型的鑒定并建立雙抗體夾心檢測(cè)CA15-3化學(xué)發(fā)光體系,對(duì)該體系進(jìn)行準(zhǔn)確度、最低檢測(cè)限、線性、重復(fù)性與特異性評(píng)估。結(jié)果獲得5株陽(yáng)性信號(hào)較強(qiáng)的雜交瘤細(xì)胞(分別為#3-1-3#5-2-2、#11-2-2、#12-1-3和#16-1-3)。其分泌的抗體效價(jià)均大于10-8g/mL,輕鏈均為κ鏈,重鏈#3-1-3為IgG2a、#5-2-2與#12-1-3為IgG2b、#11-2-2與#16-1-3為IgG3。雙抗體夾心體系在(0~300)U/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,其準(zhǔn)確度的回收率為97.45%;最低檢測(cè)限為0.59 U/mL;線性相關(guān)系數(shù)為0.9978;低高值的變異系數(shù)(CV)均小于10%;與腫瘤標(biāo)志物AFP、CEA、CA50、CA19-9和CA72-4均不交叉。結(jié)論成功制備了抗人CA15-3 mAb,建立了雙抗體夾心檢測(cè)CA15-3化學(xué)發(fā)光體系。
【作者單位】： 東北林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;大慶麥伯康生物技術(shù)有限公司;東北林業(yè)大學(xué)大慶生物技術(shù)研究院;
【關(guān)鍵詞】： 腫瘤標(biāo)志物 糖抗原CA- 單克隆抗體 化學(xué)發(fā)光免疫分析
【基金】：黑龍江省發(fā)展高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)專項(xiàng)資金(FW11C201) 黑龍江省應(yīng)用技術(shù)研究與開發(fā)計(jì)劃(GC13C122)
【分類號(hào)】：R392.11
【正文快照】： CA15-3是一種相對(duì)分子質(zhì)量(Mr)約為40萬的糖蛋白。1984年,Hilkens等[1]從人乳脂肪球膜上糖蛋白MAM-6制成小鼠單克隆抗體(mAb,115-DB);同年Kufu等[2]自肝轉(zhuǎn)移乳腺癌細(xì)胞膜制成mAb(DF-3),這兩種mAb均可識(shí)別同一種糖抗原物質(zhì),遂將這種抗原命名為CA15-3。在正常情況下,CA15-3主要

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 裴世春;何娜;張立軍;陸梅生;;應(yīng)用HTS-ELISA篩選方法制備抗黃曲霉毒素M1單抗[J];微生物學(xué)報(bào);2010年10期

2 張曉磊;聶玉哲;藍(lán)興國(guó);李玉花;;抗人Apo B_(100)單克隆抗體的制備及夾心ELISA檢測(cè)方法的建立[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2012年07期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 孫興榮;裴世春;柳家鵬;王瑩;;抗黃曲霉毒素M1免疫親和柱的制備[J];現(xiàn)代食品科技;2011年03期

2 邵軍;潘翠萍;馬彪;;血清CA15-3水平與轉(zhuǎn)移性乳腺癌不同分子亞型的相關(guān)性分析[J];腫瘤;2012年08期

3 丁金旺;羅定存;葉柳青;王克義;周美琪;張臥;蔡菊芳;謝樂斯;;血清TBX3、CA15-3及CEA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)乳腺癌的診斷價(jià)值[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2013年04期

4 康華峰;代志軍;馬小斌;包興;林帥;劉小旭;王西京;;乳腺癌術(shù)后患者附件區(qū)腫塊的診斷和治療[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年08期

5 楊靜;;聯(lián)合檢測(cè)CA15-3和Cullin1對(duì)乳腺癌臨床診斷價(jià)值的探討[J];中國(guó)婦幼保健;2013年32期

6 馮s，

本文編號(hào)：1091744