本文關鍵詞：抗人CA15-3單克隆抗體的制備、鑒定及化學發(fā)光檢測體系的建立

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【摘要】：目的獲得抗人CA15-3單克隆抗體(mAb),建立CA15-3雙抗體夾心化學發(fā)光檢測體系。方法人CA15-3糖抗原免疫小鼠后,通過細胞融合,篩選到陽性雜交瘤細胞。雜交瘤細胞擴大培養(yǎng)后,純化獲得抗CA15-3的mAb。對抗體進行純度、效價、表位和亞型的鑒定并建立雙抗體夾心檢測CA15-3化學發(fā)光體系,對該體系進行準確度、最低檢測限、線性、重復性與特異性評估。結(jié)果獲得5株陽性信號較強的雜交瘤細胞(分別為#3-1-3#5-2-2、#11-2-2、#12-1-3和#16-1-3)。其分泌的抗體效價均大于10-8g/mL,輕鏈均為κ鏈,重鏈#3-1-3為IgG2a、#5-2-2與#12-1-3為IgG2b、#11-2-2與#16-1-3為IgG3。雙抗體夾心體系在(0~300)U/mL范圍內(nèi)線性關系良好,其準確度的回收率為97.45%;最低檢測限為0.59 U/mL;線性相關系數(shù)為0.9978;低高值的變異系數(shù)(CV)均小于10%;與腫瘤標志物AFP、CEA、CA50、CA19-9和CA72-4均不交叉。結(jié)論成功制備了抗人CA15-3 mAb,建立了雙抗體夾心檢測CA15-3化學發(fā)光體系。
【作者單位】： 東北林業(yè)大學生命科學學院;大慶麥伯康生物技術有限公司;東北林業(yè)大學大慶生物技術研究院;
【關鍵詞】： 腫瘤標志物 糖抗原CA- 單克隆抗體 化學發(fā)光免疫分析
【基金】：黑龍江省發(fā)展高新技術產(chǎn)業(yè)專項資金(FW11C201) 黑龍江省應用技術研究與開發(fā)計劃(GC13C122)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： CA15-3是一種相對分子質(zhì)量(Mr)約為40萬的糖蛋白。1984年,Hilkens等[1]從人乳脂肪球膜上糖蛋白MAM-6制成小鼠單克隆抗體(mAb,115-DB);同年Kufu等[2]自肝轉(zhuǎn)移乳腺癌細胞膜制成mAb(DF-3),這兩種mAb均可識別同一種糖抗原物質(zhì),遂將這種抗原命名為CA15-3。在正常情況下,CA15-3主要

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【共引文獻】

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6 馮s，

本文編號：1091744