本文關(guān)鍵詞：人與鼠源內(nèi)皮抑制素不同標(biāo)簽重組蛋白的表達純化及活性分析

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【摘要】：根據(jù)文獻報道和NCBI數(shù)據(jù)庫確定人源內(nèi)皮抑制素(HE)和鼠源內(nèi)皮抑制素(ME)DNA序列,以DNA合成法分別獲得長度為554 bp的人源內(nèi)和長度為565 bp的鼠源內(nèi)皮抑素基因;分別構(gòu)建攜帶谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(GST)表達標(biāo)簽的原核表達質(zhì)粒pGEX-4T1-HE和攜帶硫氧還蛋白A(TrxA)表達標(biāo)簽的原核表達質(zhì)粒pET-32a-ME,在大腸桿菌BL21(DE3)中誘導(dǎo)表達,獲得不同表達標(biāo)簽的HE、ME重組蛋白.最后通過雞胚絨毛尿囊膜(CAM)試驗驗證重組蛋白的抗血管生成活性.結(jié)果表明,構(gòu)建了人與鼠源內(nèi)皮抑制素基因不同標(biāo)簽表達載體,在大腸桿菌中成功誘導(dǎo)表達.獲得具有活性的人與鼠源ES重組蛋白.純化復(fù)性后的重組蛋白能明顯抑制新生血管的生長.GST和TrxA標(biāo)簽對增進重組ES可溶表達沒有顯著差異,兩組標(biāo)簽的重組蛋白都主要存在于包涵體內(nèi).
【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學(xué)細胞生物學(xué)與遺傳學(xué)教研室;廣西壯族自治區(qū)腫瘤醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 內(nèi)皮抑素 DNA序列 重組蛋白 純化 雞胚絨毛尿囊膜試驗 誘導(dǎo)表達
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(編號:81260479) 廣西自然科學(xué)青年基金資助項目(編號:2013GXNSFBA019143)
【分類號】：R3416
【正文快照】： 1前言傳統(tǒng)的治療癌癥方法主要以手術(shù)和放、化療為主,在殺死癌細胞的同時也破壞了正常細胞,毒副作用大,停藥后易復(fù)發(fā),且對患者生活質(zhì)量造成很大影響.Folkman等[1]從小鼠內(nèi)皮細胞瘤中分離得到一種抑制腫瘤新生血管形成因子—內(nèi)皮抑素(Endostatin).內(nèi)皮抑素是膠原蛋白l8分子的C末

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3 周洲;吳移謀;劉R

本文編號：1084872