本文關鍵詞：截短弓形蟲表面抗原SAG2C的基因克隆、蛋白表達及其初步應用

  更多相關文章： 弓形蟲 表面抗原 克隆 蛋白表達 免疫反應性

【摘要】：目的克隆截短的弓形蟲表面抗原SAG2C基因,在大腸埃希菌中表達SAG2C蛋白,并探討其在弓形蟲病診斷中的應用。方法對已知的弓形蟲SAG2C基因序列進行部分取舍,用RT-PCR技術從弓形蟲Prugniaud(PRU)株的總RNA中擴增截短的SAG2基因片段,插入載體pET32a(+)中,轉化大腸埃希菌BL21,IPTG誘導表達,應用Western blot和ELISA檢測重組表達蛋白的免疫反應性。用重組SAG2C蛋白ELISA法檢測弓形蟲感染血清特異抗體,觀察初步應用效果。結果從弓形蟲PRU株總RNA中擴增出截短的SAG2C基因片段,成功構建了重組表達質粒pET32a(+)-tSAG2C;該重組質粒經IPTG誘導能表達可溶性大小為51ku的SAG2C蛋白。Western blot顯示重組SAG2C能被弓形蟲感染小鼠血清識別;以重組SAG2C蛋白、重組SAG1蛋白及BAG1蛋白ELISA檢測精神病患者血清弓形蟲抗體,陽性率分別為8.07%(23/285)、4.56%(13/285)和7.37%(21/285),差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論成功構建了重組質粒pET32a(+)-tSAG2C,表達的融合蛋白具有免疫反應性,具有用于弓形蟲感染診斷的潛在價值。
【作者單位】： 廣州市花都區(qū)人民醫(yī)院;南方醫(yī)科大學公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學學院病原生物學系;
【關鍵詞】： 弓形蟲 表面抗原 克隆 蛋白表達 免疫反應性
【基金】：國家自然科學基金項目(No.31030066)
【分類號】：R37
【正文快照】： 剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)是一種廣泛寄生于人和動物的原蟲,能引起人獸共患弓形蟲病。人群中弓形蟲抗體陽性者并不少見,但臨床病例相對較少,說明絕大多數(shù)弓形蟲感染均為包囊引起的隱性感染;當機體免疫功能下降或受抑制時,蟲體就會活化,迅速增生繁殖,破壞宿主細胞而引起多

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 丁潔瓊;吳q;譚峰;陳曉光;;弓形蟲速殖子與緩殖子體外轉化體系的建立[J];南方醫(yī)科大學學報;2010年04期

2 陳政雄,羅明強,高鎮(zhèn)松;弓形蟲感染的精神分裂癥陰陽性癥狀相關分析[J];廣東醫(yī)學;1997年02期

3 李秋英,蔣興海,羅小年;情感性精神障礙患者弓形蟲感染[J];臨床精神醫(yī)學雜志;2000年04期

4 王紹渠，許世鍔，，駱建民，陳靜卿，朱少毅，肖少雄，林勇強;應用ELISA和IHA法檢測精神分裂癥患者血清弓形蟲抗體[J];中國寄生蟲病防治雜志;1995年03期

5 張唯哲,趙敬坤,劉桂琴;弓形蟲感染與精神病之間關系的調查[J];中國寄生蟲病防治雜志;1998年04期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 李科榮;申麗潔;;特殊人群弓形蟲感染的研究進展[J];大理學院學報;2007年02期

2 羅明強;高鎮(zhèn)松;吳妙新;陳耿誼;陳政雄;肖攀攀;;弓形蟲感染精神分裂癥患者臨床及血液流變學觀察[J];中國熱帶醫(yī)學;2006年03期

3 陳秀春,李永華,劉錦華,楊春貴,肖愛芹,齊春花;泰安市七種疾病患者弓形蟲感染調查[J];泰山醫(yī)學院學報;2001年02期

4 盧致民,馬偉一,張進順,張華彪,劉金花,施萬平,唐宏煒,王兵科,徐向東;精神分裂癥患者弓形蟲感染狀況的研究[J];中國血吸蟲病防治雜志;2003年04期

5 盧耀娟;;弓形蟲在人體的感染及危害[J];醫(yī)學動物防制;2009年09期

6 盧麗丹;唐莉娜;徐莉娜;;精神病患者弓形蟲感染情況調查[J];醫(yī)學動物防制;2012年07期

7 李永華,陳秀春,劉錦華,楊春貴,齊春花;泰安地區(qū)7種疾病患者的弓形蟲感染調查[J];中國寄生蟲病防治雜志;2001年02期

8 孫慎俠,李雅杰,方芳;大連市精神病患者弓形蟲感染情況調查[J];中國寄生蟲病防治雜志;2005年02期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王瓊;弓形蟲緩殖子期特異性抗原的基因克隆、蛋白表達及重組BAG1抗原的初步應用[D];南方醫(yī)科大學;2007年

2 王言;弓形蟲在小鼠腦內動態(tài)分布及其感染與精神疾病相關性分析[D];吉林大學;2013年

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 金衛(wèi)東;張宗勝;臧德馨;;陰性癥狀和陽性癥狀在治療過程中的相互關系[J];上海精神醫(yī)學;1992年03期

2 馬秋暉;陸文濤;錢兆麟;黃國建;高蓉;居云龍;;精神分裂癥患者與正常健康人七項免疫功能的對照研究[J];臨床精神醫(yī)學雜志;1991年01期

3 程璐;陳曉光;吳q;楊培梁;;弓形蟲緩殖子期特異抗原SAG2C基因的克隆、鑒定與生物信息學分析[J];熱帶醫(yī)學雜志;2008年03期

4 魯春起;鄒明玉;孫玉華;王曉光;徐慶國;高永革;龐文生;耿貫一;;418例精神分裂癥患者血清弓形體抗體檢測及篩檢方法的探討[J];天津醫(yī)藥;1990年12期

5 王瓊;吳q;陳曉光;郝麗;程璐;;弓形蟲緩殖子期特異性抗原1基因的克隆、表達及對重組抗原的免疫反應性分析[J];中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志;2007年04期

6 張皚,熊濤衍,丁貞英;108例精神病患者弓形蟲感染的血清調查[J];中國神經精神疾病雜志;1994年01期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 成子碩;蘭婷;李迪;楊海靈;曾慶銀;;江南卷柏脫氫抗壞血酸還原酶的分子特性[J];生物工程學報;2011年01期

2 楊盛清;唐小異;袁仕善;陳海明;尹樂圖;;弓形蟲主要表面抗原1截短型片段的克隆與表達[J];懷化學院學報(自然科學);2007年02期

3 鄧艷琴,嚴延生,何似,翁育偉,陳亮;恙蟲病東方體sta56部分基因的克隆和表達[J];中國人獸共患病雜志;2001年06期

4 張華楠;古欽民;何深一;叢華;周懷瑜;李瑛;趙群力;;剛地弓形蟲RH株GRA2分子基因克隆與序列分析[J];基層醫(yī)學論壇;2004年09期

5 尹素改;蘆寶靜;王漢中;楊繼紅;;B組輪狀病毒W(wǎng)H-1株nsp2基因的原核表達與抗體制備[J];武漢大學學報(理學版);2006年02期

6 陳帥君;邊靖;;熱休克蛋白DnaK在大腸桿菌中的克隆與表達[J];天津農學院學報;2010年03期

7 徐艷紅;石琳;張濤;馮春玲;劉紅芹;屈浩;黃麗華;朱衛(wèi)彬;張宇光;;人CD271基因的克隆及原核表達[J];中國生物制品學雜志;2008年10期

8 甘宜敏;孔凡運;史震;湯仁仙;鄭葵陽;;健康人APOBEC3G基因的克隆及真核表達載體的構建與鑒定[J];徐州醫(yī)學院學報;2010年04期

9 范云,劉兵,王宏斌,王樹啟,王金發(fā);胡蘿卜抗凍蛋白基因的克隆及其在E.coli中的表達[J];中山大學學報(自然科學版);2002年03期

10 朱超;馮寶剛;陳獻偉;張明;關偉軍;;北京油雞β-防御素-7基因原核表達質粒的構建及表達[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2010年07期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王化磊;夏咸柱;楊松濤;王承宇;馮娜;鄭學星;李群;孫培錄;;抗狂犬病病毒糖蛋白單鏈抗體的表達、純化、復性與生物活性研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會養(yǎng)犬學分會第十二次全國養(yǎng)犬學術研討會論文集[C];2007年

2 張玉成;杜珍武;王雅麗;張桂珍;;分泌型核心蛋白聚糖真核表達載體的構建及在HepG2細胞中的表達[A];第十二屆中國體視學與圖像分析學術會議論文集[C];2008年

3 李娜;丁壯;馬愛霞;徐明;畢玉海;尹仁福;劉美;;NA-1株鵝源副粘病毒M、NP基因原核表達載體的構建與鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學會獸醫(yī)公共衛(wèi)生學分會成立大會暨第一次學術研討會論文集[C];2008年

4 賀艷芬;汪亮亮;頡孝賢;李加琪;;莢膜紅細菌SQR基因的克隆及重組質粒的構建[A];中國動物遺傳育種研究進展——第十五次全國動物遺傳育種學術討論會論文集[C];2009年

5 謝金文;沈志強;王金良;任艷玲;管宇;苗立中;;豬細小病毒(PPV)SD1株NS1基因的克隆與原核表達[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學術研討會論文集（上冊）[C];2009年

6 韓慶功;喬傳玲;楊煥良;陳艷;辛曉光;陳化蘭;趙玉軍;;H9N2亞型豬流感病毒HA基因的克隆及體外表達[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第六屆理事會第二次會議暨教學專業(yè)委員會第六屆代表大會論文集[C];2006年

7 張上隆;;柑橘轉化酶基因家族新成員的克隆和序列分析[A];張上隆果樹學文選[C];2006年

8 柴曉杰;王丕武;;玉米淀粉分支酶基因反義表達載體的構建[A];全面建設小康社會：中國科技工作者的歷史責任——中國科協(xié)2003年學術年會論文集（上）[C];2003年

9 孫雪;馬斌;周成旭;;蛋白核小球藻rbcS部分基因序列的克隆與分析[A];中國海洋湖沼學會藻類學分會第七屆會員大會暨第十四次學術討論會論文摘要集[C];2007年

10 楊文理;武靜;謝曉硯;魏玲;覃揚;;人vigilin基因全長編碼區(qū)的分段克隆及鑒定[A];第九屆西南三省一市生物化學與分子生物學學術交流會論文集[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 胡德榮;生物體內痛覺誘發(fā)和維持新機制被揭示[N];健康報;2008年

2 楊駿;蟈蟈投河自殺之謎原是體內蟲子在作祟[N];新華每日電訊;2005年

3 基因潮海外部;分子農業(yè)時代悄然到來[N];中國高新技術產業(yè)導報;2002年

4 張巍巍;寄生物與宿主分離有了新方法[N];科技日報;2008年

5 吳志軍 胥金章;我國啟動重大疾病蛋白質組學研究項目[N];中國高新技術產業(yè)導報;2002年

6 記者 李天舒;甲流病毒重要蛋白研究獲突破[N];健康報;2010年

7 本報記者 劉祖華;解碼人體基因 提高生命價值[N];中國組織人事報;2011年

8 實習生 龔曉蕾　記者 許琦敏;米飯也能調控你的基因？[N];文匯報;2011年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張運雄;歐文氏桿菌CXJZ95-198非纖維素降解特性及manA基因的克隆研究[D];中國農業(yè)科學院;2006年

2 黃志立;納豆激酶基因的克隆及其在大腸桿菌與畢赤酵母中的表達[D];華南理工大學;2001年

3 王嚴;曲霉植酸酶基因的克隆及其表達研究[D];大連理工大學;2007年

4 喻麟;豬生長激素基因cDNA克隆與表達效應研究[D];四川大學;2007年

5 馬曉生;Lentivirus病毒載體感染骨髓間質干細胞的誘導和定向分化[D];復旦大學;2006年

6 滕蕾;文昌魚Legumain基因的克隆、表達和功能研究[D];中國海洋大學;2009年

7 康巧珍;幽門螺桿菌中性白細胞激活蛋白基因克隆表達及免疫評價[D];鄭州大學;2005年

8 程天印;亞洲璃眼蜱唾液腺差異表達基因的研究[D];湖南農業(yè)大學;2005年

9 樊東;幾種鱗翅目昆蟲幾丁質酶基因的克隆與表達研究[D];東北農業(yè)大學;2004年

10 娜仁花;綿羊精子膜蛋白基因的表達研究[D];內蒙古大學;2006年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 相代榮;重組人肝再生增強因子的克隆和在畢赤酵母中初步表達[D];浙江大學;2009年

2 顏文卿;犬細小病毒VP_2基因的克隆、表達與鑒定[D];福建農林大學;2006年

3 畢城偉;Kringle5基因克隆、原核表達載體構建和蛋白表達的實驗研究[D];昆明醫(yī)學院;2009年

4 陳思強;應用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選hALR的相互作用蛋白[D];華南理工大學;2003年

5 胡曉航;銀狐生長激素基因克隆與基因表達研究[D];東北林業(yè)大學;2005年

6 常繼濤;雞病毒性關節(jié)炎病毒分離株S1基因的克隆與序列分析及RT-PCR檢測方法的研究[D];內蒙古農業(yè)大學;2006年

7 張宇;豬細小病毒SR-1株全基因測序研究[D];四川農業(yè)大學;2006年

8 農萬廷;腸膜明串珠菌（Leuconostoc. mesenteroide）葡聚糖蔗糖酶基因的克隆與表達[D];廣西大學;2007年

9 王學清;西農薩能羊凝乳酶原前體基因的克隆、生物信息學分析及真核表達載體構建[D];西北農林科技大學;2007年

10 王好;犬瘟熱病毒H蛋白基因片段的克隆與原核表達[D];吉林農業(yè)大學;2007年

本文編號：1060581