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重組慢病毒載體轉(zhuǎn)染羊骨髓間充質(zhì)干細胞及成骨基因表達量的變化

發(fā)布時間:2017-10-18 14:00

  本文關(guān)鍵詞:重組慢病毒載體轉(zhuǎn)染羊骨髓間充質(zhì)干細胞及成骨基因表達量的變化


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【摘要】:背景:堿性成纖維細胞生長因子具有促進骨髓基質(zhì)細胞分裂增殖作用,而骨形態(tài)發(fā)生蛋白2在誘導(dǎo)新骨形成方面有重要的研究意義。目的:分析骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和堿性成纖維細胞生長因子基因單獨和聯(lián)合轉(zhuǎn)染對體外培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細胞的增殖和骨向分化的影響,比較Ⅰ型膠原蛋白、骨鈣蛋白、骨橋蛋白等非特異性成骨基因于轉(zhuǎn)染前后骨髓間充質(zhì)干細胞相對表達量的差別,為構(gòu)建組織工程骨的種子細胞做理論依據(jù)。方法:構(gòu)建堿性成纖維細胞生長因子、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2慢病毒載體,分別轉(zhuǎn)染羊骨髓間充質(zhì)干細胞,得到堿性成纖維細胞生長因子組、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2組、聯(lián)合組、對照組細胞,提取RNA后采用實時定量PCR的方法檢測Ⅰ型膠原蛋白、骨鈣蛋白、骨橋蛋白等非特異性成骨基因的mRNA水平相對表達量的變化。結(jié)果與結(jié)論:對照組、堿性成纖維細胞生長因子、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2及聯(lián)合組4組間非特異性成骨基因表達量存在明顯差異(P0.05),且堿性成纖維細胞生長因子和骨形態(tài)發(fā)生蛋白2具有交互作用(P0.05),堿性成纖維細胞生長因子、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2聯(lián)合組的Ⅰ型膠原蛋白和骨鈣蛋白基因表達量明顯高于其他3組,且差異有顯著性意義(P0.05);但是骨橋蛋白基因中差異無顯著性意義(P0.05)。體外實驗結(jié)果顯示聯(lián)合轉(zhuǎn)染組中的Ⅰ型膠原蛋白、骨鈣蛋白、骨橋蛋白等非特異性成骨基因mRNA水平相對表達量較多,該組細胞的成骨功能最強,適合作為組織工程骨的種子細胞。
【作者單位】: 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院口腔修復(fù)科;新疆醫(yī)科大學(xué)地方病重點分子生物學(xué)實驗室;
【關(guān)鍵詞】干細胞 骨髓干細胞 骨髓間充質(zhì)干細胞 堿性成纖維細胞生長因子 骨形態(tài)發(fā)生蛋白 種子細胞 Ⅰ型膠原 骨鈣蛋白 骨橋蛋白 國家自然科學(xué)基金
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(81060088):三維打印構(gòu)建組織工程化牙槽骨的實驗研究 新疆維吾爾自治區(qū)自然科學(xué)基金(2011211A073):熒光蛋白標記的組織工程骨修復(fù)頜骨缺損及其成骨能力的觀測研究 新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院院內(nèi)項目(2012ZZGC01):組織工程牙支架材料粘結(jié)劑改性及力學(xué)性能的實驗研究~~
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 0引言Introduction骨髓間充質(zhì)干細胞是來源于骨髓基質(zhì)中的一種間充質(zhì)細胞,具有多向分化潛能,可向成骨細胞分化[1],是組織工程中的熱門種子細胞[2],F(xiàn)階段研究表明,堿性成纖維細胞生長因子具有促進骨髓基質(zhì)細胞分裂增殖的作用;而骨形態(tài)發(fā)生蛋白2在誘導(dǎo)新骨形成方面有重要的研

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