本文關(guān)鍵詞：小鼠骨髓源性樹突狀細(xì)胞的體外誘導(dǎo)培養(yǎng)及功能分析

  更多相關(guān)文章： 骨髓 樹突狀細(xì)胞 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子 白細(xì)胞介素-

【摘要】：目的:建立小鼠骨髓源性樹突狀細(xì)胞(DCs)體外培養(yǎng)和擴(kuò)增方法,為以DCs為靶點(diǎn)的免疫治療研究提供基礎(chǔ)。方法:從C57BL/6小鼠股骨和脛骨中提取骨髓細(xì)胞,以含重組小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF,400U/ml)和IL-4(200U/ml)的RPMI 1640(含10%FBS)進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng),于培養(yǎng)第4天加入脂多糖(LPS)繼續(xù)培養(yǎng)2d。利用倒置相差顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察細(xì)胞生長狀態(tài)和超微結(jié)構(gòu),流式細(xì)胞術(shù)鑒定培養(yǎng)第6天時(shí)DCs純度及免疫表型,流式細(xì)胞微球捕獲芯片技術(shù)檢測第2、4、6天培養(yǎng)上清中細(xì)胞因子IL-6、IL-10、巨噬細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)、干擾素-1(IFN-1)、TNF-α、IL-12p70含量。結(jié)果:重組小鼠GM-CSF和IL-4誘導(dǎo)培養(yǎng)小鼠骨髓細(xì)胞4d,加入脂多糖(LPS)繼續(xù)培養(yǎng)2d,近90%細(xì)胞高表達(dá)DCs特征性標(biāo)志物CD11c,高表達(dá)抗原提呈分子MHC-Ⅱ和共刺激分子CD86、CD80,具有典型的樹突狀形態(tài)學(xué)特征和分泌炎癥性細(xì)胞因子IL-6、IL-10、MCP-1、TNF-α和IL-12p70的功能。結(jié)論:小鼠骨髓細(xì)胞以重組小鼠GM-CSF和IL-4體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的DCs具有較高的純度,保持了體內(nèi)的形態(tài)學(xué)、免疫表型及功能特征。
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院病理科;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓 樹突狀細(xì)胞 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子 白細(xì)胞介素-
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81000848,81302538) 首都衛(wèi)生發(fā)展科研專項(xiàng)基金資助項(xiàng)目(2011-5002-01,2011-5002-02)
【分類號】：R392
【正文快照】： 樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DCs)是機(jī)體重要的抗原提呈細(xì)胞,發(fā)揮免疫監(jiān)視和免疫調(diào)控功能[1]。近年來,DCs已成為感染、移植、腫瘤等領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。DCs在機(jī)體內(nèi)數(shù)量稀少,分離和純化技術(shù)復(fù)雜,因此對其研究一直存在較大的困難。本研究中通過分離小鼠骨髓細(xì)胞,利用重組細(xì)胞因子

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王明軍;樹突狀細(xì)胞的形成、功能及可能的應(yīng)用[J];國外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊);2001年04期

2 戴盛明,楊春旭;樹突狀細(xì)胞異質(zhì)性研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊);2001年04期

3 時(shí)宏珍,戚春建,朱一蓓,席泓,古濤,時(shí)文彪,張學(xué)光;重組人可溶性CD40配體對樹突狀細(xì)胞體外分化、成熟及功能的影響[J];上海免疫學(xué)雜志;2002年02期

4 周燕瓊,劉小輝;樹突狀細(xì)胞的分離擴(kuò)增與培養(yǎng)技術(shù)研究進(jìn)展[J];解剖學(xué)研究;2002年03期

5 史敦云,汪明春;樹突狀細(xì)胞功能亞群及其調(diào)節(jié)因子的研究進(jìn)展[J];深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志;2002年05期

6 王全楚,馮志華;樹突狀細(xì)胞基礎(chǔ)研究及其在免疫治療中的作用[J];世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘;2002年06期

7 姚莉,梁曉俐;樹突狀細(xì)胞的凋亡與調(diào)控[J];免疫學(xué)雜志;2003年S1期

8 孟哲峰;樹突狀細(xì)胞來源的趨化因子的免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊;2004年01期

9 孫宇 ,陸江陽,王曉虹 ,楊毅佟 ,欣李玲;小鼠胸腺樹突狀細(xì)胞的分布與形態(tài)學(xué)觀察[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2004年09期

10 練詩梅,王曉波,薛祖光,張旗,孫健,荒木弘一;臍血來源樹突狀細(xì)胞的體外誘導(dǎo)及擴(kuò)增[J];中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;2004年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王濤;杜智;朱爭艷;;樹突狀細(xì)胞瘤苗的研究進(jìn)展(綜述)[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第29屆學(xué)術(shù)年會暨首屆生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會論文集[C];2009年

2 潘建平;張明徽;倪衛(wèi)琴;王青青;夏大靜;張立煌;余海;曹雪濤;;γ—干擾素在樹突狀細(xì)胞表型和功能成熟中的作用[A];中國免疫學(xué)會第四屆學(xué)術(shù)大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

3 翁霞;鄧曉輝;馬靜秋;余金妹;梁輝;;不同來源樹突狀細(xì)胞的培養(yǎng)研究[A];第三屆全國血液免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2003年

4 成翔;汪曉鶯;季玉紅;韓毓;吳瓊;;β-1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶-Ⅰ在樹突狀細(xì)胞中的表達(dá)及對其功能的影響[A];中國免疫學(xué)會第五屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2006年

5 劉曉霞;陳育民;;體外誘導(dǎo)生成樹突狀細(xì)胞成熟度和激活性的調(diào)控[A];中國免疫學(xué)會第五屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2006年

6 包晶晶;林海霞;馬t，

本文編號：1045453